University of Kerbala
اسم الباحث : ايناس خالد كاظم الخالدي
الكلية : كلية العلوم
الاختصاص : علوم الحياة
سنة نشر البحث : 2015
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
اشتملت هذه الدراسة على 100 مريضة من الإناث. وقد أجريت هذه الدراسة في الفترة من كانون الأول 2013 إلى كانون الثاني 2015. جميع المرضى حضروا الى مستشفى النسائية والتوليد التعليمي في كربلاء المقدسة العراق.
كانت الغالبية العظمى من المرضى الذين يعانون من إفرازات مهبلية (73%) أقل من 35 سنة. وكانت 93% في سن البلوغ (45-14 سنة) . وقد لوحظ تغيير الألوان في الإفرازات في 43 مريضة (%43.4)، في حين تم الكشف عن رائحة سيئة في 69 مريضة (%69.7). ولم يكن لدى 62 مريض (%62.6) عسر البول (حرق في التبول). وفيما يتعلق بمدة الأعراض حوالي نصف المرضى (49%) كانت مزمنة (استمرت الأعراض لأكثر من شهر) . تم الكشف عن الالتهابات المتكررة في %37 من المرضى. وكان 42 من المرضى الحوامل (%42)، 15 مريضة (%15) ذكرت بأن ازواجهم كانوا يستخدمون الواقي الذكري. معظم المرضى ( 59) ذكرت تاريخ أخذ حبوب منع الحمل .
تم الحصول على 174 عزلة جرثومية من مجموعه 100 مريضة. كان نوع البكتيريا الأكثر شيوعاً E.coli . 37% (65) ، يليه P.maribilis 21% (37) ، Coagulase-negative staphylococci 19% (33) ، K. puenmoniae .7% (13) ، بالإضافة الى اعداد قليلة من الكائنات الحية الدقيقة الأخرى(26 ).
بالإضافة الى ذلك. تم الحصول إصابات متعدد المكروبات polymicrobial في أكثر من نصف المرضى ( 64). وبالإضافة إلى ذلك، تم الكشف عن Candida sppفي 3 مريضات فقط. ولم يعثر على أي علاقة بين عمر المريضات ونوع العزلات. تم العثور على وجود علاقة سلبية بين تلون الافرازات و وجود اصابات متعدد المكروبات (0.233- = R ، 0.020 = P). لا يوجد ارتباط مع أي عزل منفردة. وارتبطت غالبية الاصابات مع رائحة سيئة، مع ذلك؛ لا يوجد نوع معين من العزلات ارتبط إحصائيا مع رائحة سيئة. يمكن أن يتم الكشف عن عدم وجود ارتباط كبير بين استخدام الواقي الذكري من قبل ازواج المريضات ونوع العزلة، مع ذلك، من بين 15 مريضة مرتبطة باستخدام الواقي الذكري. يوجد 10 اصابات ب E.coli. علاوة على ذلك، تم العثور على وجود علاقة إحصائية موجبة (0.292 = R؛ 0.003 = P) بين تاريخ اخذ حبوب منع الحمل والإصابة بــ K.pneumoniae .
في هذه الدراسة، توجد ارتباط سلبي كبير للغاية بين وجود E.coli و K.pneumoniae (P = 0.003 , R = -0.291)؛ حيث ان معظم E.coli (56) لم تكن مرتبطة بالإصابة ب K.pneumoniae.
بالإضافة الى ذلك، جميع عزلات Candida spp من المرضى غير مصابين ب E.coli . من ناحية أخرى وجود علاقة إيجابية عالية (0.327 = R، 0.001 = P) بين E.coli و الاصابات متعدد المكروبات polymicrobial بالإضافة إلى ذلك، توجد علاقة سلبية بين P.mirabilis و Coagulase-negative staphylococci (0.216- = R، 0.031 = P) ومع ذلك فقد ارتبط بشكل إيجابي مع الاصابات متعدد المكروبات (0.394 = R، 0.000 = P). لأن E.coli كانت الكائنات الحية الدقيقة الأكثر انتشارا في هذه الدراسة؛ تم اجراء دراسة جزيئية لها. وأجري تحليل باستخدام تقنية PCR لتحديد النمط الجيني الأكثر انتشارا بين عزلات E.coli وكان النمط الجيني الأكثر شيوعا ل E.coli ” B2″ الذي شكل %60 ( 36).: يليه “A” الذي شكل 35.00% (21). الجينات الضارة من عوامل التصاق في عزلات E.coli مثل PapC و Afa و Sfa حللت بواسطة PCR . وأظهرت نتائج هذه الدراسة تكرار مثل PapC و Afa و Sfa بين عزلات E.coli حيث 14 و 42 و 5 على التوالي . في هذه الدراسة من مجموع 65 عزلة كانت 48 عزلة على الاقل تحمل جينات ضراوة (34 عزلة تحمل عامل ضراوة واحد فقط و 14 عزلة تحمل 2 من الجينات) و 17 عزلة لا تحمل أي من الجينات التي شملتها الدراسة. ومع ذلك؛ لا توجد عزلة تحمل كل الجينات الثلاثة. كان النمط الجيني B2 أكثر انتشارا بين الحوامل (16 مقابل 7) وغير الحوامل وغير المجهضة (18 مقابل 6). ومن المثير للاهتمام، 9 من أصل عشر نساء عزل منهن النمط الجيني B2 كان ازواجهم يستخدمون الواقي الذكري. papC و Sfa أكثر تواجد مع النمط الجيني B2 ، هذا إضافة إلى أدلة أن B2 هي المجموعة المسببة للأمراض. في الختام؛ E.coli كانت الكائنات الحية الدقيقة الأكثر انتشاراً في استعمار البطانة الظهارية لعنق المهبل ، بالإضافة إلى المسببات المرضية المحتملة الأخرى. علاوة على ذلك الاصابات متعدد المكروبات هو أمر شائع جدا بين الحالات التي تمت دراستها. وأظهرت التحليلات الجزيئية أن معظم عزلات E.coli كانت تنتمي إلى مجموعة ضراوة “B2″، وأن تلك العزلات تحمل عدة عوامل ضراوة. وبالإضافة إلى ذلك. كانت جينات الالتصاق papC و Sfa سائدة بين عزلات E.coli، وخاصة تلك المعزولة من النساء الحوامل، وبالتالي، قد ينطوي على مخاطر كبيرة لانتقال الاصابة إلى الجنين والاغشية الجنينة الذي بدوره قد يكون له عواقب سيئة على الأم والجنين.
ووفقا لنتائج هذه الدراسة؛ فمن المستحسن إجراء مزيد من الدراسة لتحقيق في الأسباب الفعلية لارتفاع معدل انتشار E.coli وتوثيق المصادر وإذا كان الدور الفعلي خارجي أو داخلي المنشأ المتمثلة في الجهاز البولي في انتقال E.coli للبطانة الظهارية لعنق المهبل.
Microbial and Molecular Study of Infections in High Vagina in Women from Kerbala
A total of 100 female patients were enrolled in this study. The study conducted in the period from December 2013 to January 2015. All patients were attendants of the Gynecology and Obstetric Teaching Hospital in Kerbala , Province Kerbala. Iraq.
The majority of the patients with vaginal discharge (n=33,73%) were below 35 years old and 93% were in the fertility age (14-45 years). Discolorations of the discharges were noticed in 43 patients (43.4%), in 69 patients (69.7%),and dysuria in 62 patients (62.6%) . Around half of the patients (n=49,49%) were chronic (symptoms persisted for more than 1 month),and recurrent infections were reported in 37% of the patients. A 42 patients (42%) were pregnant, 15 patients (15%) mentioned that their partners were using condoms. Most of the patients (n= 59) reported a history of taking birth control pills.
A total of 174 microbial isolates were recovered from the 100 patients. The most predominant bacterial type isolate was Escherichia coli (n= 65, 37%) followed by Proteus maribilis (n=37, 21 %), Coagulase-negative staphylococci (C.N.S) (n= 33, 19 %) , Klebsiella pneumoniae (n=13, 7% ), as well as other microorganisms in low frequencies(n=26). Furthermore, polymicrobial colonization were reported in more than half of the patients (n=54). In addition, Candida spp. was detected in 3 patients only. No correlation was found between age of the patients and type of isolates. However, a negative correlation was found between discoloration of the discharge and presence of polymicrobial colonization (R= – 0.233, p= 0.020), however, no correlation was found with any single-isolate. The majority of infections were associated with bad odor, however, no specific type of isolates was statistically linked to the bad odor. Though, no significant correlation could be detected between using condoms by the patient’s partners and type of isolates, nevertheless, among 15 patients associated with using condoms, 10 were found to be infected with E. coli. Furthermore, a statistically significant positive correlation (R= 0.292, p= 0.003) was found between history of taking contraceptives and colonization by Klebsiella pneumoniae. In this study, highly significant negative correlation was found between the presence of E. coli and Klebsiella pneumoniae (R= -0.291, p= 0.003) where most of E. coli isolates (no= 56) were not associated with Klebsiella pneumoniae infection. Furthermore, all Candida spp isolates were recovered from patients not infected by Escherichia coli. On the other hand, a highly significant positive correlation (R=0.327, p=0.001) between Escherichia coli and polymicrobial infections. In addition, P. mirabilis was negatively correlated with C.N.S staphylococci (R=-0.216, p=0.031), however, it was positively correlated with polymicrobial colonization (R=0.394, p= 0.000).
Because Escherichia coli was the most prevalent microorganism in this study, further molecular characterizations of the isolates were performed. A phylogenetic analysis using PCR was performed. The most frequent phylogenetic of Escherichia coli was ” B2″ which comprised 60% (n= 36) followed by ” A” that comprised 35.00% (n= 21). phylogenetic B2 was more prevalent among pregnant (16 versus 7 ) and non-pregnant non aborted (18 versus 6).Interestingly, 9 out of ten isolates of women who their husband using condoms were shown to be of B2 genotype. Virulence genes of adhesion factors in Escherichia coli isolates such as PapC, Afa and Sfa were analyzed by the multiplex PCR assay; frequencies of Pap, Sfa and Afa, among E.coli isolates were 14, 42 and 5, respectively. A total of 65 isolates , 48 isolates had at least one virulence gene (34 isolates carrying just one virulence factor, and 14 isolates carrying 2 genes) and 17 isolates had none of the studied genes. however, none of the isolate found to carry all the three genes. Pap C and Sfa were found in higher rates in phylogenetic group B2 isolates, and this add evidence to the hypothesis that B2 is the pathogenic group.
In conclusion, Escherichia coli was the most prevalent microorganism that colonizing the vaginal epithelium, in addition to other potential pathogens. Most of the Escherichia coli isolates were belong to the virulent genotype “B2” and that those isolates harbor several virulence factors. In addition, PapC and Sfa adhesins genes were prevalent among the Escherichia coli isolates.
In this this study, it is recommended that further studies be conducted to investigate the actual causes for the high prevalence of E.coli and to document the sources, if its external or endogenous the actual role of urinary system in E. coli transmission the vaginal epithelium.
