التأثير الوقائي والعلاجي للمستخلص الكحولي لجذور نبات الهليون Asparagus officinalis في بعض التغيرات النسجية والوظيفية في أناث الجرذان البيض المستحث فيها متلازمة تكيس المبايض

اطروحة دكتوراه

اسم الباحث : فرح جواد كاظم المسعودي

اسم المشرف : أ. د اشواق كاظم عبيد اليساري

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان

سنة نشر البحث : 2023

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

هدفت الدراسة لمعرفة التأثير الوقائي والعلاجي للمستخلص الكحولي لنبات جذور الهليون( Asparagus officinalis) ضد التأثيرات الضارة الناتجة عن متلازمة تكيس المبايض polycystic ovary syndrome (PCOS) المستحثه بمادة الليتريزول letrozole في اناث الجرذ الأبيضRattus norvegicus وذلك عن طريق دراسة بعض التغيرات النسجية والمعايير الوظيفية والهرمونية.
أجريت الدراسة في البيت الحيواني التابع لكلية الصيدلة – جامعة كربلاء ومختبرات كلية التربية للعلوم الصرفة قسم علوم الحياة -جامعة كربلاء , المدة من بداية شهر شباط/ 2022 ولغاية شهر تموز /2022 ,استعملت خمس وثلاثون 35 من اناث الجرذ الأبيض من نوع Albino Rates قُسمت عشوائيا الى خمسة مجاميع وبواقع سبعة لكل مجموعة وتمت معالجتها على النحو التالي :المجموعة الأولى (G1) جرعت فمويا %1 كاربوكسي مثيل السليلوز Carboxymethylcellulose sodium salt (CMC) لمدة 28 يوم وعدت كمجموعة سيطرة سالبة , المجموعة الثانية (G2) جرعت فمويا بمستخلص جذور الهليون Asparagus officinalis بتركيز 400 ملغم \ كغم لمدة 28 يوم , المجموعة الثالثة (G3) جرعت فمويا مادة الليتريزول 1gm المذاب في CMC 1% لمدة 28 يوم لأستحثاث متلازمة تكيس المبايض والتي عدت مجموعة سيطرة موجبة , المجوعة الرابعة G4)) جرعت فوميا بمادة الليتريزول 1gm المذاب في CMC 1% لمدة 28 يوم وبعدها عولجت ب 400 ملغم\كغم بمستخلص الهليون Asparagus officials لمدة 28 يوم اخرى ,المجموعة الخامسة G5)) جرعت فمويا بمستخلص جذور الهليون Asparagus officials بتركيز 400 ملغم \ كغم وجرعت فمويا بمادة الليتريزول 1gm المذاب في CMC 1% وبنفس المدة أعلاه ، أجريت عليها دراسات عديدة: الدراسة نسجية ,الدراسة الكيمياء نسجية, الدراسة الكيمياء نسجية المناعية والقياسات النسجية فضلا عن الدراسة الهرمونية, دراسة مضادات الاكسدة ودراسة القياسات الوزنية لكل مجموعة ومن خلال هذه الدراسات فقد تم الحصول على النتائج التالية:
أوضحت المقاطع النسجية الملونة بملون الهيموتوكسلين والايوسين في مجموعة استحثاث تكيس المبايض إلى انخفاض في عدد الجريبات المبيضية، الجسم الأصفر وزيادة الجريبات الكيسية المتوسعة على سطح المبيض مقارنة بالسيطرة G1، اما في المجموعة المجرعة بمستخلص جذور الهليون G2 فقد لوحظت الجريبات المبيضية في مراحل نمو وتطور مختلفة في حين أظهرت مجموعتين العلاجية والوقائية G4, G5 زيادة في عدد الجريبات المبيضية وقلة الجريبات المتكيسة مقارنة مع مجموعة استحثاث تكيس المبايض.
أظهرت الدراسة الكيمياء نسجيه في المقاطع الملونة بملون Trichrome التي ميزت فقط مجموعة استحثاث التكيس G3 بكثرة وكثافة الالياف المغراوية مقارنة مع المجاميع التي امتازت بقلة كثافتها في المجاميع المعاملة بمستخلص جذور الهليون G2,G4,G5 ومجموعة السيطرة G1 .
في حين بينت دراسة الكيمياء نسجية المناعية عند تلوين البروتين المرتبط بالتكاثر الخلوي Ki67 في مجموعة استحثاث التكيس G3 تفاعلا سلبيا للطبقة الحبيبة بينما اظهرت الطبقة الغمدية تفاعلا إيجابيا أما مجموعة السيطرة G1والمجاميع المعاملة بمستخلص جذور الهليونG2,G4,G5 فقد أظهرت نشاطاً مناعيا ايجابياً للبروتين Ki67 في نوى خلايا الطبقة الحبيبة وخلايا الطبقة الغمدية في جدار الجريبات.
أدى تجريع الحيوانات بالليتريزول لاستحثاث تكيس المبايض G3 في نتائج القياسات النسجية انخفاضا معنويا (p <0.05) في اعداد الجريبات المبيضية ، عدد الجسم الأصفر مع زيادة عدد الجريبات المتكيسة وتوسعها كما لوحظ زيادة معنوية (p <0.05) في طبقة الخلايا الغمدية يقابلها انخفاض معنوي (p <0.05) في طبقة الخلايا الحبيبة مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة G1 ومجاميع الهليون G2,G4,G5 التي أظهرت ارتفاع معنوي (P˂0.05) في الجريبات المبيضية وعدد الجسم الأصفر مع انخفاض معنوي (p <0.05) لعدد الجريبات الكيسية مقارنة مع مجموعة G3 وحدوث ارتفاع معنوي (P˂0.05) في خلايا الطبقة الحبيبيةgranulosa cells في المجاميع العلاجية والوقائية G4,G5 في حين كان الانخفاض ليس معنويا في مجموعة الهليون G2 مقارنة مع مجموعة السيطرة G1.
كما اظهرت نتائج الدراسة الهرمونية في مجموعة تكيس المبايض G3 انخفاض معنوي (P˂0.05) في مستوى هرموني الاستردايول E2 والهرمون المحفز لمنو الجريبات FSH كما لوحظ ارتفاع معنوي (P˂0.05) في مستوى هرمون التستوستيرون T والهرمون اللوتيني LH مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة ومجاميع الهليون G2,G4,G5 التي بينت ارتفاع معنوي (P˂0.05) في مستوى الاستردايول E2 والهرمون المحفز لمنو الجريبات FSH مقابل انخفاض معنوي (P˂0.05) لمستوى هرمون التستوستيرون T والهرمون اللوتيني LH مقارنة مع مجموعة السيطرة الموجبة G3
واشارت نتائج مضادات الاكسدة في مجموعة G3 حصول انخفاض معنوي (P˂0.05) لمستوى الكلوتاثيون GSH بينما كان هنالك ارتفاعاً معنوياً (P˂0.05) في مستوى المانولديهايد MDA مقارنة مع السيطرة السالبة ومجاميع الهليون G2,G4,G5 التي أظهرت ارتفاعا معنوي (P˂0.05)في مستوى الكلوتاثيون GSH بينما كان هنالك انخفاض معنوي (P˂0.05) في مستوى المانولديهايد MDA مقارنة مع مجموعة السيطرة الموجبة G3.
اما الدراسة الوزنية فقد أوضحت ارتفاع معنوي (P˂0.05) في المجموعة المستحدث فيها تكيس المبايض في وزن الجسم و وزن المبايض مقارنة مع السيطرة السالبة ومجاميع الهليون G2,G4,G5 التي إشارات الى حصول انخفاض معنوي(P˂0.05) في أوزان الجسم والمبايض مقارنة مع مجموعة السيطرة الموجبة G3.
نستنتج من الدراسة الحالية أن مستخلص جذور الهليون عمل على تحسين معايير الخصوبة للمبيض عن طريق تحفيز نمو وتطور الجريبات المبيضية وتخفيف اضطرابات الغدد الصم والتمثيل الغذائي الناتجة عن استحداث تكيس المبايض.

The preventive and therapeutic effect of the alcoholic extract of Asparagus officinalis roots on some histological and functional changes in female albino rats induced by polycystic ovary syndrome

The study aimed to investigate the preventive and therapeutic effect of the alcoholic extract of Asparagus officinalis roots against the harmful effects of polycystic ovary syndrome (PCOS) induced by letrozole in female rats, Rattus norvegicus, by studying some histological changes and functional and hormonal parameters.
The study was conducted in the animal house of the College of Pharmacy – University of Karbala and the laboratories of the College of Education for Pure Sciences, Department of Life Sciences – University of Karbala, from the beginning of February 2022 to July 2022, thirty-five 35 female white rats of Albino Rates were used, which were divided randomly into five groups, with seven for each group It was treated as follows: The first group (G1) was dosed orally with 1% Carboxymethylcellulose sodium salt (CMC) for 28 days and counted as a negative control group. The second group (G2) was dosed orally with Asparagus officinalis root extract at a concentration of 400 mg / kg for a period 28 days, the third group (G3) orally dosed letrozole 1gm dissolved in CMC 1% for a period of 28 days to induce polycystic ovary syndrome, which was considered a positive control group ,The fourth group (G4) orally was dosed with Letrozole 1gm dissolved in CMC 1% for 28 days and then treated with 400 mg/kg of asparagus extract from Asparagus officials for another 28 days, the fifth group (G5) was dosed orally with asparagus root extract at a concentration of 400 mg \ kg and dosed orally with letrozole 1gm dissolved in CMC 1% for the same period above, many studies were conducted on it: histological study, histochemistry study, immunohistochemistry study and histological measurements as well as the hormonal study, the study of antioxidants and the study of weight measurements for each group and through these Studies have obtained the following results:
hemotoxylin and eosin-stained histopathological sections When compared to the control group, from the polycystic ovary group showed a reduction in the corpus luteum and an increase in cystic follicles that had dilated on the surface of the ovary, while in the asparagus root extract-treated group, the ovarian follicles were seen in various stages of growth and development. Two groups, therapeutic and preventive, increased.
The study showed histochemistry in sections stained with Trichrome stain, which distinguished only the group of induce PCOS with abundance and density of collagen fibers, from groups that were characterized by low density in groups treated with asparagus root extract and the control group.
While the granulosa layer exhibited a negative interaction with the protein associated with cellular proliferation Ki67 in the group of induce PCOS immunohistochemical analysis, the theca layer showed a positive interaction. The granulosa layer cells and theca cells in the wall of the secondary follicle displayed positive immunoactivity for the protein Ki67 in the control group and groups given asparagus root extract.
Dosing animals with letrizole to induce polycystic ovaries G3 resulted in a significant (p < 0.05) decrease in the number of ovarian follicles, the number of corpus luteum, and an increase in the number and expansion of cystic follicles. A significant (p < 0.05) increase in the theca cell layer was observed, corresponding to a significant (p < 0.05) decrease in the granule cells layer, compared with the negative control group G1 and asparagine G2, G4, G5 groups, Which showed a significant increase (P˂0.05) in the ovarian follicles and the number of corpus luteum with a significant decrease (P < 0.05) in the number of cystic follicles compared with the G3 group, and a significant increase (P˂0.05) in the granulosa cells in the therapeutic and preventive groups G4, G5 While the decrease was not significant in the G2 asparagus group compared with the G1 control group.
The results of the hormonal study in the G3 polycystic ovaries group showed a significant decrease (P˂0.05) in the level of the hormones estradiol E2 and the follicle growth stimulating hormone (FSH). Asparagus G2, G4, G5. Which showed a significant increase (P˂0.05) in the level of estradiol E2 and the follicle growth hormone (FSH) against a significant decrease (P˂0.05) in the level of testosterone T and luteinizing hormone (LH) compared with the G3 positive control group.
The results of antioxidants in the G3 group indicated a significant decrease (P˂0.05) in the level of glutathione GSH, while there was a significant increase (P˂0.05) in the level of malondialdehyde MDA compared with the negative control and asparagus groups G2, G4, G5, which showed a significant increase (P˂ 0.05) in the level of glutathione (GSH), while there was a significant decrease (P˂0.05) in the level of malondialdehyde MDA compared with the G3 positive control group.
As for the weight study, it showed a significant increase (P˂0.05) in the polycystic ovary group in body weight and ovaries weight, compared with the negative control and asparagus G2, G4, and G5 groups, which indicated a significant decrease (P˂0.05) in body weights and ovaries. compared with the G3 positive control group.
According to the results of the current study, the ovaries fertility parameters were improved by the asparagus root extract by promoting the follicles growth and development and lowering the prevalence of metabolic and endocrine problems brought on by the emergence of polycystic ovaries.