التحريض الوظيفي والكيميائي المناعي للسيليمارين على التعبير الجيني للبرولاكتين في الغدة النخامية والغدد الثديية خلال فترة الرضاعة في إناث الجرذان

اسم الباحث : دعاء هاشم جواد

اسم المشرف : أ.د.وفاق جبوري البازي; أ.م.د. حسين بشارمحمود

الكلمات المفتاحية : أ.د.وفاق جبوري البازي ; أ.م.د. حسين بشارمحمود

الكلية : كلية الطب البيطري

الاختصاص : علوم الطب البيطري / الفسلجة

سنة نشر البحث : 2022

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

أجريت هذه الدراسة الحالية للتحري عن تأثير السيليمارين على التعبير الجيني لهرمون البرولاكتين خلال فترة الرضاعة لاناث الجرذان .

12 من الجرذان المرضعة قسمت عشوائيا الى مجموعتين (6/ للمجموعة )جرعت المجموعة الأولى بالماء المقطر واعتبرت مجموعة السيطرة بينما جرعت المجموعة الثانية بالسيليمارين (200 ملغم /كغم من وزن الجسم ) يوميا لمدة عشر أيام.
جمعت عينات الدم بعد تجويع المرضعات بتقنيه ثقب القلب لقياس مستوى هرمون البرولاكتين , الايستروجين و البروجيسترون من مصل الدم . و جمعت عينات نسيج الغدة النخامية بعد التضحية بالحيوان و ذلك لقياس مستوى المؤكسدات و مضادات الاكسدة أ – تركيز الكلوتاثيون و المالونديالديهايد ب – فعالية انزيم سوبر أوكسيد ديسميوتاز و انزيم الكاتالاز .كما تم قياس مستوى تعبير جين البرولاكتين في نسيج الغدة النخامية . بالإضافة الى جمع مقاطع من الغدة النخامية و الغدد اللبنية لدراسة التغيرات الهيستوكيميائية .
أظهرت النتائج وجود ارتفاع معنوي P≤0.005) ) في مستوى هرمون البرولاكتين و الايستروجين , الكلوتاثيون , انزيم سوبر أكسيد ديسميوتاز و انزيم كاتالاز في المجموعة المعالجة بالسيليمارين بالمقارنة مع مجموعة السيطرة و كذلك لوحظ انخفاض معنوي في تركيز المالونديالديهايد وهرمون البروجيسترون في المجموعة المعالجة بالمقارنة مع مجموعة السيطرة .
اشارت النتائج الدراسة الحالية الى وجود علاقة ارتباط موجبة بين التعبير الجيني لهرمون البرولاكتين و هرمون البرولاكتين و الاستروجين، بينما أظهرت ارتباط سلبي بين التعبير الجيني و هرمون البروجسترون .
بينما يوجد ارتباط موجب بين التعبيرالجيني وتركيز الكلوتاثيون و سوبر أكسيد ديسميوتاز و انزيم الكاتالاز , بينما أظهرت ارتباط سلبي بين التعبير الجيني لهرمون البرولاكتين و المالونديالديهايد.
و وجدت الدراسة الحالية ان إعطاء السيليمارين يوميا لمدة عشرة أيام في فترة الارضاع ارتفاع في مستوى التعبير الجيني لجين البرولاكتين في المجموعة الثانية بالمقارنة مع مجموعة السيطرة .‌
توضح الدراسة الحالية أن هناك العديد من التغيرات الهيستوكيميائية المناعية التي حدثت في الغدة النخامية والثديية. لوحظ أحد هذه التغييرات في كثافة خلايا اللاكتوتروف في الغدة النخامية ونشاط هذه الخلايا أثناء إنتاج البرولاكتين.
في المجموعة المعالجة بالسيليمارين أظهر زيادة في حجم فصيصات الحويصلات الهوائية ، مما أدى إلى انخفاض مماثل في الأنسجة الدهنية. نسيج ضام ليفي رقيق يفصل فصوص الثدي عن بعضها البعض. تضمنت كل فصيص من الثدييات كمية من الحويصلات الثديية المملوءة بالحليب ، وكل حويصلة حلقية بخلايا مكعبة أساسية. على عكس المجموعة الضابطة ، كان للقناة داخل الفصيص في الحيوانات المعالجة تجويف كبير ويحدها خلايا مكعبة بسيطة. تم إعادة توصيل هذه الحويصلات الهوائية والقناة السنخية بالغشاء القاعدي ، وشكلت الخلايا الظهارية العضلية في مكانها طبقة واحدة خالية من العيوب
نستنتج من نتائج الدراسة الحالية أهمية تأثير السيليمارين على زيادة التعبير الجيني للبرولاكتين و انخفاض الحالة التأكسدية مع زيادة في فعالية الخلية اللاكتوتروف .

 

Physiological And Immunohistochemical Investigation Of Silymarin Effect On The Prolactin Gene Expression In Pituitary And Mammary Glands During Lactation Period In Female Rats

Abstract
The current study was carried out to investigation the effects of Silymarin on prolactin hormone gene expression in female rats during lactation period.
Twelve lactating rats were randomly divided into two groups (six /group), control group normal saline , while the silymarin group was intubated orally with (200 mg/kg/day B .W) of Silymarin for ten days
Fasting blood samples were collected by cardiac punctures technique and tissue from the pituitary gland after ten days of experimental for measuring serum biomarker levels of the Prolactin,Estrogen and Progesterone hormone pituitary tissue biomarker of oxidative stress including Glutathione (GSH) and Malondialdehyde (MDA) concentration.Superoxide Dismutase (SOD) and Catalase (CAT) activities, furthermore a sample of the anterial lobe of Pituitary gland was taken to measure gene expression and also taken mammary gland and anterial lobe of Pituitary gland were assessed for histopathological changes and immunohistochemistry.
The result of our study showed a significant (P<0.05) increase of serum prolactin and estrogen hormones, GSH concentration, SOD and CAT activities in the treated group with 200 mg/kg B .W of Silymarin compare to control group , while showed a significant decrease (P<0.05) in the serum progesterone hormone and MDA concentration in silymarin compare to control group .
The results of the present study indicated a positive correlation (P<0.05) between gene expression and prolactin and estrogen hormone, while showing a negative correlation between gene expression and progesterone hormone.
A positive correlation (P<0.05) was found between gene expression and GSH concentration, SOD and CAT activities ,while showing negative correlation between gene expression and MDA concentration in lactating rats

Our study found that when silymarin was given daily for ten days in lactation period, it increased the gene expression of the prolactin gene responsible for the production of the prolactin hormone compared to the control group.
The present study explained there were numerous histological and immunohistochemical changes occurred in pituitary and mammary glands, as well as pituitary and mammary glands immunoreactive of prolactin.One of these changes was observed in the density of lactotroph cells in the pars distalis of the pituitary gland and activity of these cells during followed production of prolactin also.
In control group the lactotrophs in pituitary gland appeared less in activity and paucity in reaction stain , while, in treated group Immunocytochemistry performed with the Prolactin showed a positive reaction throughout the anterior part of pars distalis, the lactotrophs cells appeared oval in shaped and closed to a sinusoid with density in secretory granules seemed in cytoplasm and interstitial spaces .
In control animals, the mammary glands demonstrated lobules distributed among amount of adipose tissue. The mammary alveoli seemed empty from milk and the alveolar cells weakly reaction by antibody of prolactin stain. In addition, the interlobular ducts it narrow and few in number,
The silymarin-treated group displayed enlarged lobules alveoli, with a commensurate decrease in adipose tissue. A thin band of fibrous connective tissue divides the mammary lobes. In comparison to the control group, the treated animals’ intra lobular ducts had such a large lumen and were bordered by plain cuboidal cells. A flawless single layer spindle was produced in its place by (myoepithelial) cells when the basement membrane was reattached to the alveoli and alveolar duct.
In condition, the findings of the present investigation support the significance of Silymarin in raising prolactin gene expression and in decreasing oxidation status with raised lactotroph activity.