الكشف عن الببتيدات المضادة للميكروبات في التهابات المسالك البولية عند الأطفال، في محافظة كربلاء

رسالة ماجستير

اسم الباحث : تمني ماجد حميد محمدرضا

اسم المشرف : أ.م.د. حسن علي حسين السعدي ; الطبيب الا ختصاص قحطان محمد علي هادي العبيدي

الكلمات المفتاحية : Urinary tract infection, Pyelonephritis, Cystitis, AMPs, Cathelicidin and HNP (1-3)

الكلية : كلية العلوم الطبية التطبيقية

الاختصاص : التحليلات المرضية

سنة نشر البحث : 2021

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

تعد التهابات المسالك البولية (UTI) واحدة من أكثر أنواع العدوى البكتيرية شيوعًا في مرحلة الطفولة. عدوى المسالك البولية تنقسم إلى ثلاث فئات؛ التهاب المسالك البولية العلوي (التهاب حويض الكلية الحاد)، التهاب المسالك البولية السفلي (التهاب المثانة)، وتسمم البول.

خلال الفترة الممتدة من ديسمبر 2020 إلى أبريل 2021، تم الحصول على عينات من الدم والبول من 109 من مرضى المسالك البولية المشتبه بهم و40 من الأصحاء، تراوحت أعمارهم من شهر واحد إلى 12 عامًا. تم جمع العينات في مكانين (مستشفى كربلاء التعليمي للأطفال والعيادة الخاصة). كان نظام Vitek2 الطريقة المستخدمة للتعرف على الأنواع البكتيرية. تم قياس ببتيد العدلات البشرية 1-3 (HNP 1-3) وCathelicidin (LL-37) باستخدام نظام ELISA، بينما تم قياس C-Reactive Protein بواسطة محلل الكيمياء التلقائي DIRUI CS-T180 وخلايا الدم البيضاء باستخدام Sysmex XP-300. أظهرت النتائج أنه من بين 109 عينة بول، 14 (12.8٪) لديها نمو غير معنوي للبكتيريا، 45 (41.3٪) ليس لديها نمو، و50 (45.9٪) وجدت بنمو بكتيري معنوي، فقط تم تضمينهم في العمل الحالي. يعاني 17/50 فقط من التهاب الحويضة والكلية بينما يعاني 33/50 من التهاب المثانة.

كانت نتائج العزلات البكتيرية 30/50 (60٪) Escherichia coli، 6/50 (12٪) Klebsiella pneumoniae، 5/50 (10٪) Pseudomonas aeruginosa، 4/50 (8٪) Proteus mirabilis، 3/50 (6٪) Enterococcus facalies، 1/50 (2٪) Achromobactin xylosoxidans، و1/50 (2٪) Streptococcus sanguinis. أظهر متوسط مستويات LL-37 البولية فروق معنوية (P≤0.05) بين المرضى (2251.9951 + 411.06814) والمجموعة الضابطة (627.4092 + 204.94316). كما كان الفرق معنويا بين مرضى التهاب حويض الكلية الحاد (2519.6169 + 330.90265) والتهاب المثانة (2114.1294 + 382.55454). كانت أعلى مستويات LL-37 في البول في مرضى P. mirabilis و E. faecalis و P. aeruginosa و E. coli و K. pneumoniae و A. xylosoxidans و S. sanguinis على التوالي.

كشفت دراسة المقارنة عن وجود فرق معنوي في مستويات HNP البولي (1-3) بين المرضى (5.3850 + 1.23619) ومجموعة الاصحاء (0.9047 + 0.52382)، بينما متوسط HNP (1-3) في مرضى التهاب الحويضة والكلية (5.8988 + 1.40645) كان أكبر بكثير من مرضى التهاب المثانة (5.1203 + 1.06697). كان أعلى تركيز في البول (1-3) في مرضى E. faecalis و P. aeruginosa و A. xylosoxidans و E. coli و K. pneumoniae و P. mirabilis و S. sanguinis على التوالي. أشار التحليل الإحصائي إلى وجود علاقة إيجابية قوية بين كرات الدم البيضاء وعدد العدلات (0.843 **) وCRP (0.598**) في الدم. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت نتائج الدراسة الحالية عدم وجود علاقة بين HNP (1-3) وCatheliciden عند مستوى P≤0.005.

لخصت هذه الدراسة إلى أن المستوى المرتفع لـ CRP وWBC في مرضى التهاب حويض الكلية الحاد هو أكثر بكثير من التهاب المثانة، وأن المستويات البولية من HNP1-3 وLL-37 كانت أعلى بكثير في المرضى بالمقارنة مع الاصحاء، وليس هناك علاقة إيجابية بين LL-37 وHNP (1-3) في مرضى المسالك البولية، وهناك علاقة إيجابية بين WBC في الدم وCRP في مرضى المسالك البولية.

Detection of Antimicrobial Peptides in Pediatric Urinary Tract Infections, in Karbala Province

Summary
Urinary tract infections (UTI) are one of the most common bacterial infections in childhood. UTIs Dividing into three categories; upper UTI (acute pyelonephritis), lower UTI (cystitis), and urosepsis.
During the period extending between December 2020 to April 2021, Blood and urine samples were obtained from 109 suspected UTI patients and 40 healthy controls, their ages were ranged from 1 month to 12 years. Collection of samples carried out in two places (Karbala teaching hospital for children and private clinic). The Vitek2 system was the best method for the identification of bacterial species. The Human Neutrophil Peptide 1-3 (HNP 1-3) and Cathilcidin (LL-37) were measured by using the ELISA system, while C-Reactive Protein was measured by DIRUI CS-T180 auto chemistry analyzer and white blood cells by using Sysmex XP-300. The result showed that out of 109 urine samples, 14 (12.8%) had non-significant bacteria growth, 45(41.3%) had no growth, and 50 (45.9%) were found with significant bacterial growth, only them were included in the present work. Only 17/50 have pyelonephritis and 33/50 have cystitis.
The results of bacterial isolates were 30/50 (60%) Escherichia coli, 6/50 (12%) Klebsiella pneumoniae, 5/50 (10%) Pseudomonas aeruginosa, 4/50 (8%) Proteus mirabilis, 3/50 (6%) Enterococcus facalies, 1/50 (2%) Achromobactin xylosoxidans, and 1/50 (2%) Streptococcus sanguinis. The mean of urinary LL-37 levels showed significant differences (P≤0.05) between patients (2251.9951+411.06814) and control (627.4092+204.94316). Also, the difference was significant between pyelonephritis patients (2519.6169 + 330.90265) and cystitis (2114.1294 + 382.55454) patients. The highest urinary LL-37 levels were in patients with P. mirabilis, E. faecalis, P. aeruginosa, E. coli, K. pneumoniae, A. xylosoxidans, and S. sanguinis, respectively.
The comparison study revealed that there was a significant difference in urinary HNP (1-3) levels between patients (5.3850+1.23619) and control (0.9047+0.52382), meanwhile Mean of HNP (1-3) in pyelonephritis patients (5.8988+1.40645) was much greater than cystitis (5.1203+1.06697) patients. The highest urinary concentration of HNP (1-3) was in patients with E. faecalis, P. aeruginosa, A. xylosoxidans, E. coli, K. pneumoniae, P. mirabilis, and S. sanguinis, respectively. Statistical analysis indicated that was a strong positive correlation between WBCs and both Neutrophil count (0.843**) and CRP (0.598**) in blood. In addition, present study results showed there is no a positive relationship between HNP (1-3) and Cathilciden (0.350*) of P ≤0.005.
This study concluded that the elevated level of CRP and WBC in pyelonephritis patients is much more than cystitis, and urinary levels of HNP1–3 and LL-37 were much greater in patients in comparison with healthy control, and there is no correlation between urinary LL-37 and HNP (1-3) in UTI patients, and there is a positive strong correlation between blood WBC and CRP (1-3) in UTI patients.