تحليل التنوع الوراثي لبعض أصناف الرز .Oryza sativa L باستخدام بعض المؤشرات الجزيئية

اطروحة دكتوراه

اسم الباحث : زينة ثامر عبدالحسين الرفيعي

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة-الوراثة الجزيئية-نبات

سنة نشر البحث : 2017

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

قدر التنوع الوراثي لأحد عشر صنفا معتمدا وخمسة تراكيب وراثية من الرز المدخلة باستعمال مؤشرات جزيئية ومؤشرات مظهرية. ومن خلال إجراء تجربة بالتعاون مع مركز أبحاث المشخاب في محافظة النجف خلال العام 2015، اذ تم تسجيل البيانات لبعض الصفات المظهرية مثل (ارتفاع النبات، طول الدالية، عمر النبات من الابذار الى النضج الفسلجي، وزن ألف حبة ووزن الحاصل كغم /دونم) التي أوضحت تباينا وراثيا عاليا بين الأصناف والتراكيب الوراثية قيد الدراسة للصفات أعلاه

أما مؤشرات التكرار المتسلسل البسيطة SSR) Simple Sequence Repeat) المعتمد على تفاعلات انزيم البلمرة المتسلسل اذ تم عزل الدنا من أوراق نبات الرز بعد 25 يوم من البذار. أظهرت النتائج الحصول على 149 اليل باستعمال 27 بادئ تراوحت أحجامها الجزيئية بين 66.873 -1015.402 زوج قاعدي ، بلغ أكبر عدد اليلات 9 اليل سجله كل من البادئ RM335J RM3412 اما اقل عدد اليلات بلغ 2 اليلات سجلها كل من البادئ RM201، RM122j RM236RM10772.اما محتوى التنوع الوراثي Polymorphism PIC information content) الذي يمثل انعكاس للتنوع الاليلي بين الأصناف والتراكيب تراوحت قيمه بين 0.0587 -0.8595 .كما تراوحت قيم التوع الوراثي بين 0.0605- 0.8730اذ مجل البادئ RM3412 أعلى قيم التوع الوراثي، إما اقل قيمه تنوع وراثي فجله البادئ RM10772 .سجل البادئ RM7443 أعلى قيم لمتباينة الزيجة Heterozygot بلغت 0.8000 . كما تباينت البادئات في إعطاء بصمة الوراثية المميزة لأصناف والتراكيب فيما بينها اذ اعطى البادئين RM8085 ,RM224 بصمة وراثية مميزة لأربعة من الأصناف والتراكيب. اقل بعد وراثي بلغ 0.4259 بين التركيب الوراثي الاول والثاني وهذا يعني وجود تشابه بدرجة عالية بين التركيبين الوراثين. ان نسبة التشابه الوراثي لجميع الأصناف والتراكيب تراوحت بين 0.0793 – 0.5741 اعتمادا على قيم الإبعاد الوراثية التي تراوحت بين 0.4259 – 0.9207 التي تشير الى نسبة تنوع وراثي كبير تراوحت بين 42%-92%، وهذا يكشف عن تباين وراثي عالي بين الأصناف والتراكيب مما يجعلها مصادر وراثي مهمة. بينت نتائج التحليل التجميعي عن تكون سبعة مجاميع رئيسية Main Cluster على مقياس بعد مقداره 0.12. لم توزع الأصناف والتراكيب بشكل عشوائي بل وزعت اعتمادا على الأصل او سلف مشترك وهدا يرجع الى كفاءة مؤشرات SSR في الكشف عن التوع الوراثي في نبات الرز.

كما امكن بواسطه مؤشرات التكرار المتدل البسيطة Simple Sequence Repeats SSR )) من الكشف عن مواقع الصفات الكمية المرتبطة بصفة نحمل الجفاف والجينات المتحمله للملوحة والجينات المقاومة لمرض اللفحة البكترية  Bacterial Leaf Blight Resistance الناجم عن بكتريا (Xanthomonas oryzaepv.oryzae(Xoo والجينات المقاومة للمرض لفحة غمد الرز – Sheath Blight Resistance الناجم عن فطر Rhizoctonia solani والجينات المقاومة ليعض الطرز البايلوجية لمرض brown plant hopper الناتج عن حشرة Nilaparvata lugens Stal. والجينات المقاومة لبعض الطرز البايلوجية لمرض gall midge resistance الناتج عن حشرة (.Orseolia oryzae (Wood-Mason

Analysis of genetic diversity of some rice cultiver Oryza sativa L. using some molecular markers

Genetic diversity of eleven cultivars and five genotypes of rice (Oryza sativa L), using molecular markers and morphological parameters through an experiment in collaboration with Mashkhab Research Center in AL-Najaf Data of morphological traits were calculated e.g. (plant height, Panicles length, plant age, weight of 1000 grains and grains yield)which showed high variation between cultivars genetic varieties and genetic compositions for all above mentioned traits.
The use of Polymerase Chain Reaction(PCR) based on the marker Simple Sequence Repeats (SSR) ,The DNA was isolated from fresh leaves of rice plant after 25 days from sowing using Genomic DNA plant kit Protocol . The amount of isolated was DNA as sailable amomnt rangea rangd 125-589 ng/μl with purity of 1.8to 1.9 . after agarose gel electrophoresis and staining with ethidium bromide. Results showed that there were 149 alleles by using 27 primers. The range of molecular size 66.873 -1015.402 bp . RM3412 and RM335 primers were the highest number of alleles 9 produced while the lowest number of alleles was 2 alleles recorded by RM201 ,RM10772, RM236 and RM122 primers. The Polymorphism information content (PIC), which is the a reflection of allelic diversity and allelic repetition between cultivars ranged value between 0.0587- 0.8595. As range of genetic dimension values between (0.0605-0.8730). Primers RM7443 Produced the highest value of Heterozygot with 0.8000. two primers (RM8085 and RM224) gave a distinctive genetic fingerprinting of 4 varieties and genotypes under study. The lowest genetic distance 0.4259 between the first and the second genotypes this means that there is a high degree of similarity between these genotype. Ggenetic similarity of percente all cultivars and genotype ranged between 0.0793 – 0.5741 depending on the genetic distance that ranging from 0.4259 – 0.9207 which refers to the large genetic diversity ranged from 42% – 92% .This reveals a high genetic variation between cultivars making hereditary good sources. Results also showed that Cluster analysis of seven major groups Main Cluster at the level distance scale of 0.12, they were not distributed randomly, but its distribution was common ancestor, and this is due to the efficiency of SSR marker in the detection of genetic diversity in rice plant.
By using Simple Sequence Repeats SSR it is possible able to detect quantitative traits loci that associated with drought tolerance and salinity resistance genes and bacterial leaf blight resistance genes caused by bacteria Xanthomonas oryzaepv.oryzae (Xoo). Sheath blight rice resistance genes caused by Rhizoctonia solani fungus , resistance genes was for some biotype brown plant hopper of the disease Nilaparvata lugens Stal. ,the resistance genes for some biotype disease gall midge resistance caused by an insect Orseolia oryzae (Wood-Mason).