دراسة وبائية, مناعية وجزيئية للكشف عن الاصابة بداء المقوسات الكوندية في النساء المجهضات في مدينة كربلاء

اطروحة دكتوراه

اسم الباحث : حسين علي محسن الجبوري

اسم المشرف : أ.د . كوثر عبد الحسين مهدي الموسوي

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان

سنة نشر البحث : 2024

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

صممت الدراسة الحالية للتحري عن الاصابة بطفيلي المقوسات الكوندية Toxoplasma gondii وتقييم دور بعض المؤشرات المناعية مثل الحركي الخلوي IL-1β IL-10 وعامل التنخر الورمي الفا TNF-α و عامل النمو المتحول بيتا TGF-βوالكشف الجزيئي الذي تضمن بعض الطفرات في بعض الجينات المتضمنة للحركي الخلوي IL-10 المضاد للالتهابات rs1800872 rs1800871 والحركي الخلوي IL-1β المولد للالتهابات rs19644 rs1143627 للمريضات المجهضات بمرض المقوسات مقارنة مع مجموعة نساء السيطرة غير مصابات بمرض المقوسات.
جمعت 240 عينة من الدم للمريضات المجهضات بمرض المقوسات والمجهضات لاسباب اخرى خلال الثلث الاول من الحمل في مستشفى النسائية والتوليد التعليمي في مدينة كربلاء وخلال شهر تموز2022 الى غاية شهر شباط 2023 ودونت المعلومات المطلوبة وفق استمارة استبيان خاصة معدة مسبقا لهذا الغرض اظهرت نتائج الفحص السريع Rapid Test من اصل 210 امراة مجهضة 60 منها مصابة بمرض المقوسات ونسبة37.5% في حين سجلت 150 امراة مجهضة لاسباب اخرى بنسبة 71.4% كن سلبيات المصل كما واظهرت نتائج الفحص القياسية المناعية الانزيمية (الاليزا) لفحص 60 عينة من المريضات المصابات بمرض المقوسات وكانت نسبة الاصابة الكلية 100 %, 44 عينة موجبة لـ جسم المضاده IgG وبنسبة 73.3% و7 عينات موجبة لـ جسم المضاد IgM وبنسبه 11.6 % و9 عينات موجبة لكل من IgM و IgGوبنسبة 15 % مقارنة مع مجموعة السيطرة (نساء سليمات غير مصابات بالطفيلي) وتضمنت المؤشرات المناعية ايضا باستخدام تقنية الاليزا لـ60 عينة موجبة و150 عينه لنساء مجهضات لاسباب اخرى و30 عينات سيطرة واظهرت نتائج الفحص المؤشرات المناعية ان هناك ارتفاع معنوي بتراكيز الحركي الخلوي TNF-αفي المريضات المجهضات بمرض المقوسات ( ±31.183.4 )بيوكوغرام/مل مقارنة مع المعدل والخطا القياسي(±8.45 1.8) و4.18) ± 0.83 ( لكل من المريضات المجهضات لاسباب اخرى نساء السيطرة كما وسجلت الدراسة ارتفاع في مستويات الحركي الخلوي IL-10 وبمعدل3.32) ± 59.32) بيوغرام/مل وهو الاعلى معنويا وعند مستوى معنوية 0.05>P مقارنة مع معدل والخطا القياسي ±6.01) 29.29) و (5.08±0.91) بيوغرام/مل لكل من المريضات المجهضات لاسباب اخرى ونساء السيطرة في حين سجل الحركي الخلوي IL-1β ارتفاع معنوي للمريضات المجهضات بمرض مقوسات وبمعدل±4.21) 24.38) بيوغرام/مل مقارنة مع المريضات المجهضات لاسباب اخرى ونساء السيطرة ±3.8)19.47)و ±1.57)4.55)على التوالي ولم تسجل النتائج وجود فروق معنوية لمستوى الحركي الخلويTGF-β للمريضات المجهضات بمرض المقوسات والمريضات المجهضات لاسباب اخرى معدل بلغ±4.63 27.18و ±2.625.29على التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة اذ سجل معدل بلغ ±0.784.66 اظهرت نتائج فحص الطفرات لبعض الانماط الوراثية لتعدد الاشكال الجينية والتي شملت الحركي الخلوي rs1143627 rs16944 IL-1β والحركي الخلوي IL-10 rs1800872 rs1800871 اذ سجل ارتفاع الحركي الخلوي IL-1β rs16944 بتركيز (7.63±26.47) بيكوغرام/مل في المريضات المجهضات بمرض المقوسات الكوندية واللاتي يحملن نمط الجيني الهجين TC,CT اكثر من الاليلات الاخرى TT و CC وكذلك يلاحظ ارتقاع معنوي P<0.05 مقارنة مع مجموعة نساء السيطرة (0.42±4.14) بيكوغرام/مل ومن جانب اخر اظهرت نتائج الدراسة الحالية للحركي الخلوي IL-β للنمط الوراثي rs1143627 بمعدل وانحراف قياسي)3.89±20.69) بيكوغرام/مل في المريضات المجهضات بمرض المقوسات الكوندية اللاتي يحملن النمط الجيني CC,TT مقارنتا مع الاليلات الاخرى المتمثلة بالاليل TC والاليل CT بينما سجلت مجموعة نساء السيطرة (0.46±2.67) بيكوغرام/مل كما وتوصلت نتائج الدراسة الحاليه الى ان الحركي الخلوي IL-10 للمورث rs1800871 سجل ارتفاع معنوي في كلا الاليلين AC و TC اذ بلغ (10.04±61.8) بيكوغرام/مل للمريضات المجهضات بمرض المقوسات و(0.13±3.29) بيكوغرام/مل لمجموعة نساء السيطرة كما وسجلت نتائج الدراسة الحاليه ارتفاع مستوى الحركي الخلوي IL-10 بشكل ملحوظ في الاليل الطافر CC ، اذا سجل ارتفاع معنوي وبعدل (9.81± 47.06) للمريضات المجهضات بمرض المقوسات في حين سجلت مجموعة نساء السيطرة (190.±6.75) تبين نفس النتائج تماما مع الحركي الخلوي IL-10 rs1800872 كانت نسبة مستويات الحركي الخلوي IL-10 اكثر في المريضات المجهضات بمرض المقوسات الكوندية مقارنة بمجموعة السيطرة . في حين لم نلاحظ في الدراسة الحالية الاليل السائد TT في كل من النمط الوراثي rs1800871 و rs1800872للمريضات المجهضات بمرض المقوسات ونساء السيطرة.

"An Epidemiological, Immunological and Moleculare Study to Detect infections with Toxoplasmosis among aborted women in Holy kerbala city"

The current study was designed to investigate infection with the parasite Toxoplasma gondii and evaluate the role of some immune indicators such as cytokinesis IL-1β, cytokinesis IL-10, tumor necrosis factor alpha (TNF-α), transforming growth factor beta (TGF-β), and molecular detection, which included some mutations in some genes. Including the anti-inflammatory cytokines IL-10 rs1800872 rs1800871 and the proinflammatory IL-1β cytokines rs19644 rs1143627 for patients aborted with toxoplasmosis and patients aborted for other reasons compared with a group of control women. 240 blood samples were collected for patients who aborted with toxoplasmosis and those who aborted for other reasons during the first trimester of pregnancy at the Obstetrics and Gynecology Teaching Hospital in the city of Karbala and during the first of July (2022) until the twenty-second of February (2023).

The required information was recorded according to a special questionnaire form. Prepared in advance for this purpose, the results of the Rapid Test showed that out of 240 aborted women, 60 of them were infected with toxoplasmosis, a percentage of 28.5%, while 150 women who aborted for other reasons had a miscarriage, with a percentage of 71.4% being seronegative. The results of the standard enzyme immunoassay (ELISA) test also showed 60 samples from patients infected with toxoplasmosis, and the total infection rate was 100%, 44 samples were positive for the IgG antibody, at a rate of 73.3%, 7 samples were positive for the IgG antibody, at a rate of 11.6%, and 9 samples were positive for both IgM and IgG, at a rate of 15%, compared with the control group ( Healthy women not infected with the parasite) The immune indicators were also included using the ELISA technique for 60 positive samples, 150 negative samples, and 30 control samples.

The results of the examination of the immune indicators showed that there was a significant increase in the concentrations of cytokinetic TNF-α in patients aborted with toxoplasmosis (31.18±3.4) compared with the mean and standard error. ( 8.45±1.8) and (4.18±0.83 )for both patients who miscarried for other reasons and control women The study also recorded an increase in cytokinetic IL-10 levels at a rate of ( 59.32±3.32) pg/ml, which is significantly higher and at a significance level of >0.05 compared to the average and standard error(29.29±6.01) and (5.08±0.91) pg/ml for each. Of patients who aborted for other reasons and control women While the cytokinesis of IL-1β was significantly increased in patients who aborted with toxoplasmosis at a rate of (24.38±4.21)pg/ml compared to patients who aborted for other reasons and control women (19.47±3.8) and (4.55±1.57)respectively, and the results did not record any significant differences.

The level of TGF-β cytokines in patients aborted with toxoplasmosis and patients aborted for other reasons. An average of, (27.18±4.63) and (25.29±2.6) respectively, compared to the control group, where an average( 4.66±0.78) was recorded. The results of mutation examination for some genotypes of genetic polymorphisms, which included IL-1β cytokines rs1143627 and rs16944 and IL-10 cytokines rs1800872 rs1800871, showed an increase in cytokinesis IL-1β rs16944 at a concentration of (7.63±26.47) pg/ml in patients with aborted patients with toxoplasmosis. gondii women who carry the hybrid genotype TC and CT more than the other alleles TT and CC, and a significant increase of P<0.05 is observed compared to the group of control women (0.42±4.14) pg/ml. On the other hand, the results of the current study showed cytokinetic IL-β for the rs1143627 genotype with a mean and standard deviation of (3.89±20.69) pg/ml in patients of aborted patients with Toxoplasma gondii disease who carry the CC, TT genotype, compared with the other alleles represented by the TC allele and the CT allele, while The group of control women recorded (0.46±2.67) pg/ml. The results of the current study also revealed that cytokinetic IL-10 for the gene rs1800871 recorded a significant increase in both AC and TC alleles, reaching (10.04±61.8) pg/ml for patients aborted with toxoplasmosis and (0.13±3.29) picogram/ml for the group of control women. The results of the current study also recorded a significant increase in the level of cytokinetic IL-10 in the mutant CC allele, with a significant increase of (9.81±47.06) for patients who aborted with toxoplasmosis, while the group of control women recorded (0.91±6.75) Exactly the same results were shown with cytokinetic IL-10 rs1800872. The percentage of cytokinetic IL-10 levels was higher in aborted patients with Toxoplasma gondii infection compared to the control group. While in the current study we did not find the dominant TT allele in both genotype rs1800871 and rs1800872 for patients aborted with toxoplasmosis and control women.