دراسة مناعية وتشخيصية لمسببات خمج الأذن الوسطى والتأثير التثبيطي لبعض المستخلصات النباتية والمضادات الحياتية لها

رسالة ماجستير

اسم الباحث : ضي عبد الجليل كامل

اسم المشرف : أ.د. وفاء صادق الوزني أ.م.د. علي احمد الميالي

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية العلوم

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2024

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

التهاب الأذن الوسطى هو عدوى في الأذن الوسطى يمكن أن تلحق الضرر بالهياكل المحيطة بالأذن وكذلك الجهاز السمعي. ونظراً للبنية التشريحية ونمو جهاز المناعة، فهو من أكثر الأمراض التي تصيب الأطفال الصغار كل عام، وخاصة من هم في سن السادسة تقريباً.
خلال الفترة الممتدة ما بين أذار2022 إلى أيار 2022، تم جمع مسحات الأذن وعينات الدم من 101 مريضاً مصاباً بالتهاب الاذن الوسطى و49 من الأصحاء، تراوحت أعمارهم بين سنة واحدة إلى 70 سنة. . تم جمع العينات في مكانين (مستشفى الامام الحسين التعليمي والعيادة الخاصة). تم التعرف على النمو البكتيري باستخدام نظام Vitek-2. تم قياس مستويات كل من الانترلوكين 12 والانترلوكين 13 والبروتين الالتهابي البلعمي -1α بواسطة جهاز الاليزا. وأظهرت النتائج أن معدلات الإصابة لدى الذكور (50.5) أعلى من الإناث (49.5). ومن ناحية أخرى أعلى معدل إصابة كانت الفئة العمرية 21-30 بينما كانت الفئة العمرية الأدنى 61-70. من بين 101 مسحة أذن، أظهرت 75 عينة (74.25%) نمو بكتيري إيجابي، في حين لم تظهر 26 (25.75%) أي نمو. وكانت نتائج العزلات البكتيرية هي Proteus Mirabilis (17/75) 22.66%، Staphylococcus Aureus (16/75) 21.31%، Pseduomonas aeruginosa (10.66%)، Staph.warneri (8%) Aeromonas sobria (6.66%).
كانت هناك فروق معنوية عند (P≤ 0.05) في مستويات عدد كريات الدم البيضاء في الدم بين المرضى (9.31 ملم3) ومجموعة السيطرة (7.52ملم3). علاوة على ذلك، كان عدد الخلايا الليمفاوية معنوياً عند (P≤0.05) وكان عدد الخلايا المحببة معنوياً أيضاً عند (P<0.025) وكانت مستويات الإنترلوكينات معنوية أيضاً بين المرضى ومجموعة السيطرة حيث سجل IL-12 في المرضى (33.69بيكوغرام/مل) وفي مجموعة السيطرة (20.55بيكوغرام/مل).كما كانت هناك اختلافات معنوية عند (P≤0.05) في مستويات IL-13 في المرضى (48.11بيكوغرام/مل) بينما في المجموعة السيطرة (30.23بيكوغرام/مل)ومن ناحية أخرى كانت هنالك فروق معنوية في MIP-1α عند مستوى (P<0.05) في المرضى (168.48بيكوغرام/مل) بينما في مجموعة السيطرة (106.26 بيكوغرام/مل ).
كما كانت هناك فروق معنوية بين مستوى الإنترلوكينات والعزلات البكتيرية عند مستوى (P≤0.05) حيث ارتبط المستوى الأعلى للإنترلوكين 12 مع المكورات العنقودية. بعدوى المكورات العنقودية الذهبية (26.6 ± 3.8 بيكوغرام / مل)، ارتبطت المستويات الأعلى من IL-13 ببكتيريا (37.9 ± Aeromonas sobri 5 بيكوغرام / مل) بينما تم تسجيل تركيز أعلى من MIP-1α أيضًا مع البكتيريا الذهبية (138.6 ± 11 بيكوغرام / مل)). كانت حساسية عزلات Staph.aureus للمضادات الحيوية عالية حيث كانت حساسة لكل من (أموكسيلين/حمض الكلافونيك 30 ملغ، سيفتازيميد 30 ملغ، ميروبينيم 10 ملغ، سيبروفلوكساسين 15 ملغ، أميكاسين 10 ملغ). بينما البكتيريااp. mirabilis حساس للغاية لـ (سيبروفلوكساسين 10 ملغ، جنتاميسين 10 ملغ). أظهرت كروماتوغرافيا الغاز الكتلي لزيت الزيتون واللوز المر وجود مركبات نشطة بيولوجيا مختلفة مثل (DPPH%، البيروكسيد الكلي ، فيتامين C، فيتامين E، FRAP، CUPRAC، الثيول، الفينولات، الفلافونويدات) ومستويات هذه المركبات في أما زيت الزيتون فكان (30.8796، 13.66667، 1.88، 2.686، 6.146789، 18.26605، 31.10294، 49، 9.80) على التوالي. بينما أظهر زيت اللوز (6.354009، 8.066667، 1.75، 1.75، 16.6055، 6.761468، 49.26471، 49.71، 9.9428) على التوالي. أظهر زيت المخزون لكلا (زيت الزيتون وزيت اللوز المر) اختلافات معنوية عند P≤0.05 ضد نمو بكتريا S. aureus، في حين كانت P. mirabilis مقاومة لكلا الزيتين.

Immunological and Diagnostic Study of the Causes of Otitis Media Infection and the Inhibitory Effect of Some Plant extracts and antibiotic

abstract

Summary
Otitis media is a middle ear infection that can damage the structures around the ear as well as the auditory system. Due to the anatomical structure and growing immune system, it is one of the most prevalent diseases afflicting young children every year.
During the period three months which extending between March 2022 to May 2022 ,ear swabs and blood samples were collected from 101 otitis media patients and 49 healthy control, their ages was around 1 year to 70 years. Collection of samples carried out in two places (Imam Al-Hussein medical city and private clinic). The bacterial growth was identified by using Vitek -2 system. The human Interleukin-12, Intrleukin-13 and Macrophage Inflammatory Protein -1α were measured by using the ELISA technique .The results showed that infection of males(50.5%) was higher than females(49.5%).On the other hand, the highest rate of infection was 21-30 age group while the lowest age was 61-70 years. The results showed appositive association between respiratory tract infection, recurrent otitis media with otitis media infection while the relation was negative with smoking.
Out of 101 ear swabs75 samples (74.25%) had positive bacterial growth, while 26(25.75%) showed negative growth. The results of bacterial isolates were Proteus Mirabilis (17/75) 22.66%, Staphylococcus aureus (16/75) 21.31% , Pseduomonas aeruginosa (8)10.66%, Staphylococcus warneri (6)8%, Aeromonas sobria (5)6.66%.
There were significant differences at (P≤0.05) in serum levels of WBC count between patients ( 9.31mm3) and control ( 7.52mm3).Furthermore ,Lymphocyte count was significant at (P≤0.05)and Granulocyte was significant too at(P≤ 0.025).The interleukins levels were significant also between patients and controls. IL-12 for levels for patients (33.69pg/mL) and in controls ( 20.55pg/mL).Also, there were significant differences at (P≤ 0.05) in the serum levels of IL-13 in patients (48.11pg/mL) while in controls (30.23pg/mL).On the other hand, there were significant differences in MIP-1α at (P≤0.05) the level in patients (168.48pg/mL) while in controls (106.26pg/mL).
Also there were significant differences between Interleukins level and bacterial isolates at (P≤0.05) where the higher level of IL-12 was associated with Staph. aureus infection (26.6±3.8pg/mL), the higher levels of IL-13 was associated with the bacteria Aeromonas sobri (37.9±5 pg/mL) while MIP-1α higher concentration was record also with Staph. aureus bacteria (138.6±11pg/mL).
The antibiotic susceptibility for Staph.aureus isolates were highly sensitive for (amoxillin/clavonic acid 30mg,ceftazimide 30mg,meropenem 10mg, ciprofloxacin 15mg, amikacin 10mg ).
While the bacteria P. mirabilis was highly sensitive for ( ciprofloxacin 10 mg, gentamycin 10 mg).
The gas chromatography mass spectrophotometry for olive and bitter almond oil showed the presence of different biologically active compounds such as (DPPH% ,Total peroxide ,Vitamin C ,Vitamin E, FRAP ,CUPRAC, thiol ,Phenols ,Flavonoids ) the levels of these compound in olive oil was (30.8796 ,13.66667, 1.88 , 2.686, 6.146789, 18.26605, 31.10294, 49, 9.80) respectively.
While the almond oil showed (6.354009, 8.066667, 1.75, 1.75, 16.6055 ,6.761468 ,49.26471, 49.71, 9.9428) respectively.
The stock oil of both (olive oil and bitter Almond oil) showed significant differences at P≤ 0.05 against the growth of S. aureus bacteria, however P. mirabilis had been resistance for the both oils.