دراسة فسيولوجية نسيجية مرضية لتأثير الكلوتاثايون قبل وخلال الحمل المبكر للجرذان المعرضة الى دي كلاكتوز

رسالة ماجستير

اسم الباحث : زينة غسان محمد

اسم المشرف : أ.د وفاق جبوري البازيك ; ا. م. د. علاء حسين مهدي الصافي

الكلمات المفتاحية : Abbreviation Meaning microliter AGE Advanced glycation endproduct B.W body wight C Centigrade CAT Catalase CHOL Cholesterol CL Corpus luteum Cm centimeter D-gal D-Galactose DNA Deoxyribonucleic Acid DPX;Dextrin plasticizer xylene EDTA;Ethylen ediami

الكلية : كلية الطب البيطري

الاختصاص : علوم الطب البيطري / الفسلجة

سنة نشر البحث : 2021

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

أجريت هذه الدراسة للتقصي عن الدور الوقائي للكلوتاثيون على مبيض اناث الجرذان البيض المعرضة لل D-galactose . أجريت الدراسة في مختبرات كلية الطب البيطري وكلية التربية للعلوم الصرفة /جامعة كربلاء في المدة من تشرين الأول 2020 لغاية حزيران 2021 ، استخدمت حيوانات الجرذان البيض وعددها 30 جرذاً، منها عشرة ذكور للتلقيح فقط أما الإناث وعددها 20 جرذاً تم حقنها داخل الصفاق (IP) بـ 100 ملغم / كغم من وزن الجسم D-galactose و GSH لمدة 45 يومًا.

تم تقسيم عشرين (20) من اناث الجرذ إلى أربع مجموعات )5 / مجموعة) ، تم حقن المجموعة الأولى (G1) بالمحلول الملحي الفسيولوجي0.9% داخل الصفاق لمدة ستة أسابيع وعدت كمجموعة تحكم ، وتم حقن جرذان المجموعة الثانية (G2) داخل الصفاق IP) ) 100 ملغم / كغم D-galactose من وزن الجسم . بينما تم حقن حيوانات المجموعة الثالثة (G3) داخل الصفاق 100 ملغم / كغم كلوتاثيون من وزن الجسم ، تم حقن حيوانات المجموعة الرابعة (G4) داخل الصفاق (IP) بنسبة 100 ملغم / كغم كل من الكلاكتوز والكلوتاثيون من وزن الجسم.

تم جمع عينات الدم بعد منع الطعام عن الحيوانات لمدة ثمانية ساعات بتقنية طعنة القلب بعد45 يوم من التجربة لقياس: المؤشرات الحيوية للإجهاد التأكسدي بما في ذلك تركيز الكلوتاثيون في الدم والمانولديهايد والسوبراوكسايد دايستيز والكاتاليز, كذلك قياس تركيز هرمون المحفز لنموالجريبات ، والهرمون اللوتيني ، وهرمون الاستروجين والبروجسترون ومعرفة صورة الدهون في الدم ، البروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL) ، البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL) ، الدهون الثلاثية ، الكوليسترول والبروتين الدهني منخفض الكثافة جدًا (VLDL) ، وتقدير تركيز الكلوكوز بالدم قبل وبعد الحمل ودراسة التغيرات النسيجية لأنسجة الرحم والمبيض في اليوم السابع من الحمل.

أظهرت نتائج الدراسة قبل الحمل زيادة معنوية (p≤0.05) في مستوى الجلوكوز في G2 مقارنة مع G1 و G3 و G4 كما أظهرت زيادة معنوية في MDA و TC و TAC و LDL-C و VLDL-C في مجموعة G2 مقارنة مع المجموعات الأخرى ، كما تبين ان استروجين مصل الدم حصل فيه زيادة معنوية (p≤0.05) في G2 مقارنة مع مجموعة التحكم. وأظهر انخفاضًا معنويًا في HDL-C و SOD.CAT و GSH في G2 مقارنة بالمجموعات G1 و G3 و G4 ، أظهرت نتائج FSH انخفاضًا معنويًا (p≤0.05)في مجموعة G2 مقارنة بالمجموعات G1 و G3 ، بينما أظهرت نتائج LH انخفاضًا معنويًا (p≤0.01) في G3 و G4 مقارنة بالمجموعات الأخرى ، وكذلك البروجسترون في الدم اظهر انخفاضًا معنويًا (p≤0.05) في مجموعة G2 عند مقارنتها بالمجموعات G1 و G3 و G4.

بينما أظهرت النتائج في دراستنا بعد سبعة أيام من الحمل انخفاضًا معنويًا (p≤0.05) في مصل LH ومستوى FSH في مجموعة G2 مقارنة بالمجموعات G1وG3 و G4 ، أيضًا انخفاض معنوي في هرمون الاستروجين والبروجستيرون في الدم في المجموعة G2 مقارنة مع المجموعات الأخرى، أظهر البحث انخفاضًا ملحوظًا في مستوى HDL-C تركيز GSH و SOD و CAT في المجموعة G2 مقارنة بالمجموعات الأخرى ، بينما أظهر زيادة معنوية (p≤0.05) في مستوى مصل البروجسترون و TC و TAG و LDL-C و VLDL-C و MDA في تجميع مجموعة G2 مع مجموعات G1 و G3 و G4.

أما التغير النسيجي فكان بتأثير D-galactose على المبيض ، حيث أثر على معدل التبويض وعدد البصيلات الناضجة في المبيض، ومن ناحية أخرى لم يكن له تأثير على انغراس الأجنة في رحم الجرذان الحامل ، ولاحظنا في المقاطع النسيجية للمبايض والرحم للمجموعات التي عولجت بالجلوتاثيون ، كانت النتائج على النقيض من D-galactose فقط ، كان المبيض في ذروة نشاطه ، وكان الرحم والانغراس في الشكل الصحيح.

في الختام ، تؤكد نتائج هذه الدراسة الدور الوقائي لـ GSH ضد D-galactose الزائد في المبيض قبل وأثناء الحمل.

Physiological and Histopathological Study of Glutathione Effect Before and During Early Pregnancy Rats Exposed to D-galactose

Summery
This study is carried out to investigate the protective role of Glutathione on the reproductive system induced by D-galactose overload in female rats. injected intraperitoneally (IP) with 100 mg/kg B .W of D-galactose and GSH for 45 day.
Twenty female (20) rats were divided into four groups (20/5), the first group was injected with normal saline for 45 day and served as control group(G1), rats in the second group were injected intraperitoneally (IP) with 100 mg/kg B .W of D-galactose (G2). While animals of the third group were (G3) injected intraperitoneally (IP) with 100 mg/kg B .W of Glutathione , rat in the fourth group (G4) were injected intraperitoneally (IP) with 100 mg/kg B .W of D-galactose and Glutathione .
Fasting blood samples were collected by cardiac punctures technique at 45 day of experimental for measuring: biomarker of oxidant and antioxidant including serum Glutathione (GSH) , Malondialdehyde (MDA) concentrations ,Superoxide dismutase (SOD) and Catalase (CAT) .serum hormones follicle stimulating hormone (FSH) ,Luteinizing hormone (LH),Estrogen hormone and Progesterone hormone serum Lipid profile ,Low density lipoprotein (LDL),High density lipoprotein (HDL),Triglycerides(TAG),Total Cholesterol(TC) and Very Low density lipoprotein (VLDL),D-serum Glucose
The results before pregnant revealed to a significant (p≤0.05) increase in Glucose level in G2 compared with G1,G3 and G4 also showed a significant increase in MDA,TC,TAC,LDL-C,VLDL-C in G2 group comparing with other groups ,serum estrogen showed a significant (p≤0.05) increase in G2 comparing with control group. And showed significant decrease in HDL-C ,SOD.CAT and GSH in G2 comparing with G1,G3 and G4 groups , serum FSH showed a significant decrease in G2 group comparing with G1 and G3groups ,while serum LH in G3 and G4 comparing with other groups, also serum progesterone calculated showed a significant decrease in G2 group when comparing with G1, G3 and G4groups .
While results in our study after seven day of pregnant showed a significant decrease (p≤0.05) in serum LH and FSH level in G2 group comparing with G1.G3 and G4 groups ,also a significant decrease in serum estrogen and progesteron in G2 group comparing with other groups .The research revealed to a significant decrease in the level of HDL-C. GSH,SOD and CAT concentration in the G2 group comparing with other groups, while showed a significant(p≤0.05) increase in the serum level of progesterone, TC, TAG, LDL-C,VLDL-C and MDA concentration in G2 group compering with G1,G3 and G4 groups .
The histological change, it was the effect of D-galactose on the ovary, it affected the rate of ovulation and the number of mature follicles in the ovary. On the other hand, it had no effect on the implantation of embryos in the uterus of pregnant rats, and we noticed in the histological sections of the ovaries and uterus of the groups that were treated with glutathione, the results were in contrast to D-galactose only, the ovary was at the peak of its activity, and the uterus and implantation were in the correct form.
In conclusion, the results of this study confirm the protective role of GSH against the D-galactose over load in the reproductive system and hormones before and during early pregnancy