University of Kerbala
اسم الباحث : رنا عبد الحمزة الگـرعاوي
اسم المشرف : أ.م . د هيام عبد الرضا كريم العواد
الكلمات المفتاحية :
الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة
الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان
سنة نشر البحث : 2013
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
يعد مرض السحايا من الامراض المهمة اذ تعطي بعض الحالات المرضية نتيجة زرع سالب على الرغم من وجود الاعراض السريرية والاستجابة الالتهابية وقد يعود السبب الى العلاج المسبق بالمضادات الحيوية ، لذا تم اختيار هذه الدراسة لتسليط الضوء على تحديد الدقة التشخيصية والفائدة السريرية للطرائق المستخدمة في الكشف عن بكتريا Neisseria meningitidis في عينات سائل النخاعي الشوكيCerebrospinal fluid (CSF) وعينات الدم كتقنية تفاعل البوليمر المتسلسلPolymerase chain reaction(PCR) ومقارنتها مع طريقة الزرع الروتينية وطريقة اختبار التلازن Latex test (LA) .
تم جمع 50 عينة CSF و50 عينة دم للمرضى المشكوك بهم التهاب السحايا او تسمم الدم المراجعين لمستشفى كربلاء التعليمي للأطفال ومستشفى الحسين(ع) التعليمي والذين تم تشخيصهم سريرياً من قبل الاطباء الاختصاصيين في المستشفى اذ جمعت عينات سائل النخاعي الشوكي (CSF) من العينات المرسلة الى مختبر البكتريا في المستشفى وتم سحب عينة الدم من ذات الاشخاص قيد الدراسة الراقدين في وحدة الطوارئ او وحدة العناية المركزة Intensive care unit(ICU) او وحدة الامراض الانتقالية خلال المدة 2012-12-1 ولغاية 2013-5-1 .
تم زرع راسب عينات الـCSF وعينات الدم في الاوساط التقليدية ،كما تم فحص عالق الـCSF باستخدام اختبار التلازن (LA) للكشف عن المستضد المحفظي المتحرر من بكتريا N. meningitidis وكذلك تم استخلاص الـDNA البكتيري من عينات الـCSF والدم لغرض الكشف عن وجود الجين ctrA باستخدام تقنية الـPCR .
اظهرت نتائج الدراسة ان الطريقة الزرعية الروتينية اعطت نتيجة زرع جرثومي سالب بنسبة 0.0% لكل من عينات الـCSF وعينات الدم في حين ادى اختبار التلازن الى تشخيص ثمانية حالات (%16.0) من مجموع عينات الـCSF ،بينما بلغت عدد الحالات المشخصة بتقنية الـPCR 12حالة (%24.0) من مجموع عينات الـCSF و15حالة (%30.0) من مجموع عينات الدم .كذلك اظهرت النتائج ارتفاع حالات الاصابة بمرض السحايا المتسبب عن بكتريا N. meningitidis لدى الذكور مقارنة بالإناث اذ بلغ مجموع حالات الاصابة في عينة الدم للمرضى الذكور بطريقة الـPCR تسع حالات (%16.1) وللإناث ستة حالات (%13.6)، في حين بلغ عدد حالات الاصابة في عينات الـCSF بطريقة اختبار التلازن والـPCR للمرضى الذكور 11 حالة (%13.1) وللإناث تسع حالات (%13.6) .
وفي ضوء ما قدمته نتائج الدراسة نستنتج ان تقنية الـPCR هي الطريقة الأكفأ والأكثر دقة وفائدة في الكشف عن البكتريا في عينات الـCSF وعينات الدم لحالات مرضى السحايا المشكوك فيها ،ونسبة الكشف الافضل سُجلت من عينات الدم .
Detection of Neisseria meningitidis in Cerebrospinal fluid and Blood by PCR, Agglutination test and Bacterial Culture
Summary
The Meningitis of important disease as it gives some conditions as a result of culture negative in spite of the presence of symptoms and clinical inflammatory response was due to the treatment pre- antibiotic , so it was chosen this study to shed light on identifying diagnostic accuracy and clinical benefit of the methods used to detect for Neisseria meningitidis bacteria in samples of cerebrospinal fluid (CSF) and blood samples as a technique of polymerase chain reaction (PCR) method and compare it with the culture and method of routine agglutination test (Latex test).
50 CSF samples and 50 blood samples were collected of patients suspected infected with meningitis or septicemia outpatient hospital Karbala education for children and Hussein(AS ) Hospital of education and who have been diagnosed clinically by specialist doctors at the hospital, since collected samples of the cerebrospinal fluid (CSF) of the samples that sent to a laboratory of bacteria in the hospital , as well as blood sample were withdrawn for the same people under study and admitted to the emergency unit or intensive care unit (ICU) or transitional diseases unit during the period 12.01.2012 until 05.01.2013 .
Sediment of the CSF samples and blood samples were cultured in traditional media, has also been examining the CSF supernatant using the agglutination test (LA) for the detection of capsular antigen is free from bacteria N. meningitidis , as well as the DNA was extracted from bacterial samples of CSF and blood for the purpose of detecting the presence of the ctrA gene using a technique the PCR.
The study results showed that the routine culture method gave the bacteriological test result negative rate of 0.0% for each of the samples of CSF and blood samples, while the resulting of agglutination test is to detect eight cases ( 16.0% ) of the total samples of CSF, while the number of diagnosed cases enabled by the PCR technique 12 cases ( 24.0 % ) of the total samples of CSF and 15 cases ( 30.0 % ) of the total blood samples . well as the results showed high incidence of bacterial meningitis disease caused by N. meningitidis among males than females, with total cases in the blood sample of male patients by the way of PCR were nine cases ( 16.1% ) and females six cases ( 13.6% ) , while the total number of cases exist in samples of CSF by manner of agglutination test and PCR for male patients 11 cases ( 13.1 % ) and females nine cases ( 13.6 % ) .
In light of the presented results of the study conclude that the PCR technique is the way to the most efficient and the most accurate and useful in the detection of bacteria in samples of CSF and blood samples of patients with meningitis cases questionable , and better detection rate recorded in blood samples .
