دراسة نسجية مرضية مناعية لتأثير جسيمات الفضة النانوية والمورينغا في الكبد والكلى لذكور الارانب المعاملة بغذاء عالي الكوليسترول

رسالة ماجستير

اسم الباحث : مصطفى حمود عبود مهدي

اسم المشرف : أ.م.د جاسم حنون هاشم العوادي

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية العلوم

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2021

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

أجريت الدراسة الحالية لتقييم التغيرات النسجية والمرضية النسجية المناعية Immunohistopathological الناتجة من تغذية حيوانات التجربة على غذاء عالي الكوليسترول ومن ثم معالجتها بجسيمات الفضة النانوية بالمقارنة مع مستخلص أوراق نبات المورينغا .

استخدم في التجربة (30) من ذكور الارانب ، و قسمت الى ستة مجاميع منها خمس مجاميع جرت تغذيتها لمدة (90) يوماً بعليقة حاوية على 2.5% كوليسترول ، بينما تركت مجموعة السيطرة تتغذى بغذاء اعتيادي .

تم تجريع الحيوانات المغذاة بعليقة حاوية على 2.5 % كوليسترول لمدة 90 يوماً بثلاث تراكيز من جسيمات الفضة النانوية Silver nanoparticles AgNPs (5، 10و 15 ملغم / كغم من وزن الجسم) ومستخلص اوراق نبات المورينغا بتركيز (200 ملغم / كغم من وزن الجسم) ولمدة 21 يوماً .

وتم سحب 1 مل دم من المجاميع المعاملة بالعليقة الحاوية على 2.5% كوليسترول شهرياً للتاكد من استحثاث فرط الكوليسترول في دم حيوانات التجربة وبعد مدة التغذية وبعد مدة التجريع بجسيمات الفضة النانوية AgNPs وكذلك مستخلص أوراق نبات المورينغا . ولغرض اجراء قياس مستوى الدهون في الدم (صورة الدهون Lipid profile) والتي شملت ( الكوليسترول الكلي TC, الكلسريدات الثلاثية TG ، البروتينات الدهنية عالية الكثافة HDL ، البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة LDL ، و البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة جداً VLDL ) تم سحب 10 مل من كل حيوان من حيوانات التجربة لغرض قياس معايير الدهون بعد التضحية بالحيوانات وانتهاء مدة التجربة .

اظهرت نتائج التحليل الاحصائي حصول ارتفاع معنوي (P<0.05) في أوزان الحيوانات بعد مدة التغذية للمجاميع التي جرت تغذيتها لمدة (90) يوماً بعليقة حاوية على 2.5% كوليسترول.

اوضحت نتائج الدراسة حصول ارتفاع معنوي (P<0.05) في مستوى الدهون في الدم للمجاميع التي جرت تغذيتها لمدة (90) يوماً بعليقة حاوية على 2.5% كوليسترول .

بينت نتائج مجموعة فرط الكوليسترول حصول ارتفاع معنوي (P<0.05) في مستوى الكوليسترول والكليسريدات الثلاثية و البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة LDL ، و البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة جداً VLDL مع الاستمرار في تغذيتها بالغذاء عالي الكوليسترول ، بينما سجلت النتائج حصول انخفاض معنوي (P<0.05) في مستوى البروتينات الدهنية عالية الكثافة HDL .

وسجل حصول انخفاض معنوي (P<0.05) في مستوى الكوليسترول الكلي بعد فترة التجريع لمجموعات المعاملة بجسيمات الفضة النانوية AgNPs بتركيز (5 و 10 ملغم / كغم من وزن الجسم) ، بينما لوحظ وجود انخفاض غير معنوي (P>0.05) في مستوى الكوليسترول بعد فترة التجريع لمجموعة المعاملة بجسيمات الفضة النانوية AgNPs بتركيز (15 ملغم / كغم من وزن الجسم) وكذلك مجموعة المعاملة بمستخلص أوراق نبات المورينغا (200 ملغم / كغم / وزن الجسم) .

بينت النتائج عدم وجود فرق معنوي (P>0.05) في مستوى الكليسريدات الثلاثية لمجاميع المعاملة بجسيمات الفضة النانوية AgNPs بتركيز (5 , 10 و15 ملغم / كغم من وزن الجسم) و لمدة 21 يوماً بينما لوحظ حصول انخفاض معنوي (P<0.05) لمجموعة المعاملة بمستخلص اوراق نبات المورينغا (200 ملغم / كغم من وزن الجسم) .

و اوضحت نتائج الدراسة حصول انخفاض غير معنوي (P>0.05) في مستوى البروتينات الدهنية عالية الكثافة (HDL) لمجموعة المعاملة بجسيمات الفضة النانوية AgNPs بتركيز (5 ملغم / كغم من وزن الجسم) ، بينما لوحظ حصول ارتفاع معنوي (P<0.05) لمجموعة العاملة بجسيمات الفضة النانوية (10 و 15 ملغم / كغم من وزن الجسم) وكذلك مجموعة المعاملة بمستخلص اوراق نبات المورينغا (200 ملغم / كغم من وزن الجسم) لمدة 21 يوماً .

كما بينت النتائج وجود انخفاض معنوي (P<0.05) في متوسط تركيز البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة LDL في مصل دم الارانب قبل التجريع و بعد مدة التجريع للمجموعات المعاملة بجسيمات الفضة النانوية (5 , 10 و 15 ملغم / كغم / وزن الجسم ) و مجموعة المعاملة بمستخلص المجموعات المعاملة أوراق نبات المورينغا(200 ملغم / كغم / وزن الجسم) .

و اوضحت نتائج الدراسة عدم وجود فرق معنوي (P>0.05) في مستوى البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة جداً (VLDL) لمجاميع المعاملة بجسيمات الفضة النانوية AgNPs بتركيز (5 ، و15 ملغم / كغم من وزن الجسم) لمدة 21 يوماً بينما لوحظ حصول انخفاض معنوي (P<0.05) لمجموعة المعاملة بجسيمات الفضة النانوية (10 ملغم / كغم من وزن الجسم) و مجموعة المعاملة بمستخلص اوراق نبات المورينغا (200 ملغم / كغم من وزن الجسم) .

كما سجلت تغيرات نسجية عديدة في كبد المجاميع التي جرت تغذيتها لمدة (90) يوماً بعليقة حاوية على 2.5% كوليسترول ، وشملت عدم انتظام المظهر الشعاعي للخلايا الكبدية حول الوريد الكبدي وحصول ارتشاح للخلايا اللمفاوية , وحصول تنخر وانتفاخ بعض الخلايا الكبدية فضلاً عن تراكم القطرات الدهنية بأحجام مختلفة في نسيج الكبد .

وفيما يتعلق باكباد الحيوانات المعاملة بجسيمات الفضة النانوية ومستخلص اوراق نبات المورينغا لمدة 21 يوماً فقد اظهرت عودة المظهر الشعاعي لانتظام الخلايا الكبدية حول الوريد الكبدي وعدم وجود ارتشاح للخلايا الالتهابية ، مع وجود القليل من الخلايا المنتفخة و اعداد اقل من القطرات الدهنية.

اما المقاطع النسجية لكلى الحيوانات التي جرت تغذيتها لمدة (90) يوماً بعليقة حاوية على 2.5% كوليسترول فقد سجلت وجود نزف دموي و توسع النبيبات الكلوية ، وارتشاح الخلايا اللمفاوية ، واحتقان ، فضلاً عن تراكم المواد البروتينية داخل النبيبات الكلوية .

كما أظهرت المقاطع النسجية لكلى الحيوانات المعاملة بجسيمات الفضة النانوية ومستخلص اوراق نبات المورينغا لمدة 21 يوماً عودة المظهر النسجي الطبيعي للكلى مع وجود بعض النبيبات الكلوية المتوسعة .

و عززت الدراسة النسجية المناعية نتائج الدراسة واظهرت تلون الانسجة باللون البني دلالة على وجود السايتوكاينات المناعية المتمثلة بـ Interleukin 1β و Interleukin 6 .

يمكن الاستنتاج من هذه الدراسة ان استخدام تراكيز منخفضة من جسيمات الفضة النانوية ومستخلص أوراق نبات المورينغا ولمدة 21 يوماً للحيوانات المصابة بفرط الكوليسترول له تأثير في تحسين صورة الدهون Lipid profile في الدم ، علاوة على تحسين المظهر النسجي للكبد والكلى .

Histopathological and immunohistochemical study of the effect of silver nanoparticles and moringa on the liver and kidneys of male rabbits treated with a high cholesterol diet

Abstract

The current study was conducted to evaluate the histological and immunohistopathological changes resulting from feeding experimental animals a high cholesterol diet and then treating them with silver nanoparticles in comparison with Moringa leaf extract.
In the experiment, (30) male rabbits were used, and they were divided into six groups, five of which were fed for (90) days with a diet containing 2.5% cholesterol, while the control group was left fed with normal food.
Animals fed a diet containing 2.5% cholesterol for 90 days were dosed with three concentrations of silver nanoparticles AgNPs (5, 10 and 15 mg/kg body weight) and Moringa leaf extract (200 mg/kg body weight) for a period of 21 days. a day.
1 ml of blood was withdrawn from the groups treated with the diet containing 2.5% cholesterol monthly to confirm the induction of hypercholesterolemia in the blood of the experimental animals, after the feeding period and after the period of dosing with silver nanoparticles AgNPs, as well as the extract of the leaves of the Moringa plant. For the purpose of measuring the level of lipids in the blood (lipid profile), which included (total cholesterol TC, triglycerides TG, high-density lipoprotein HDL, low-density lipoprotein LDL, and very low-density lipoprotein VLDL) 10 ml were withdrawn from each One of the experimental animals for the purpose of measuring fat parameters after sacrificing the animals and the end of the experiment period.
The results of the statistical analysis showed a significant increase (P<0.05) in the weights of the animals after the feeding period for the groups that were fed for (90) days with a ration containing 2.5% cholesterol.
The results of the study showed a significant increase (P<0.05) in the level of fats in the blood of the groups that were fed for (90) days with a diet containing 2.5% cholesterol.
The results of the hypercholesterolemia group showed a significant increase (P<0.05) in the level of cholesterol, triglycerides, low-density lipoproteins (LDL), and very low-density lipoproteins (VLDL), while continuing to feed them with high-cholesterol food, while the results recorded a significant decrease (P<0.05). ) in the level of high-density lipoproteins (HDL).
A significant decrease (P<0.05) in the level of total cholesterol was recorded after the dosing period for groups treated with silver AgNPs nanoparticles at a concentration (5 and 10 mg/kg of body weight), while a non-significant decrease (P>0.05) was observed in the cholesterol level after The dosing period for the group treated with silver AgNPs nanoparticles at a concentration (15 mg/kg body weight) as well as the group treated with Moringa leaf extract (200 mg/kg body weight).
The results showed that there was no significant difference (P>0.05) in the level of triglycerides of groups treated with silver AgNPs at a concentration of (5, 10 and 15 mg/kg body weight) for a period of 21 days, while a significant decrease (P<0.05) was observed for the treatment group. With Moringa leaf extract (200 mg / kg body weight).
The results of the study showed a significant decrease (P>0.05) in the level of high-density lipoproteins (HDL) for the group treated with silver AgNPs nanoparticles at a concentration (5 mg/kg of body weight), while a significant increase (P<0.05) was observed for the group Working with silver nanoparticles (10 and 15 mg / kg of body weight) as well as the treatment group with Moringa leaf extract (200 mg / kg of body weight) for 21 days.
The results also showed a significant decrease (P<0.05) in the average concentration of LDL in the serum of rabbits before and after the period of administration for the groups treated with silver nanoparticles (5, 10 and 15 mg/kg/body weight) and the treatment group. With the extract of the treated groups Moringa leaves (200 mg / kg / body weight).
The results of the study showed that there was no significant difference (P>0.05) in the level of very low-density lipoproteins (VLDL) for groups treated with silver AgNPs nanoparticles at a concentration of (5 and 15 mg/kg of body weight) for 21 days, while a significant decrease was observed ( P<0.05) for the group treated with silver nanoparticles (10 mg/kg body weight) and the group treated with Moringa leaf extract (200 mg/kg body weight).
Numerous histological changes were also recorded in the liver of groups fed for (90) days with a diet containing 2.5% cholesterol. different in liver tissue.
As for the livers of animals treated with silver nanoparticles and moringa leaf extract for 21 days, it showed a return of the radiographic appearance of hepatocytes to the hepatocytes around the hepatic vein and no infiltration of inflammatory cells, with a few swollen cells and less number of fatty droplets.
As for the histological sections of the kidneys of animals that were fed for (90) days with a diet containing 2.5% cholesterol, the presence of hemorrhage and expansion of the renal tubules, infiltration of lymphocytes, congestion, as well as the accumulation of protein substances inside the renal tubules were recorded.
Histological sections of the kidneys of animals treated with silver nanoparticles and Moringa leaf extract for 21 days showed the return of the normal histological appearance of the kidneys with the presence of some dilated renal tubules.
The immunohistochemical study reinforced the results of the study and showed tissue discoloration in brown indicating the presence of the immune cytokines represented by Interleukin 1β and Interleukin 6.
It can be concluded from this study that the use of low concentrations of silver nanoparticles and moringa leaf extract for 21 days in hypercholesterolemic animals has an effect on improving the lipid profile in the blood, in addition to improving the histological appearance of the liver and kidneys.