دراسة حساسية بكتيريا الزائفة الزنجارية المعزولة من المصابين بالحروق لبعض المستخلصات النباتية وقابليتها للانتقال عبر الحشرات في مدينة كربلاء

رسالة ماجستير

اسم الباحث : نوال هادي محسن الكعبي

اسم المشرف : أ.د رافد عباس العيسى : أ.م.د قيصر عبد السجاد

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان

سنة نشر البحث : 2022

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

أجريت هذه الدراسة للتحري عن حساسية بكتيرياPseudomonas aeruginosa المعزولة من المصابين بالحروق في مستشفى مدينة الامام الحسين الطبية في محافظة كربلاء للمستخلصات النباتية لنبات (الزعتر وقشور الرمان وأوراق التيكوما والشيح ) خلال الفترة من شهر كانون الأول 2021 لغاية شهر أيار 2022 اذ تم جمع 100 مسحة من المرضى الراقدين في ردهة الحروق والكشف عن مدى حساسيتها لـ 10من المضادات الحيوية. تم استخدام مستخلصات نباتية بتراكيز مختلفة واختبار نشاطها ضد تلك العزلات والتي تشمل مستخلص نبات الزعتر مستخلص قشورنبات الرمان ومستخلص أوراق نبات التيكوما ومستخلص نبات الشيح. كما تم دراسة التركيب الكيميائي لتلك المستخلصات في محاولة لتعزيز مفعولها. تم مقارنة نتائج المستخلصات التي تم الحصول عليها مع بعضها البعض لتحديد المركب عالي الفعالية.
بلغ العدد الإجمالي لعزلات P.aeruginosa 40 عينة من 100 عينة سريرية ، وتوزيع هذه العزلات كان: 57 ذكورا و43 اناثا ، تم التعرف على العزلات البكتيرية من خلال الاختبارات التشخيصية الروتينية والتي تضمنت الخصائص الزرعية و الكيميائية الحيوية. تم الكشف عن فعالية 10 مضادات حيوية بطريقة الانتشار القرصي وأظهرت النتائج درجة عالية من المقاومة لمعظم المضادات الحيوية ممثلة ب Gentamicin, Penicillin , Cephalosporin , Cefatoxime , Erythromycin ,Streptomycin, Amoxicillin , Levofloxacin, Oxacillin وفقًا لذلك ، كانت النتائج متسقة مع ما يسمى P.aeruginosa المقاوم للأدوية المتعددة (MDRPA) ماعدا المضاد الحيوي Imipemeim فقد سجلت البكتريا حساسية اتجاهه.
أظهرت نتائج هذه الدراسة أن الجنس والعمر والمكوث في المستشفى لفترة طويلة واستخدام المضادات الحيوية لفترات طويلة كان له تأثير حيث زادت عوامل الخطر من فرصة الإصابة. تم الكشف عن قابلية بكتيريا P.aeruginosa على انتاج الغشاء الحيوي بإختبار الصفائح المعايرة (MTP ) فقد اظهرت النتائج ان (37)عزلة بكتيرية وبنسبة 92.5% كانت منتجة للغشاء الحيوي في حين كانت بقية العزلات بمجموع (3) وبنسبة 7.5% غيرمنتجة اوضعيفة الانتاج. تم استعمال التراكيز(25،50،75،100) ملغم / مل لتقييم الفعالية التثبيطية للمستخلصات النباتية ،اظهرت المستخلصات المائية والكحولية لنبات الزعتروقشور الرمان وأوراق التيكوما ونبات الشيح فعالية تثبيطية اتجاه بكتيريا P.aeruginosa وزيادة هذه الفعالية مرتبط مع زيادة التركيز. وأظهر المستخلص المائي لأوراق نبات التيكوما بتركيز 100 ملغم / مل أعلى قطر تثبيط اذ بلغ 32.30± 1.43 ملم.
اظهرت نتائج الدراسة ان قيمة التركيزالمثبط الأدنى MIC والتركيز القاتل الأدنى MBC تتفاوت اعتمادا على نوع المستخلص وقوة الغشاء الحيوي إذ بلغت قيمة MIC للمستخلص المائي لنبات الزعتر(32،32،64) ملغم/ مل وكانت قيمة MBC (128،128،256) ملغم/ مل ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط والضعيف على التوالي ، في حين كانت قيمة MIC و MBC للمستخلص الكحولي (16،32،32) ملغم/ مل و(128،128،256) ملغم/ مل ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط والضعيف على التوالي . كما أظهرت الدراسة أن قيمة MICوMBC للمستخلص المائي لقشور نبات الرمان (16،32،32) ملغم/ مل (128،128،128) ملغم/ مل ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط والضعيف على التوالي، وكانت قيمة MIC و MBC للمستخلص الكحولي لقشور نبات الرمان (16،16،64) ملغم /مل و (128،128،128) ملغم /مل ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط والضعيف على التوالي.في حين ان قيمة MIC و MBC لمستخلص أوراق نبات التيكوما ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي(128،32) ملغم /مل و(128،64) ملغم /مل للمستخلصين المائي والكحولي على التوالي بينما بلغت قيمة MICوMBC للبكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي المتوسط (128،16) ملغم /مل (128،32) ملغم/مل للمستخلصين المائي والكحولي على التوالي وكانت قيمة MIC و MBC لمستخلص أوراق التيكوما (128،4) ملغم / مل و(128،8) ملغم/مل للمستخلصين المائي والكحولي على التوالي للبكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي الضعيف .اظهرت الدراسة ان قيمة MIC و MBC للمستخلص المائي لنبات الشيح بلغ (32،64،64) ملغم/ مل و(256،256،512) ملغم /مل ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط والضعيف على التوالي بينما كانت قيمة MIC وMBC للمستخلص الكحولي (64،64،64) ملغم/ مل و(256،256،512) ملغم /مل ضد البكتيريا المنتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط والضعيف على التوالي .
تم الكشف عن المركبات الكيميائية الفعالة الموجودة في المستخلصات النباتية بواسطة جهاز التحليل الكروموتوكرافي السائل ذو القدرة الفائقة HPLC و مقارنة نتائج المستخلصات التي تم الحصول عليها مع بعضها البعض لتحديد المركب عالي الفعالية.
أظهرت نتائج الدراسة ان بعض الحشرات (الصرصر الألماني Blattella germanica والذباب المنزلي Musca domestica والنمل Camponotus xerxes) لها القدرة على نقل بكتيريا P.aeruginosa وكانت حشرة الصرصر الألماني الأكثر كفاءة في النقل تليها الذباب المنزلي فيما كانت حشرة النمل الأقل نقلا للبكتيريا.

Study of sensitivity of Pseudomonas aeruginosa bacteria isolated from burn injuries to some plant extracts and their ability to transmission through

Summary
This study was conducted to investigate the sensitivity of Pseudomonas aeruginosa isolated from burn patients in Imam Hussein Medical City Hospital in Karbala Governorate to plant extracts of (Thymus vulgaris, Punica granatum peel, Tecoma stans leaves and Artemisia judaica) during the period from December 2021 to May 2022, as 100 swabs were collected from patients Those lying in the burn hall and their sensitivity to 10 antibiotics. Plant extracts with different concentrations were used and their activity tested against those isolates, which include thyme extract, pomegranate peel extract, tecuma leaf extract and wormwood extract. The chemical composition of these extracts was also studied in an attempt to enhance its effect. The results of the obtained extracts were compared with each other to identify the highly potent compound.
The total number of P. aeruginosa isolates was 40 samples out of 100 clinical samples, and the distribution of these isolates was: 57 males and 43 females. The bacterial isolates were identified through routine diagnostic tests, which included culturing and biochemical characteristics. The effectiveness of 10 antibiotics was detected by disc diffusion method, and the results showed a high degree of resistance to most antibiotics represented by Gentamicin, Penicillin, Cephalosporin, Cefatoxime, Erythromycin, Streptomycin, Amoxicillin, Levofloxacin, Oxacillin. Accordingly, the results were consistent with the so-called P.aeruginosa. Multidrug-resistant (MDRPA) except for the antibiotic Imipemeim, for which bacteria have been reported sensitive .
Conclusion
The results of this study showed that gender, age, prolonged hospital stay, and prolonged use of antibiotics had an effect as risk factors increased the chance of infection. The ability of P. aeruginosa to produce biofilm was detected by a calibrated platelet test (MTP). The results showed that (37) bacterial isolates with a percentage of 92.5% were biofilm-producing, while the rest of the isolates with a total of (3) and a rate of 7.5% were non-productive and weak. Concentrations (25,50,75,100) mg/ml were used to evaluate the inhibitory activity of plant extracts. The aqueous and alcoholic extracts of thyme, pomegranate peel, tecuma leaves and wormwood showed an inhibitory activity against P. aeruginosa bacteria, and the increase of this activity correlated with the increase in concentration. The aqueous extract of Tecoma leaves at a concentration of 100 mg/ml showed the highest inhibition diameter, which was 32.30 ± 1.43 mm.
The results of the study showed that the value of the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum killer concentration (MBC) vary depending on the type of extract and the strength of the biofilm. ml against strong, medium and weak biofilm producing bacteria, respectively, while the MIC and MBC values for alcoholic extract were (16,32,32) mg/ml and (128, 128,256) mg/ml against strong, medium and weak biofilm producing bacteria, respectively. Straight . The study also showed that the MIC and MBC value of the aqueous extract of pomegranate peels (16, 32, 32) mg / ml (128, 128, 128) mg / ml against strong, medium and weak biofilm-producing bacteria, respectively, and the MIC and MBC value of the alcoholic extract of the peels were Pomegranate plant (16,16,64) mg/ml and (128,128,128) mg/ml against strong, medium and weak biofilm-producing bacteria, respectively. While the MIC and MBC value of tecuma leaf extract against biofilm-producing bacteria, respectively. Strong (128,32) mg/ml and (128,64) mg/ml for the aqueous and alcoholic extracts, respectively, while the MIC and MBC value of the medium biofilm producing bacteria was (128,16) mg/ml (128,32) mg/ml for the aqueous extracts. And the MIC and MBC value of theTecoma stans leaf extract were (128.4) mg/ml and (128.8) mg/ml for the aqueous and alcoholic extracts, respectively, for the bacteria producing weak biofilm.
The study showed that the MIC and MBC value of the aqueous extract of the Artemisia judaica plant It was (32,64,64) mg/ml and (256,256,512) mg/ml against strong, medium and weak biofilm-producing bacteria, respectively between What was the MIC and MBC value of the alcoholic extract (64,64,64) mg/ml and (256,256,512) mg/ml against strong, medium and weak biofilm producing bacteria, respectively.
The active chemical compounds present in the plant extracts were detected by HPLC liquid chromatography apparatus and the results of the obtained extracts were compared with each other to determine the highly effective compound.The results of the study showed that some insects (Blattella germanica, Musca domestica and Camponotus xerxes) had the ability to transmit P.aeruginosa bacteria, and the German cockroach was the most efficient in transmitting, followed by the house flies, while the ants were the least transmitting bacteria.