التاثير الوقائي للكلوتاثايون في التركيب الفسلجي و النسجي لجهاز العصبي المركزي ضد الجهد التاكسدي في اناث الجرذان

رسالة ماجستير

اسم الباحث : صادق صفاء مهدي

اسم المشرف : منى حسين الامي , وفاق جبوري البازي

الكلمات المفتاحية : "µl Microliter AChE acetylcholinesterase Aβ beta-amyloid B.W body weight CAT Catalase CHOL Cholesterol D-gal D-Galactose DPX Dextrin plasticizer xylene ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay GSH Glutathione H&E Hematoxylin & Eosin HDL High -density lipop

الكلية : كلية الطب البيطري

الاختصاص : علوم الطب البيطري / الفسلجة

سنة نشر البحث : 2021

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

أجريت هذه الدراسة للتحقيق في الدور الوقائي للجلوتاثيون في تلف الجهاز العصبي المركزي (المخ والحبل الشوكي) الناجم عن فرط D-galactose في إناث الجرذان.
قسمت أربع وأربعون (24) أنثى جرذان إلى أربع مجموعات (6 / مجموعة) ، تم حقن المجموعة الأولى بمحلول فسلجي داخل الصفاق (IP) لمدة أربعين (40) يومًا وعملت كمجموعة تحكم (G1) ، فأر في المجموعة الثانية تم حقن المجموعة داخل الصفاق بجرعة 100 مجم / كجم من وزن الجسم D-galactose (G2) ، وتم حقن جرذان المجموعة الثالثة بGlutathione داخل الصفاق بنسبة 100 مجم / كجم من وزن الجسم (G3) والمجموعة الرابعة (G4) ) بمزيج من D-galactose و Glutathione مع 100 مجم / كجم من وزن الجسم لكل منهما.
تم جمع عينات الدم أثناء الصيام بتقنية ثقب القلب في أربعين (40) يومًا من التجربة لجمع المصل لقياس: بيتا أميلويد ، أستيل استيراز ، Caspase 3 ، السعة الكلية المضادة للأكسدة ، Malondialdehyde ، انخفاض الجلوتاثيون ، الكاتلاز ، الجلوكوز والدهون. (الكوليسترول الكلي (TC) ، الدهون الثلاثية (TAG) ، تركيز مصل البروتين الدهني عالي الكثافة – الكوليسترول (HDL-c) ، البروتين الدهني منخفض الكثافة ، الكوليسترول (LDL-C) ، البروتين الدهني منخفض الكثافة جدًا ، الكوليسترول (VLDL-C)). علاوة على ذلك ، تم جمع عينة من الدماغ والحبل الشوكي من أجل الدراسة النسيجية والهيستولوجية المناعية.
أظهرت النتائج زيادة معنوية (p ≤0.01) في تركيز مصل بيتا اميلويد في G2 و G4 قارن مع مجموعة السيطرة و G3 ، وهناك زيادة معنوية (p ≤0.05) في تركيز ACHe في المجموعة G2 عند المقارنة مع مجموعة السيطرة و G3. مجموعات G3. يظهر مصل Casp3 زيادة معنوية(p ≤0.01) في المجموعة المعالجة G2 عند مقارنتها بـ G1 و G3 و G4. يُظهر مستوى الجلوكوز في الدم زيادة كبيرة (p ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. انخفاض معنوي (p ≤0.01) في وزن الجسم في المجموعة G2 بالمقارنة مع G1 ، G3 ، G4. أظهرت السعة الكلية لمضادات الأكسدة في الدم (TAO-C) انخفاضًا معنويًا (p ≤0.05) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر الجلوتاثيون المخفض في الدم انخفاضًا معنويًا (p ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر مصل Melanoaldihide زيادة معنوية (p ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر المصل انخفاضًا معنويًا (p ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر ديسموتاز المصل الفائق معنوية (p ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر الكوليسترول في الدم زيادة معنوية (p ≤0.05) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهرت الدهون الثلاثية في الدم زيادة معنوية (p ≤0.05) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر مصل البروتينات الدهنية عالية الكثافة – الكوليسترول انخفاضًا معنويًا (P ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر مصل البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة – الكوليسترول زيادة معنوية (P ≤0.01) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4. أظهر المصل البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة جدًا – الكوليسترول زيادة معنوية (P ≤0.05) في G2 عند المقارنة مع G1 و G3 و G4
أظهرت الصبغة النسيجية H&E التهابًا مزمنًا ومنطقة نخرية في مجموعة D-gal بينما كانت خفيفة في المجموعة المركبة. التصبيغ بصبغة خاصة أحمر الكونغو congo red stain بينت منطقة حمراء من بيتا أميلويد بينما كان أقل عددًا وأصغر حجمًا في المجموعة الحقن مختلطة .
أظهرت الدراسة أن apoptotic test TUNEL اظهر نتائج سلبية في مجموعة التحكم ومجموعة GSH ، بينما أظهرت إيجابية في مجموعة D-gal. بينما المجموعة المركبة تظهر نتيجية ايجابية ضعيفة .

 

The Effect of Glutathione in the Protection Of physiological and histological structure of Central Nerves System against oxidative stress in female rat

Abstract

This study is carried out to investigate the protective role of reduced Glutathione on the central nerves system damage induced by D-galactose overload in female rats.
Twenty-four adult female rats weight 200 gram were divided into four groups (6 in each group), the first group was injected with normal slain Intraperitoneal(IP) for forty (40) days and served as control group (G1), rats in the second group were injected 100 mg/kg B .W IP for 40 day of D-galactose (G2), rats of the third group (G3) were injected with Glutathione(GSH) Intraperitoneal(IP) with 100 mg/kg B .W for 40 day, the fourth group (G4) was injected with mix of D-galactose and Glutathione with 100 mg/kg B .W for each daily for 40 day . The experiment was carried out in the laboratories of the College of Veterinary Medicine, University of Karbala
Fasting blood samples were collected by cardiac punctures technique at forty (41) day of experimental for collecting the serum for measuring: beta amyloid, Acetylcholine Esterase(AChE),Caspase3,total anti-oxidant capacity(TAC), Malondialdehyde (MDA), Reduced Glutathione(GSH), catalase(CAT), Superoxide dismutase(SOD), glucose and lipid profile (total cholesterol (TC), triglyceride (TAG), serum concentration of high density lipoprotein- cholesterol (HDL-C), low Density lipoprotein- cholesterol (LDL-C), Very Low Density lipoprotein- cholesterol(VLDL-C)).Furthermore brain and spinal cord sample were collected for histological and immunohistochemical study.
The results showed a significant (p<0.01) increase in Serum beta amyloid concentration in G2 and G4 Compared with control and G3 groups, and there is a significant (p<0.05) increase in Serum Ache in group G2 when compared with control and G3 groups. Serum Casp3 shows a significant (p<0.01) increase in G2 treated group when compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Glucose level show significant (p<0.01) increase in G2 when Compared to G1, G3 and G4.A significant (p<0.01) decrease in body Wight in G2 group when compared to G1, G3, G4 groups. Serum Total antioxidant capacity (TAO-C) showed a significant (p<0.05) decrease in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Reduced Glutathione showed a significant (p<0.01) decrease in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Melanoaldihide showed a significant (p<0.01) increase in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum catalase showed significant (p<0.01) decrease in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Superoxide dismutase showed significant decrease (p<0.01) in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Cholesterol showed significant (p<0.05) increase in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum triglycerides showed significant (p<0.05) increase in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum High-density lipoproteins-cholesterol showed significant (p<0.01) decrease in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Low- density lipoproteins-cholesterol showed significant (p<0.01) increase in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups. Serum Very Low- density lipoproteins-cholesterol showed significant (p<0.05) increase in G2 when Compared with G1, G3 and G4 groups.
Histological change showed a chronic inflammation Neurodegeneration with beta amyloid deposition and TUNEL-positive in group that received 100 mg/kg.B.W of D-galactose, in another hand the combination group showed the ameliorate role of GSH in the neuro tissue.
The study concluded that D-galactose case oxidative stress to the central nerves system and glutathione plays a crucial role in physiological neruemetar , oxidant-antioxidant balance and apoptotic factors on the CNS of female rat