تأثير المستخلصات الخام لنبات البردقوش في نمو بعض خطوط الخلايا السرطانية والطبيعية خارج الجسم

رسالة ماجستير

اسم الباحث : علي شهيد عبد حمزة الهلالي

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان

سنة نشر البحث : 2021

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

تضمنت الدراسة الحالية والتي استمرت لمدة سبعة اشهر إبتداءً من شهر تشرين الثاني 2020 لغاية شهر نيسان 2021 دراسة التأثير السمي الخلوي للمستخلصات المائية والكحولية لأوراق نبات البردقوش Origanum Majorana ضد ثلاثة خطوط خلوية )خطان سرطانيان هما خط خلايا سرطان الثدي البشري AMJ13 وخط خلايا سرطان المريء الغدي البشري SK-GT-4 وخط خلوي طبيعي هو خط الخلايا الظهارية البشري HBL-100 ,) بأستخدام ستة تراكيز من المستخلصات المائية والكحولية للنبات المستخدم في الدراسة وهي عبارة عن تخافيف نصفية ) 200,100,50,25,12.5,6.25 ) μg/ml ولثلاث أوقات تعريض هي ) 72,48,24 ( ساعة. تم اجراء الكشف الكيميائي الاستدلالي لمعرفة المواد الفعالة الموجودة في المستخلصات المائية والكحولية لأوراق نبات البردقوش, إذ وجدنا أن المستخلصات المائية والكحولية لأوراق نبات البردقوش تحتوي على العديد من المواد الفعالة وهي )التانينات, الفلافونيدات, القلويدات, الصابونيات, التربينات اوالسترويدات, الفينولات(.

تم اختبار المستخلص المائي والكحولي لأوراق نبات البردقوش للكشف عن التأثير السمي الخلوي للمستخلص المائي والكحولي لأوراق النبات و لجميع التراكيز الستة المستخدمة في خط سرطان الثدي البشري ) (AMJ13 ,حيث ظهر ارتفاع لمعدل النسبة المئوية لتثبيط نمو الخلايا السرطانية Inhibition rate وخلال فترات التعريض الثلاث (72, 48, 24) ساعة وبفروقات معنوية عند مستوى احتمالية ) P≤0.05 ( مقارنة مع السيطرة حيث تراوح معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص المائي عند اقل تركيز مستخدم ) 6.25 ) μg/ml ( 1 ± 3% ( ,) 2 8%± ,)

(15.33%± 2.08) على التوالي, وزاد معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص المائي عند استخدام التركيز( 200 ) μg/ml ( 2.5 ± ( 30.67% ( , 3.6 ± 52% ,) (74% ± 4.58) على التوالي. في حين المستخلص الكحولي كان أكثر كفاءة من المستخلص المائي في تأثيره على خط خلايا سرطان الثدي البشري ) AMJ13 ( حيث تراوح معدل النسبة المئوية للتثبيط الخلوي بالمستخلص الكحولي كذلك عند استخدام التركيز ) 6.25 ) μg/ml( 1 ± 4% ( ,) (11.33 % ± 1.52 , (18 % ± 2.64) على التوالي. وارتفع معدل النسبة المئوية للتثبيط الخلوي

بالمستخلص الكحولي عند استخدام تركيز ) 200 ) μg/ml ( 4.35 ± 32% ( ,) (56.67% ±8.14 ±3) 85% )على التوالي.

أما الخط الخلوي لسرطان المريء البشري ) SK-GT-4 ( فكان معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص المائي عند استخدام التركيز ) 6.25 ) μg/ml عند أوقات التعريض الثلاث (72, 48, 24) ساعة ) 2 ± 3% ( ,) 8%±2 ,)(14.33%±3.5) على التوالي. وزاد معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص المائي عند استخدام التركيز ) 200 )μg/ml ( 2.5 ± 27.66% ( ,) 4.5 ± 45.33% ,) 4.16) 75.66%± ( على التوالي. أما المستخلص الكحولي كان تأثيره على خط خلايا سرطان الثدي البشري ) AMJ13 ( حيث تراوح معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص

الكحولي كذلك عند استخدام التركيز ) 6.25 ) μg/ml (15.66% ± 6.5) ,(11.33% ± 1.52),(4.66% ± 0.57) على التوالي. وزاد معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص الكحولي عند استخدام التركيز ) 200 ) μg/ml (34.33% ± 3.04) (81.66% ± 2.5) ,(56% ± 5.56) , على التوالي.في حين أن التأثير التثبيطي للمستخلصات المائية والكحولي لأوراق نبات البردقوش على خط الخلايا الظهارية الطبيعي البشري HBL-100 , كان أقل سمية حيث سجل المستخلص المائي وكذلك الكحولي تأثير تثبيطي قليلة جدا مقارنة بالخطين السرطانيين ) (AMJ13 و) SK-GT-4 (, إذ إن عند التركيز ) 6.25 ) μg/ml لفترات التعريض الثلاث (72, 48, 24) ساعة لم تتجاوز نسبة التأثير التثبيطي ) 1.33%± 0.57 ( ,) 0.57 2.33% ± ,) 0.57)4.33%± ( على التوالي. كما ان النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص المائي عند استخدام التركيز ) 200 ) μg / ml

هي أيضا لم تتجاوز ال ) 1.15 ± 5.33% ( ,) 1.73 7%± ( ,) 0.57 ± 10.33% ( على التوالي. أما المستخلص الكحولي فكان أكثر سمية من المستخلص المائي في تأثيره على خط الخلايا الظهارية الطبيعي البشري HBL-100حيث تراوح معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص الكحولي كذلك عند استخدام التركيز ) 6.25 ) μg/ml ( 1 ±2% ( ,) 0.57 2.66%± ,) 0.57) 3.33% ± ( على التوالي. وزاد معدل النسبة المئوية للتثبيط بالمستخلص الكحولي عند استخدام اعلى تركيز ) 200 ) μg/ml ( 1.15 ± 6.33% ( ,) 8.66% ±0.57 , )

( 10.66%±1.15 (على التوالي.نستنتج من خلال ما تقدم امتلاك المستخلصات المائية والكحولية لأوراق نبات البردقوش Origanum Majoranaعلى العديد من المواد الفعالة والتي كان لها تأثير سمي واضح على الخلايا السرطانية بالنسبة للخط الخلوي لسرطان الثدي البشري AMJ13 و الخط الخلوي لسرطان المريء البشري SK-GT-4 , اما فيما يخص الخط الخلوي الطبيعي HBL-100 كانت النسبة المئوية لتثبيط نمو الخلايا منخفضة مقارنة مع تأثيرها على الخطان السرطانيين دلالة على انه امن على الخلايا الطبيعية بالاعتماد على حجم التركيز ومدة التعريض, ووجود علاقة إيجابية طردية بين مقدار حجم التركيز المستخدم ومعدل النسبة المئوية للتثبيط الخلوي لنمو الخلايا السرطانية حيث انه كلما زاد

مقدار التركيز المستخدم زاد معدل النسبة المئوية للتثبيط ولجميع أوقات التعريض الثلاثة (72,48,24) ساعة ,حيث إن التركيز ) 200 ) μg / ml للمستخلص المائي والكحولي اعطى اعلى نسب للسمية الخلوية وتثبيط نمو الخلايا السرطانية بالمقارنة مع بقية التراكيز المستخدمة في الدراسة ولجميع أوقات التعريض الثلاثة (72,48,24)ساعة.

Effect of the crude extracts of Organum Majorana Plant on the growth of some normal and cancerous cell lines in Vitro

Summary

The current study, which lasted for seven months, from November 2020 to April 2021, included a study of the cytotoxic effect of aqueous and alcoholic extracts of Origanum Majorana leaves against three cell lines (two cancerous lines, human breast cancer AMJ13 cell line and human esophageal adenocarcinoma cell line). SK-GT-4 and a normal cell line is the human epithelial cell line HBL-100), using six concentrations of aqueous and alcoholic extracts of the plant used in the study, which are half dilutions (200,100,50,25,12.5,6.25) μg/ml for three times Exposure is (72,48,24) hours. Inferential chemical detection was carried out to find out the active substances present in the aqueous and alcoholic extracts of marjoram leaves, as we found that the aqueous and alcoholic extracts of marjoram leaves contain many active substances (tannins, flavonoids, alkaloids, saponins, terpenes or steroids, phenols).
The aqueous and alcoholic extracts of Origanum Marjoram leaves were tested to detect the cytotoxic effect of the aqueous and alcoholic extracts of the leaves of the plant and for all six concentrations used in the human breast cancer line (AMJ13), which showed an increase in the percentage of inhibition of the growth of cancer cells during the three exposure periods (72). 24, 48) hours with significant differences at the probability level (P≤0.05) compared with the control, where the percentage rate of inhibition by the aqueous extract at the lowest used concentration ranged (6.25) μg/ml (1 ± 3%), (2 ± 8%). , (15.33% ± 2.08) respectively, and the percentage inhibition rate increased by the aqueous extract when using the concentration (200) μg/ml (2.5 ± 30.67%, (3.6 ± 52%), (74% ± 4.58), respectively. While the alcoholic extract was more efficient than the aqueous extract in its effect on the human breast cancer cell line (AMJ13), the percentage of cytosolic inhibition in the alcoholic extract also ranged when using the concentration (6.25) μg/ml (4%±1), (11.33% ± 1.52), (18% ± 2.64), respectively. The average percentage of cytostatic inhibition was increased by the alcoholic extract when using the concentration of (200) μg/ml (32% ±4.35), (56.67% ±8.14), (85% ±3), respectively.
As for the human esophageal cancer cell line (SK-GT-4), the average percentage of inhibition by the aqueous extract when using the concentration was (6.25) μg/ml at the three exposure times (72, 48, 24) hours (2 ± 3%), (8% ± 2), (14.33% ± 3.5), respectively. The percentage rate of inhibition by the aqueous extract increased when using the concentration (200) μg/ml (2.5 ± 27.66%), (4.5 ± 45.33%), (75.66% ±4.16) respectively. As for the alcoholic extract, its effect was on the human breast cancer cell line (AMJ13),
where the percentage rate of inhibition by the alcoholic extract also ranged when using the concentration (6.25) μg/ml (4.66% ± 0.57), (1.52 ± 11.33%) (6.5 ± 15.66%). Straight. The percentage of inhibition was increased by alcoholic extract when using the concentration (200) μg/ml (34.33% ± 3.04), (5.56 ± 56%), (2.5 ± 81.66%), respectively.
While the inhibitory effect of aqueous and alcoholic extracts of Origanum Marjoram leaves on the normal human epithelial cell line HBL-100, was less toxic as the aqueous and alcoholic extract recorded very little inhibitory effect compared to the two cancerous lines (AMJ13 and (SK-GT-4), where At the concentration (6.25) μg/ml for the three exposure periods (72, 48, 24) hours, the percentage of inhibitory effect did not exceed (1.33% ± 0.57), (2.33% ± 0.57) ,(4.33% ±0.57) respectively. The percentage of inhibition by the aqueous extract when using the concentration (200) μg / ml was also not more than (1.15 ± 5.33%), (1.73 ± 7%), (0.57 ± 10.33%), respectively. As for the alcoholic extract, it was more toxic than the aqueous extract in its effect on the normal human epithelial cell line HBL-100, where the percentage of inhibition by the alcoholic extract also ranged when using the concentration (6.25) μg/ml (1 ± 2%), (2.66% ± 0.57) and (3.33% ±0.57) respectively. The percentage of inhibition was increased by the alcoholic extract when using the highest concentration (200) μg/ml (1.15 ± 6.33%), (8.66% ± 0.57), (10.66% ± 1.15), respectively.
We conclude from the above that the aqueous and alcoholic extracts of the leaves of the Origanum Majorana plant contain many active substances, which had a clear toxic effect on cancer cells for the human breast cancer cell line AMJ13 and the human esophageal cancer cell line SK-GT-4, as for the The normal cell line HBL-100 The percentage of cell growth inhibition was low compared to its effect on the two cancerous lines, indicating that it was safe on normal cells depending on the volume of concentration and the duration of exposure, and there was a positive direct relationship between the amount of concentration used and the percentage rate of cytostatic inhibition of the growth of cancer cells. Whereas, the higher the amount of concentration used, the higher the percentage of inhibition for all three exposure times (72,48,24) hours, as the concentration (200) μg / ml of the aqueous and alcoholic extract gave the highest rates of cytotoxicity and growth inhibition of cancer cells compared to the rest of the concentrations. Used in the study and for all three exposure times (72,48,24) hours.