دراسة الحركات المناعية 12٫5 و 18 لدى الاناث العقيمات : الارتباط مع مستوى هرمونات الخصوبة , نضوج البيوض و تطورالجنين في دورة أطفال الأنابيب والحقن المجهري

رسالة ماجستير

اسم الباحث : ضحى قاسم نعمه فحامه

اسم المشرف : أ.د عبير ظاهر ناجي الحسناوي أ.م.د علي ابراهيم رحيم

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية الطب

الاختصاص : الاحياء المجهرية الطبية

سنة نشر البحث : 2023

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث


العقم هو عدم القدرة على تحقيق الحمل بعد وقت مناسب من الجماع دون اتخاذ تدابير لمنع الحمل. تعد اضطرابات الإباضة أحد العوامل الأنثوية التي تسبب العقم، بما في ذلك تكيس المبايض وضعف احتياطي المبيض. ينتج نسيج المبيض بالإضافة إلى الخلايا المناعية السايتوكينات. توصف وظيفة السيتوكين في المبيض بأنها تعزز عمليات نمو الجريبات وتكوين الستيرويد وتجنيد وتنشيط الكريات البيضاء اللازمة للإباضة وإعادة تشكيل الأنسجة أثناء الإباضة واللوتين والتحلل الأصفر. هدفت الدراسة الحالية إلى تقييم الإنترلوكين (5), الإنترلوكين (12) و الإنترلوكين (18) في السائل الجريبي والمصل ودرست العلاقة بين هذه العلامات ونتائج حقن الحيوانات المنوية داخل السايتوبلازم .
هذه الدراسة عبارة عن مقطع عرضي وتنقسم موضوعات هذه الدراسة إلى ثلاث مجموعات عامل الذكور (40( و تكيس المبايض (30) و ضعف المبايض (30 ) المسجلين في مدينة الصدر التعليمية الطبية ومستشفى الكفيل التخصصي ومركز الأمير الدولي للاخصاب واطفال الانابيب خلال الفترة من تشرين الثاني ٢٠٢٢ إلى نيسان 2023. تم جمع عينات الدم في اليوم الثاني من الدورة والكشف عن مستوى الهرمون المنبه للجريب، والهرمون اللوتيني، وهرمون البرولاكتين، وهرمون الاستراديول، وهرمون مخزون البيوض وهرمون الاستراديول عند حقن HCG بواسطة MINI VIDS والمصل والسائل الجريبي الذي تم جمعه في يوم بقايا البويضات والكشف عن مستويات الإنترلوكينات 5 , 12و 18 بواسطة تقنية الأليزا.
أظهرت نتيجة هذه الدراسة أن هرمون المنشط للحويصلة و الاستراديول و هرمون مخزون البيوض وهرمون استراديول في يوم حقن HCG في ضعف احتياطي المبيض كانوا مختلفين بشكل كبير عن حالات العامل الذكري ومتلازمة تكيس المبايض مع (P= 0.005، P= 0.008،P= 0.005،P= 0.005) على التوالي. كان هرمون اللوتيني في العامل الذكري مختلفًا بشكل كبير عن مرضى متلازمة تكيس المبايض وضعف احتياطي المبيض مع (P = 0.006). بينما كان سبب البرولاكتين في متلازمة تكيس المبايض مختلفًا بشكل كبير عن العامل الذكري وضعف احتياطي المبيض مع (P=.0.005). بالإضافة إلى ذلك، كان إجمالي عدد البصيلات ودرجة الجنينI(GI) ودرجة الجنينII(GII) لنساء ضعف احتياطي المبيض مختلفين بشكل كبير عن حالات عامل الذكور ومتلازمة تكيس المبايض مع (P=0.005، P=0.005,P=0.003) على التوالي. في حين أن الجنين من الدرجة III (Glll) لنساء متلازمة تكيس المبايض كان مختلفًا بشكل كبير عن مرضى عامل الذكور وضعف احتياطي المبيض مع (P= 0.030)، كان الجنين المنقول في ضعف احتياطي المبيض مختلفًا بشكل كبير عن مرضى عامل الذكور ومتلازمة تكيس المبايض مع (P= 0.015).
فيما يتعلق بمستويات السايتوكينات (IL-5 و IL-12 و IL-18) في المصل والسائل الجريبي، لم يكن هناك فرق كبير بين المجموعات باستثناء مستوى IL-12 في السائل الجريبي ومصل عامل الذكور كان مختلفًا بشكل كبير عن مرضى متلازمة تكيس المبايض وضعف احتياطي المبيض الذين يعانون من (P= 0.005). أيضًا، حول متوسط نقل الجنين في النساء غير الحوامل، كان هناك فرق كبير بين مجموعات B.HCG مع (P=0.013). من ناحية اخرى، كان لمستوياتIL-5 في السائل الجريبي والمصل فرقًا كبيرًا بين مجموعات B. HCG مع (P = 0.005). بالإضافة إلى ذلك، كانت مستويات IL- 18 في السائل الجريبي والمصل فرقًا كبيرًا بين مجموعات B. HCG مع (P = 0.005).
علاوة على ذلك، في هذه الدراسة كان هناك ارتباط إيجابي بين مستوى مصل IL- 18 ومعدل الإخصاب في حالات العامل الذكري مع (P= 0.033). بينما في نساء متلازمة تكيس المبايض، كان هناك ارتباط سلبي بين IL-5 في السائل الجريبي ومعدل الإخصاب مع (P= 0.020) وعلاقة إيجابية بين IL12 في السائل الجريبي والجنين من الدرجة II مع (P= 0.014). فيما يتعلق بـضعف احتياطي المبيض كان هناك ارتباط سلبي بين IL-5 في السائل الجريبي ودرجة الجنين II مع (P= 0.033) والارتباط الإيجابي بين IL-18 في السائل الجريبي ودرجة الجنين IIمع (P= 0.021)، أيضًا، الارتباط الإيجابي بين مستوى مصل IL-5 مع معدل النضج مع (P=0.044). حول مستوى مصل IL-12، كان هناك ارتباط سلبي مع معدل الإخصاب مع (P= 0.002)، بينما كان مستوى مصل IL-18 مرتبطًا إيجابيًا مع الجنين من الدرجة II مع (P= 0.024).
أظهرت نتائج هذه الدراسة عدم وجود فرق معنوي بين المجموعات فيما يتعلق بمستويات السيتوكينات في السائل الجريبي والمصل باستثناء ارتفاع مستوى IL-12 في السائل الجريبي والمصل لمرضى العامل الذكور مقارنة بمرضى متلازمة تكيس المبايض و POR. لذلك ، قد لا يكون لهذه العلامات دور مهم في نتائج حقن الحيوانات المنوية داخل السايتوبلازم (الحقن المجهري).

Study of Interleukins 5, 12 and 18 in Infertile Female: Correlation with Reproductive Hormonal Levels, Oocyte Maturity and Embryonic Development IVF-ICSI Cycle

Summary
Infertility is the incapacity to fulfill pregnancy after reasonable time of sexual intercourse with no contraceptive measures taken. Ovulation disorders are one of the female factors that causes of infertility, including polycystic ovaries Syndrome (PCOS) and poor Ovarian reserve (POR). The ovarian tissue in addition to the immune cells produces Cytokines. Cytokine function in the ovary described as promoting processes of follicular growth, steroidogenesis, recruitment and activation of leukocytes necessary for ovulation and tissue remodelling during ovulation, luteinization, and luteolysis. The current study has aimed to evaluate interleukin 5 (IL-5), interleukin 12 (IL-12) and interleukin 18 (IL-18) in follicular fluid and serum and studied the correlation between these markers and Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) outcomes.
This study is a cross sectional and subjects of this study are divided into three groups : infertility due to male factor (n=40), PCOS (n=30) and POR (n=30) enrolled in AL-Sader Teaching Medical City, Al-Kafeel Super-speciality hospital and Al-Ameer International Center for Fertilization and IVF during the period from November 2022 to April 2023. The samples of blood were collected at cycle day two and detected the level of follicle stimulating hormone, luteinizing hormone, prolactin hormone, estradiol hormone, anti-mullerian hormone and estradiol hormone at day hCG injection by MINI VIDS. Serum and follicular fluid collected at oocytes retrieval day and detected levels of IL-5, IL-12 and IL-18 by ELISA technique.
The result of present study showed that day 2; FSH was higher level while, E2, AMH and Estradiol hormone (E2) at day of HCG injection were lower level in POR and there were significantly different from male factor and PCOS cases with (P=0.005, P=0.008, P=0.005, P=0.005) respectively. LH was low level in Male factor cause and there was significantly different from PCOS and POR patients with (P=0.006). While, prolactin was high level in PCOS cause and there was significantly different from male factor and POR causes with (P=0.005). In addition, the low mean of Total follicle number, Embryo Grade l (GI), Embryo Grade ll (GII) of POR cases were significantly different from male factor and PCOS cases with (P=0.005, P=0.005 and P=0.003) respectively. Whereas, the high mean of Embryo Grade III (Glll) of PCOS cases was significantly different from male factor and POR patients with (P= 0.030), the low mean of Transferred embryo in POR was significantly different from male factor and PCOS patients with (P=0.015).
Regarding, the serum and follicular levels of cytokines (IL-5, IL-12 and IL-18), there were no significant difference between groups except higher median of IL-12 level in the follicular fluid and serum of Male factor was significantly different from PCOS and POR patients with (P=0.005). Also, about the low mean of transferred embryo in non pregnant women, there was a significant difference between B-HCG groups with (P=0.013). Furthermore, higher median of follicular fluid and serum levels of IL-5 in negative group were a significant difference between B. HCG groups with (P=0.005). In addition, higher median of the follicular fluid and serum levels of IL- 18 in positive group were a significant difference between B-HCG groups with (P=0.005).
Moreover, in this study there were a positive correlation between IL- 18 serum level and fertilization rate in male factor cases with (P= 0.033). While in PCOS women, there were a negative correlation between IL-5 in follicular fluid and fertilization rate with (P= 0.020) and a positive correlation between IL12 in follicular fluid and embryo grade II with (P= 0.014). Concerning the POR there were a negative correlation between IL-5 in follicular fluid and embryo grade II with (P= 0.033) and positive correlation between IL-18 in follicular fluid and embryo grade II with (P= 0.021), also, positive correlation between IL-5 serum level with maturity rate with (P=0.044). About IL-12 serum level, there was a negative correlation with fertilization rate with (P= 0.002), while, IL-18 serum level was positive correlation with embryo grade II with (P= 0.024).
The results of this study have shown a non significant difference between groups regarding cytokines levels in follicular fluid and serum except elevation of IL-12 level in follicular fluid and serum for male factor patients compared with PCOS and POR patients . Therefore, these markers might have no important role in the intracytoplasmic sperm injection (ICSI) outcomes.