تقييم تأثير الكريسين النانوي على مستويات العلامات الالتهابية والأكسدة لدى النساء العراقيات المصابات بالتهاب المفاصل الروماتويدي (دراسة مخبرية)

رسالة ماجستير

اسم الباحث : ساره ناظم صاحب

اسم المشرف : فاضل جواد ال طعمة; أثير حميد عودة الغانمي

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية الطب

الاختصاص : الكيمياء السريرية

سنة نشر البحث : 2024

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

التهاب المفاصل الروماتويدي هو مرض مناعي ذاتي مزمن، مع انتشار أعلى بين الإناث. يتأثر تطوره بالإجهاد التأكسدي، وزيادة أنواع الأكسجين التفاعلية، والسمنة. يعاني مرضى التهاب المفاصل الروماتويدي من مستويات مرتفعة من الكوليسترول، بما في ذلك الكوليسترول الكلي، والكوليسترول الضار، والكوليسترول الثلاثي، وانخفاض الكوليسترول الحميد. يواجه الكريسين، وهو مركب فلافونويدي له العديد من الأنشطة البيولوجية، تحديات مثل ضعف قابلية ذوبانه في الماء، وانخفاض الاستقرار، والتمثيل الغذائي السريع، وانخفاض الامتصاص. يمكن لتكنولوجيا النانو التغلب على هذه العقبات من خلال السماح بالإطلاق البطيء والمتحكم فيه لجسيمات الكريسين النانوية، مما قد يحسن من توصيل العلاج ويقلل من الإفراط في التعبير عن الحالة الالتهابية. تلعب الجينات المهمة، مثل MMP9 وTIMP1، دورًا مهمًا في تقدم المرض وتطوره.

الأهداف يركز جهد البحث على صياغة وتقييم تأثير جسيمات الكريسين النانوية على الالتهاب والإجهاد التأكسدي ومستويات التعبير الجيني لدى المرضى المصابين بالتهاب المفاصل الروماتويدي. كما أنها تتضمن تقييم السمنة ومستوى الدهون وأهميتها في هذه الحالة المرضية وكذلك فحص ارتباطها بالمرض.

طرق العمل أجريت دراسة حالة وشاهد في مستشفى الإمام الحسن المجتبى ومستشفى مرجان الطبي من منتصف أكتوبر 2023 إلى مارس 2024، والتي شملت 130 مريضًا مقسمين إلى 70 حالة التهاب مفاصل روماتويدي و60 حالة ضوابط صحية ظاهريًا. تم تقسيم مجموعة التهاب المفاصل الروماتويدي إلى 35 غير مصابين بالسمنة و35 مصابين بالسمنة. تمت مطابقة الدراسة حسب الفئات العمرية وتم جمع 5 مل من الدم الوريدي من مرضى التهاب المفاصل الروماتويدي. تم تقسيم الدراسة إلى ثلاثة أجزاء. قام الجزء الأول بتقييم مستويات TNF-α وIL-10 وNO وSOD وFRAP والدهون في التهاب المفاصل الروماتويدي. تم فحص وقياس مستوى الدهون في الدم باستخدام جهاز التحليل الكيميائي SMART-120 ونظام ELISA للكشف عن مستوى TNF-α وNO وIL-10 وSOD وFRAP. الجزء الثاني، بعد فصل مكونات الدم باستخدام Ficoll واستخراج خلايا الدم المحيطية، تم التحقيق في المختبر في السمات البنيوية للجسيمات النانوية المحملة بالكريسين والمغلفة بحمض الهيالورونيك كعوامل مضادة للالتهابات ومضادات الأكسدة وإظهار آثارها على علامات الدراسة لخلايا الدم المحيطية لمرضى التهاب المفاصل الروماتويدي. تم قياس خصائص الجسيمات النانوية باستخدام المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) والأشعة تحت الحمراء لتحويل فورييه (FTIR) وتقنيات AFM وMTT وDLS المختلفة. كان الجزء الثالث لتقييم تأثير الجسيمات النانوية المحملة بالكريسين والمغلفة بحمض الهيالورونيك على التعبير الجيني لمختلف الجينات بما في ذلك MPP9 وTIMP1. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام الحزمة الإحصائية للعلوم الاجتماعية الإصدار 21.

النتيجة أظهرت الدراسة زيادة في مستويات ملف الدهون، وخاصة في المجموعة البدينين المصابين بالتهاب المفاصل الروماتويدي، وكذلك زيادة في جينات TNF-α وIL-10 وNO وMMP9. بالإضافة إلى ذلك، أظهر المرضى انخفاضًا في مستويات HDL-C ومضادات الأكسدة وجين TIMP1. كان تأثير جسيمات الكريسين النانوية المغطاة بحمض الهيالورونيك واضحًا على علامات الدراسة وكذلك التعبير الجيني، حيث قللت جسيمات الكريسين النانوية من الإجهاد الالتهابي والأكسدي، وزادت من التعبير عن جين TIMP1، وقللت من التعبير عن جين.MMP9

الخلاصة تبحث الدراسة الحالية في المؤشرات الحيوية كأدوات قوية وفعالة في تشخيص التهاب المفاصل الروماتويدي، جنبًا إلى جنب مع تقييم الفعالية في تقليل العلامات الالتهابية والأكسدة مع تعزيز علامات مضادات الأكسدة من خلال استخدام الكريسين النانوي المغلف بحمض الهيالورونيك.

Evaluating the Effects of Nano-Formulated Chrysin on The Inflammatory and Oxidative Markers Levels in Iraq Women with Rheumatoid Arthritis (in vitro study)

Absract

Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease characterized by chronic inflammation of the joints, leading to pain, swelling, and progressive joint destruction. Oxidative stress and inflammation play a crucial role in the pathogenesis of RA. Chrysin, a natural flavonoid, has shown promising anti-inflammatory and antioxidant properties in various studies. However, the therapeutic potential of HA-encapsulated nano-formulated chrysin in RA has not been widely explored, especially in Iraqi women. This in vitro study aimed to evaluate the effects of HA-encapsulated nano-formulated chrysin on inflammatory and oxidative markers in Iraqi women with RA.
Aims The research endeavor is focused on formulating and assessing the effect of chrysin nanoparticles on inflammation, oxidative stress, and gene expression levels in patients afflicted with RA.
Methods A case-control study was conducted at Imam Hassan Al-Mujtaba Hospital and Marjan Medical Hospital from mid-October 2023 to March 2024, which included 130 females divided into 70 rheumatoid arthritis cases and 60 apparently healthy controls. The rheumatoid arthritis group was split into 35 non-obese and 35 obese. Age groups matched the study and 5 ml of venous blood was collected from rheumatoid arthritis patients. The study was divided into three parts. The first part evaluated the levels of TNF-α, IL-10, NO, SOD, FRAP and lipids in rheumatoid arthritis. The blood lipid profile was examined and ELISA system to detect the level of TNF-α, NO, IL-10, SOD and FRAP. The second part, after blood component separation using Ficoll and extraction of peripheral blood cells, in vitro investigated the structural features of chrysin-loaded and hyaluronic acid-coated nanoparticles as anti-inflammatory and antioxidant agents and demonstrated their effects on the study markers of peripheral blood cells of rheumatoid arthritis patients. The properties of the nanoparticles were measured using scanning electron microscopy (SEM), Fourier transform infrared (FTIR), various AFM, MTT and DLS techniques. The third part was to evaluate the effect of chrysin-loaded and hyaluronic acid-coated nanoparticles on the gene expression of various genes including MPP9 and TIMP1 Statistical analysis was performed using Statistical Package for Social Sciences version 21.
Result The study showed an increase in lipid profile levels, especially in the obese group with rheumatoid arthritis, as well as an increase in TNF-α, IL-10, NO, and MMP9 genes. In addition, patients showed a decrease in HDL-C, antioxidants, and TIMP1 gene levels. The effect of hyaluronic acid-coated chrysin nanoparticles was clear on the study markers as well as gene expression, as chrysin nanoparticles reduced inflammatory and oxidative stress, increased TIMP1 gene expression, and decreased MMP9 gene expression.
Conclusion The study concluded that inflammatory, oxidative, and antioxidant markers are valuable biomarkers for diagnosing RA. Specifically, it highlighted the therapeutic efficacy of hyaluronic acid-coated chrysin nanoparticles in significantly reducing inflammatory and oxidative markers while enhancing antioxidant markers. This underscores the potential of such nano-formulations in managing RA by addressing the underlying oxidative stress and inflammation associated with the disease.