دراسة دور هرمون Dehydroepiandrosterone DHEA في الفعاليات التكاثرية والنسجية في اناث الارانب المحلية Oryctolagus cuniculs المستحدث بها قصور الدرقية‎ جراحياً ‏وعلاجياً

اطروحة دكتوراه

اسم الباحث : بتول عباس حسين الجابري

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2018

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

صمم هذا البحث لدراسة دور الهرمون الستيرويدي المسمى  (DHEA) Dehydroepiandrosteronre

على الاضرار الوظيفية والنسجية الناجمة من استحداث قصور الغدة الدرقية جراحيا وعلاجياً في اناث

الارانب البالغة. كما استهدفت الدراسة معرفة تأثير قصور الغدة الدرقية على الكفاءة التكاثرية في أناث

الارانب البالغة ولتحقيق ذلك تضمنت الدراسة تجربتين. التجربة الاولى هي تجربة الاستئصال الجراحي

الجزئي للغدة الدرقية حيث استخدم في التجربة الاولى خمسة وعشرون ( 25 ) انثى ارنب بالغة خالية من

الامراض » تراوحت اعمارها بين(8-5) أشهر واوزانهم ما بين ( 2000- 2500) غرام. قسمت عشوائيا الى

خمس مجاميع متساوية (خمسة حيوانات/مجموعة) ولمدة 30 يوماً » المجموعة الاولى هي المجموعة التي

استأصل منها جزء من الغدة الدرقية وسميت مجموعة الاستئصال الجراحي الجزئي للغدة الدرقية

‎Ae yeas (a Aull, (G1)Partial Thyroidectomy‏ الاستئصال الجراحي الجزئي للدرقية مع التجريع

ب2ملغم/كغم بهرمون DHEA (G2) أما المجموعة الثالثة جرعت بالماء والغذاء الاعتيادي وعدت

كمجموعة سيطرة موجبة (G3 ) و المجموعة الرابعة ( G4) هي المجموعة التي جرعت ب 2ملغم/كغم

‎DHEA فقط ‏ و المجموعة الخامسة (G5) فهي مجموعة  Shame group التي عمل فيها شق

جراحي للجلد والعضلات فقط بدون استئصال جزئي للغدة الدرقية وعدت كمجموعة سيطرة سالبة. جمعت

عينات الدم في نهاية التجربة ودرست المعايير التالية ‎ وقياس تركيز هرمون ‏ Thyroid- Stimulating))‏

‎hormone (TSH)‏ وقياس تركيز هرمون T4) ‎ ‏ Thyroxin , وتركيز هرمون (T3

‎Triiodothyronine -‏ وتركيز الهرمون المحفزللجريبات  ‎Follicle-stimulating hormone (FSHl‏

وقياس تركيز هرمون ‎JS La)\5 Luteinizing hormone (LH) تركيز هرمون 5 Estrogen LH)‏

هرمون S –DHEA  أضافة الى دراسة التعبير الكيميائي النسجي ‎Immunohistochemistry ) ‏

‎  (IHC‏ لبروتين Thyroglobulin (TG ) في الغدة الدرقية ومستقبل الاستروجين ( ERα) strogen receptor-Alpha

 الغدة النخامية فضلا عن اخذ المقاطع النسجية للغدة الدرقية والنخامية والكظرية

ونسيج الرحم والمبيض والكبد لدراسة التغيرات.

أظهرت النتائج حدوث ارتفاع معنوي تحت مستوى احتمال(0>0.01) في مستوى هرمون TSH في

مجاميع الاستتصال الجراحي الجزئي للغدة الدرقية رافقة انخفاض معنوي تحت مستوى احتمال

(0>0.01)في مستوى تركيز هرموني T4,T3 مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة والموجبة ومجموعة

المعاملة بالهرمون فقط. وأيضا لوحظ ارتفاع معنوي في مستوى تركيز هرمون T4 في مجموعة الاستئصال

الجراحي مع المعاملة بهرمون DHEA مقارنة مع مجموعة الاستئصال فقط ومجموعة السيطرة الموجبة

والسالبة وايضا وارتفاع معنوي تحت مستوى احتمال (0.01>p) في مستوى هرمون ‎DHEA-S  E2‏

وLH و FSH في مجاميع المعاملة بهرمون DHEA مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة والموجبة

ومجموعة الاستئصال الجراحي فقط .في حين اظهرت نتائج الفحص النسجي تغيرات نسجية واضحة للغدة

الدرقية تمثلت بزيادة اعداد جريبات الدرقية. وفرط تنسج لخلاياها. وتغيرات تنكسية لخلايا الغدة العظرية

والنخامية واحتقان الاوعية الدموية . و كذلك انخفاض اعداد الجريبات المبيضية في نسيج المبيض وتفجي

خلايا الطبقة المخاطية للرحم وظهور القطيرات الدهنية وارتشاح الخلايا الالتهابية حول الوريد المركزي

لنسيج الكبد في مجموعة الاستنصال الجراحي الجزئي للغدة الدرقية . في حين لم يلاحظ وجود مثل هذه

التغيرات في مجاميع المعاملة بهرمون DHEA. وأظهرت نتائج تقنية ‎IHC‏ لبروتين الثايروكلوبيولين في

نسيج الدرقية ارتفاع معنوي في التعبير الكيميائي المناعي النسجي (تعبيرا عاليا) ‎Strong positive ‏ في

مجموعة الاستنصال الجراحي للغدة الدرقية ومجموعة الاستنصال الجراحي الجزئي مع التجريع ب 2 ملغم

/كغم من هرمون DHEAمقارنة مع باقي المجاميع. وارتفاع معنوي في التعبير الكيميائي المناعي النسجي

لمستقبل الاستروجين (ِa ‎(ER‏  الغدة النخامية لمجاميع المعاملة بهرمون DHEAمقارنة مع باقي المجاميع.

أما التجربة الثانية فهي تجربة التثبيط بعقار carbimazolلاستحداث قصور الدرقية .حيث استخدم 20

من اناث الارانب البالغة تراوحت اعمارها ايضا بين(8-5) أشهر واوزانهم ما بين( 1500- 2000) غرام

وقسمت الى اربعه ‏ مجاميع ‏ متساوية ‏ (5/مجموعة) ‏ كالاتي ‏ :- حيوانات المجموعة الاولى ( G1) التي

جرعت ب 0.02 ملغم/كغم من عقار 003111513201 لمدة أربعة اسابيع. اما

حيوانات المجموعة الثانية ( ‎ (G2‏ جرعت فمويا بالماء وعدت كمجموعة سيطرة. وجرعت حيوانات

المجموعة الثالثة ( G3) 2 ملغم / كغم بهرمون DHEA و 0.02 ملغم /كغم بعقار carbimazol.

والمجموعة الرابعة (G4) جرعت بهرمون DHEA فقط. جمعت عينات الدم في نهاية التجربة لقياس جميع

المعايير الهرمونية أعلاه في التجربة الاولى وتم اخذ المقاطع النسجية للغدة الدرقية والنخامية والكظرية

ونسيج الرحم والمبيض والكبد ايضا و تم قياس بروتين الثايروكلوبيولين للغدة الدرقية ومستقبل الاستروجين

في الغدة النخامية وأظهرت النتائج مسارا مشابها لما ظهر في نتائج التجربة الاولى من تغيرات هرمونية

تمثلت في الارتفاع المعنوي للهرمون المحفز للدرقية TSH وانخفاض هرموني T3 , T4 في المجموعة

التي جرعت بعقار الكاربيمازول مقارنة مع مجموعة السيطرة وباقي المجاميع التي لم تختلف معنويا فيما

بينها وايضا ارتفاع معنوي في مستوى تركيز هرمون –DHEA-S في مجاميع المعاملة بالهرمون بالمقارنة

مع مجموعة السيطرة ومجموعة التثبيط بالكاربيمازول وايضا ارتفاع معنوي في مستوى تركيز هرمون

الاستروجين في مجاميع المعاملة بالهرمون مقارنة مع مجموعة السيطرة ومجموعة التثبيط بالعقار وقد

أختلف تركيز هرمون FSH معنويا في مجموعة المعاملة بهرمون : DHEA مقارنة مع باقي المجاميع التي

لم تختلف معنويا فيما بينها وايضا وجود ارتفاع معنوي في مستويات الهرمون الوتيني LH في المجاميع

المعاملة بهرمون DHEA مقارنة مع السيطرة . أما التغيرات النسجية فقد اظهرت النتائج حدوث تنخر

وتنكس في الخلايا المبطنة للجريبات ووجود فجوات واضحة و تضخم في جريبات الدرقية وتغيرات تنكسيه

في الغدة النخامية والغدة الكظرية وايضا تغيرات تنكسيه في نسيج الرحم وانخفاض اعداد الجريبات

المبيضية وارتشاح الخلايا الالتهابية في نسيج الكبد في مجموعة المعاملة بالكاربيمازول مقارنة مع المجاميع

التي جرعت بهرمون ‎DHEA‏ أما نتائج التعبير الكيميائي المناعي النسجي لم تظهر تعبيرا عاليا لبروتين

الثايروكلوبيولين في مجاميع استحداث قصور الدرقية التثبيطي بالمقارنة مع التجربة الاولى. وارتفاع معنوي

في التعبير الكيميائي المناعي النسجي لمستقبل الاستروجين في مجاميع المعاملة بهرمون DHEA مقارنة مع

باقي المجاميع ايضا.

تم الاستنتاج من خلال نتائج الدراسة الحالية الى ان التجريع ب 2 ملغم/كغم بهرمون DHEA كان أمنأ

ولم يسبب اي تغيرات نسجيه بالأعضاء او تغيرات هرمونية ومن ناحية أخرى فأن هذا الهرمون تسبب في

التقليل من الاثار الضارة الناتجة عن قصور الغدة الدرقية .

Study the role of Dehydroepiandrosterone (DHEA) hormone in Reproductive efficacy and histological effects in local female rabbit Oryctolagus cuniculus which induced of hypothyroidism surgically and therapeutically

This study was designed to investigate the effect of the steroid hormone (DHEA) on the physiological and histological Changes caused by induced hypothyroidism (surgically and by Carbamizol) in adult female rabbits. The study also investigated the effect of hypothyroidism on reproductive efficiency in females rabbit: the percent study included two experiments.

The first experiment induction of partial Thyroidectomy. In the first experiment, 25 female adult rabbits were randomly divided into five equal groups (five animals / group). The first group included animals with partial thyroidectomy only (G1). The second group was included animal with partial thyroidectomy and drenched with DHEA hormone (2 mg / kg) for 4 weak (G2). The Third group was administered water was considered as a positive control group (G3) and the fourth group (G4) animal were administrated only of (2 mg / Kg) DHEA. Finally animals of fifth group (G5) were with Shame opperation, which performed by surgical operation of the skin and muscle only without partial thyroidectomy considered as a negative control group. Blood samples were collected at the end of the experiment and the following criteria were studied: Thyroxin concentration (T4) concentration of triiodothyronine (T3), Follicle-stimulating hormone (FSH) concentration, estrogen concentration (E2), Luteinizing hormone (LH) concentration The concentration of DHEA –S hormone, as well as the study of the immunohistochemical expression of the thyroid hormone protein Thyroglobulin (TG) in thyroid gland and the estrogen receptor-Alpha (ERα) in pituitary gland as well as taking the histological sections of the thyroid, adrenal, pituitary, uterine, ovary and liver tissue.

The results showed a significant increase in the level of TSH in the partial surgical excision groups (Thyroidectomy) accompanied by a significant decrease in the concentration of T4, T3 hormone in the partial Thyroidectomy group compared with negative and positive control group and the treatment group with hormone and showed a significant increase in the level of T4 hormone in the Thyroidectomy with DHEA hormone group compared with the Thyroidectomy group and positive , negative control group . and significant increase in the level of hormone E2 and DHEA-S and LH and FSH in the groups of treatment with hormone DHEA compared with the negative and positive control group and the group of surgical excision only. While the results of the histology showed clear changes of thyroid gland Increased thyroid follicles. and hyperplasia or hyperplastic cell in the thyroid follicles cells . Degenerative changes of the adrenal and pituitary cells and congestion of blood vessels. As well as decrease in the number of ovarian follicles in the ovary and vacuolated degenerative change in the cells of the mucous layer of the uterus and the precence of fatty droplets and inflammatory cell infiltration around the central vein of the liver tissue in the partial Thyroidectomy. While no changes were observed in the DHEA treatment groups.

The results of the IHC technique for thyroglobulin in thyroid tissue showed a significant increase in the histologic immunoglobulin expression (strong expression) in the partial Thyroidectomy group compared to the other groups. and significant increase expression of the estrogen receptor in the pituitary gland in the DHEA group compared to the other group.

The second experiment using Carbamizol to induced hypothyroidism. Twenty adult female rabbits were used and divided into four equal groups (5 animal / group): Group 1 animals (G1), which were administered 0.02 mg / kg Carbamizol for four weeks . The animals of the second group (G2) was orally drenched with water was considered as a control group. G3 animals were with 2 mg / kg DHEA and 0.02 mg / kg with Carbamizol oral administration. The fourth group (G4) was given DHEA only. Blood samples were collected at the end of the experiment to measure all the hormonal criteria above in the first experiment. The histological sections of the thyroid gland, adrenal, adrenal, uterine, ovary and liver were also taken. The thyroid thyroglobulin was measured for the thyroid gland and the estrogen receptor in the pituitary gland. The results showed a similar pattern to the results of the first experiment of the hormonal changes include an increase of TSH and lower in thyroid hormone hormone T4, T3 in the group that was drug Carbamizole compared to the control group and the rest of the groups did not differ significantly between them and also a significant increase in the level of hormone DHEA-S in groups of hormone treatment compared to Control group and Carbamizole –induced hypothyroidism group, as well as a significant increase in estrogen concentration in the DHEA groups compared to the control group and the Carbamizol-induced hypothyroidism group. The concentration of FSH was significantly different in the DHEA group compared with the rest of the hormone Which did not differ significantly between them. There was also a significant increase in levels of the LH hormone in the groups treated with DHEA compared to control group. The histological results showed presence the necrosis and degeneration in the follicular cells and the presence of vacuoles and hypertrophy of the thyroid follicular cells , and degenerative changes in the pituitary gland and the adrenal gland, as well as degenerative changes in the uterus tissue, reduced ovarian follicles and inflammation of inflammatory cells in liver tissue in the Carbamizole treatment group compared to groups that were drenched with DHEA hormone. The results of histochemical immunoglobulin did not show a high expression of TG in the groups of the Carbamizol induced hypothyroidism compared to the first experiment. significant increase in histochemical expression of the estrogen receptor in the DHEA groups compared to the other groups

Conclusions

The results of the present study indicate that the dosage of 2 mg / kg DHEA was safe and did not cause any changes in the tissues of the organs or hormonal changes, on the other hand, this hormone ameliorates the harmful effects of hypothyroidism .