University of Kerbala
اسم الباحث : ميثم ناصر نعمة الجبوري
الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة
الاختصاص : علوم الحياة-النبات
سنة نشر البحث : 2013
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
أجريت عدد من التجارب المختبرية في مختبر الدراسات العليا لقسم علوم الحياة – كلية التربية للعلوم الصرفة / جامعة كربلاء لدراسة تأثير بعض الفطريات المعزولة من الأجسام الحجرية للفطر Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) De Bary فضلا على الفطر Trichoderma harzianum في النمو القطري للفطر S. sclerotiorum ، و تم دراسة تأثير نوع الوسط الغذائي و الرقم الهيدروجيني في النمو القطري و أنتاج حامض الأوكزاليك الذي يعد العامل الأساس في أمراضية الفطر .
أتضح من نتائج تنمية الأجسام الحجرية أن هنالك نمطين لتوزيعها هما نمط التوزيع المنتظم و نمط التوزيع غير المنتظم . و تم أختبار ثلاثة فطريات كانت مرافقة للأجسام الحجرية تمثلت بالفطر Aspergillus niger و الفطرAspergillus terreus و الفطر Penicillium sp. ، إذ شكلت الأنواع العائدة للفطر Aspergillus نسبة ظهور عالية متفوقة على الفطر Penicillium sp. . استخدمت الرواشح الخام للفطريات المعزولة من الأجسام الحجرية و راشح الفطر T. harzianum بتراكيز 15% ، 30% ، 45% و 60% لدراسة تأثيرها في نمو الفطر S. sclerotiorum في الوسط الغذائي PDA الحاوي على هذه الرواشح ، فوجد ان راشح الفطر T. harzianum ثبط نمو الفطر بنسبة 100% عند التركيزين 45% و 60% ، و كذلك راشح الفطر Penicillium sp. الذي سجل نسبة تثبيط 100% عند التركيز 60% ، أما راشح الفطر A. terreus فقد سجل نسبة تثبيط 60% عند التركيزين 45% و 60% ، في حين كان راشح الفطر A. niger اقل تثبيطاً إذ سجل نسبة 58.8% عند التركيز 60% .
أظهرت تقنية صفائح كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) احتواء جميع مستخلصات الفطريات على مركبات مختلفة و متشابهة في قيم التحرك النسبي Rf ، و اختلفت هذه المستخلصات في عدد البقع على صفائح (TLC) ، إذ سجل الفطر T. harzianum 23 بقعة و الفطر A. terreus 21 بقعة و الفطر A. niger 20 بقعة و الفطر Penicillium sp. 16 بقعة . و بينت النتائج بأستعمال كواشف كيميائية متعددة أن المستخلصات الفطرية حاوية على العديد من المركبات الفعالة ، فقد احتوت جميع المستخلصات على القلويدات و التانينات و الكاربوهيدرات و اشتركت جميعها في عدم احتوائها على الفينولات ، فقد احتوى مستخلص الفطر A. niger على الفلافونيدات في حين لم يحتوِعلى الصابونينات و الكلايكوسيدات ، اما مستخلص الفطر A. terreus فقد احتوى على الصابونينات و الكلايكوسيدات و الفلافونيدات ، في حين لم يحتوِ مستخلص الفطر Penicillium sp. على الفلافونيدات الا انه سجل وجود الصابونينات و الكلايكوسيدات ، و احتوى مستخلص الفطر T. harzianum على الكلايكوسيدات و لم يحتوِ على الصابونينات و الفلافونيدات .
و فيما يخص تأثير المستخلصات في نمو الفطر S. sclerotiorum سجل مستخلص الفطر A. terreus معدل تثبيط1.375 ملم ثم الفطر Penicillium sp. بمعدل لم يختلف كثيرا عن معاملة السيطرة هو 50. 37 ملم اما مستخلص الفطر A. niger و مستخلص الفطر T. harzianum فلم يسجل أي تثبيط . تضمنت الدراسة ايضا بيان الآلية التضادية للفطريات المعزولة من الأجسام الحجرية و الفطر T. harzianum بوصفها واحدة من الآليات المهمة في المكافحة الإحيائية ضد الفطر S. sclerotiorum ، إذ اظهر الفطر A. terreus كفاءة تضادية عالية في حين انخفضت الكفاءة التضادية تدريجيا للفطريات الأخرى .
أما تأثير بعض العوامل البيئية في نمو الفطر S. sclerotiorum و انتاج حامض الأوكزاليك ، فقد بينت النتائج ان نمو الفطر S. sclerotiorum في الوسط الغذائي CDAو الوسط الغذائي PDAقد سجل اعلى القيم إذ غطى الفطر مساحة الطبق بالكامل عند اليوم السابع من الحضن بنسبة 100% ، في حين انخفضت مستويات النمو في الاوساط OA و SDA ، و سجل الفطر اعلى نسبة مئوية له في انتاج حامض الأوكزاليك عند نموه في وسط SDA ثم انخفضت النسبة عند الأوساط الأخرى . اما بالنسبة لتاثير الرقم الهيدروجيني فقد اعطى الرقم الهيدروجيني 6 اعلى نسبة نمو عند اليوم السابع في حين سجل الرقم الهيدروجيني 7 اعلى معدل لتأثير الأرقام الهيدروجينية في نمو الفطر على وسط PDA ، و بينت النتائج ان الرقم الهيدروجيني 7 قد سجل اعلى نسبة مئوية لأنتاج حامض الأوكزاليك من الفطر ، في حين انخفضت النسبة و بشكل كبير في ال pH 5 ، 5.5 ، 6 ، 6.5 و 7.5 .
Effect of Trichoderma harzianum and Some Fungi Accompanied with Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary and Environmental Factors on Sclerotia and Oxalic Acid Production
Laboratory experiments were Conducted at biology department , education college for pure science , University of Karbala to study the effect of some fungi isolated from sclerotia of Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary in addition to the Trichoderma harzianum on the radial growth of S. sclerotiorum . The effect of Some ecological factors i.e. media and the pH on the radial growth and oxalic acid production were also studied.
Results revealed that there were two types of distribution i.e. regular and irregular distribution., There were three fungi accompanied the sclerotia were tested which were Aspergillus niger , Aspergillus terreus and Penicillium sp. , The species of Aspergillus had occurrence rate as compare with Penicillium sp. . Crude extracts of fungi isolated from the sclerotia and extract of the T. harzianum were used at different concentrations of 15%, 30%, 45% and 60% to study their effect on the growth of S. sclerotiorum grown on PDA containing these filtrates. It was that, T. harzianum extract inhibited the fungus growth by 100% at the concentrations of 45% and 60%.The extract of Penicillium sp. gave 100% inhibitory effect at 60% concentration, Whereas A. terreus gave 60% inhibition at 45% and 60% concentrations . Meanwhile, A. niger gave the lowest inhibition percentage which was 58.8% at the concentration of 60% .
Thin Layer Chromatography technique (TLC) showed that the fungal extracts contained various compounds in their Rf. These extracts differed in their spots number on (TLC). The fungus of T. harzianum, A. terreus, A. niger and Penicillium sp. gave 23, 21, 20 and 16 spots respectively . Results of using different chemical reagents appeared that fungal extracts contained many active compounds. All extracts contained alkaloids, tannins and carbohydrates . Phenols were absent in all extracts . The fungus of A. niger had contained flavonoids but did not contain saponins and glycosides . Meanwhile A. terreus had contained all three previous compounds. The Penicillium sp. extract had contained saponins and glycosides , while it does not contain flavonoids . T. harzianum had contained glycosides and did not contains saponins and flavonoids.
Concerning the effect of fungal extracts on the growth of S. sclerotiorum, A. terreus extract gave an inhibitory rate 1.375 mm followed by Penicillium sp. which gave a rate did not significantly differ from the control treatment which was a 0. 375 mm . On the other hand neither A. niger nor T. harzianum extracts gave any inhibitory effect. The study also included the antagonistic mechanism of isolated fungi from sclerotia of S. sclerotiorum as well as T. harzianum as one of the important mechanisms in the biological control against S. sclerotiorum . A. terreus showed high antagonistic efficiency while it was gradually decreased with other fungi.
Regarding the effect of some ecological factors on S. sclerotiorum and oxalic acid production, S. sclerotiorum grown on either PDA or CDA gave the highest levels where the fungus occupied all petri dish area giving 100% growth rate at the 7th day of incubation. While it decreased with OA and SDA medium . The fungus gave the highest percentage of oxalic acid production when it grew on SDA as compared with other media . The pH at 6 gave the highest growth percentage at the 7th day whereas pH 7 gave highest impact of pH on the growth rate of fungus on PDA . The pH 7 gave the highest rate of oxalic acid production . Meanwhile the rate of oxalic acid was decreased highly at pH 5, 5.5, 6, 6.5 and 7.5 .
