تحضير وتشخيص مضاد نانوي هجين من الليفوفلوكساسين وتقييم كفائته التثبيطية ضد البكتريا المعزولة من قرحة القدم السكري

رسالة ماجستير

اسم الباحث : ساره محسن كاظم الحسيني

الكلية : كلية العلوم

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2017

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

   تضمنت هذه الدراسة عزل وتشخيص أهم انواع البكتريا المسببة لتلوث قرحة القدم السكري كما تضمنت أيضاً تحضير وتشخيص مركب نانوي هجين من المضاد ليفوفلوكساسين . تم تقييم الفعالية التثبيطية  للمضاد النانوي المحضر أعلاه ضد البكتريا المعزولة في هذه الدراسة كما تم تحديد الفعالية التآزرية للمضاد النانوي مع المضادين الحرين  Tiecoplaninو Cefixime وقد اظهرت النتائج ما يأتي :-

من مجموع 43 مُسحة مأخوذة من قرحة القدم لمرضى السكر الراقدين في مدينة الأمـام الحســين (ع) الطبية  في محافظة كربــلاء المقدسة ، تم الحصول على 38 عزلة بكتيرية منها 10 عـزلات (26.3) %  من جنــس Proteus mirabilis و9  عزلات (23.7) %  Staphylococcus aureus و4  عزلات (10.5 ) Escherichia coli %  و4 عزلات (10.5) % من جنــس Pseudomonas  كانت 3 منها Pseudomonas flouresence  وواحدة Pseudomonas aeroginosa وعزلتين ((5.3 % من كل من Enterococcus faecalis و  Raoultella terrigena و عزلة واحدة ((2.6 % لكل من Enterobacter cloacae و  Acinetobacter baumanniiو Providancia  rettgeri   و Burkholderia  cepacia  و  Klebsiella pneumonia و Aeromonas salmonicida  و  Ochrobactrum anthropi.

أُستخدم المضاد ليفوفلوكساسين في تحضير مركب نانوي هجين بعد تحميله على طبقات ثنائية الهيدروكسيدMg\Al layered double hydroxide (Mg\Al-LDH)  وقد اوضحت نتائج الفحص بمطيافية FTIR عن ظهور مجاميع كيميائية معينة واختفاء مجاميع اخرى كما اوضحت مطيافية الاشعة السينية (XRD) عن ظهور مستويات حيود جديدة في طيف المضاد النانوي الهجين Mg/Al-LEV-LDH مقارنـة بطيـف الحاملMg\Al–LDH   مما يشير الى ان المركب المحضر قيد الدراسة مركب نانوي . وأظهرت نتائج الفحص بمجهر القوة الذرية (AFM) أن أبعاد أقطــار دقائق المضاد النانوي الهجين بلغـت 94.83 نانوميتر .

دُرست الفعالية التثبيطية للمضاد النانوي الهجين Mg/Al-LEV-LDH والمضاد الحر (Free LEV ) وقد أوضحت نتائج هذه الدراسة ما يأتي :-

امـتـلاك المضاد النانــوي الهجـــيــن أعلــى فعاليـــــة تثبيطيـــــة ضـــد العزلــــة 13b P. mirabilis بقطر تثبيط مقداره 34.75 ملم , بينما كان قطر تثبيط المضاد الحر47  ملم , ضد العزلة  17a.

أظهر المضاد النانوي الهجيـن أعلــى فعاليــة تثبيطيـة ضـــد العزلـة14b    E. coli  بقطر تثبيط مقداره 13.75 ملم في حين كانت أعلى فعاليـة تثبـيطيـة للمضاد الحر ضد العزلة ذاتها  بقطر تثبيط مقداره 26.5 ملم .

أبدى المضاد النانوي الهجيـن أعلى فعالية تثبيطيـة ضـد العزلـةP. aeruginosa  73  بقطر تثبيط مقداره 41. 5 ملم , بـيـنما كانت أعلى فعالية تـثبـيطيـة للمضاد الحر ضد العزلة ذاتها بقطر تثبيط مقداره 47.5 ملم .

كانت أقصى فعالية تثبـيطيـة لليفوفلوكساسـين النانوي ضد العزلـتين2  و3 S. aureus  بقطر تثبيـط مقداره 36 ملم لكل منهما , فيما كانت أعلى فعالية تثـبيـطيـة لليـفوفـلوكسـاسين الحر ضد العزلة 3 S. aureus  بقطر تثبيط مقداره 43 ملم .

أن التوليف بين المضاد النانوي الهجين LEV-LDH المحضر في هذه الدراسة والمضاد الحر Cefixime يبدي فعلاً تآزرياً ضد بعض عزلات بكتريا P. mirabilis   فيما يبدي فعلاً تضادياً ضد البعض الآخر .

أن التوليف بين المضاد النانـــوي الهجيــن LEV-LDH والمضاد الحــر Teicoplanin  في هذه الدراسة يبدي فعلاً تآزرياً ضد بعض عزلات بكتريا  S. aureus  فيما يبدي فعلاً تضاديا ضد البعض الاخر .

Preparation and Characterization of Nanohybrid Antibiotic from Levofloxacin and Evaluation its Inhibitory Efficiency against Bacteria Isolated from Diabetic Foot Ulcer

   This study included the isolation and diagnosis of the most important species of  bacteria responsible for the infection of diabetic foot ulcer . It also included the preparation and detection of hybrid nano compound , from the antibiotic levofloxacin .The inhibitory activity of the nano antibiotic was assessed against the isolated bacteria in this study also , the combination activity of the hybrid nano levofloxacin with free antibiotics Tiecoplanin and Cefixime was identified and the results showed the following :

As a total 43 samples were taken from diabetic foot ulcer patients hospitalized in Imam Al-Hussein Medical City in Sacred Kerbala Provience, It had been obtained 10 isolates (26.3) % were Proteus mirabilis, , 9 isolates (23.7) % were Staphylococcus aureus, 4 isolates (10.5) % were Escherichia coli, 4 isolates (10.5) % was obtained from Pseudomonas  spp. , 3 of them were Pseudomonas flouresence  and one was Pseudomonas aeruginosa and two isolates (5.3) % of Enterococcus faecalis , Raoultella terrigena and one isolate (2.6) % of Enterobacter cloacae , Acinetobacter baumannii , Providancia  rettgeri , Burkholderia cepacia  , Klebsiella pneumonia , Aeromonas salmonicida , Ochrobactrum anthropie .

Levofloxacin antibiotic was used in preparation of the hybrid nano compound after intercalating on layers of double hydroxide  (Mg/Al-LDH) . FT-IR spectrum studies has shown the appearance of specific chemical groups and the disappearance of others while the spectrum of x-ray (XRD) has shown the appearance of new levels of diffraction in the spectrum of the hybrid nano antibiotic Mg/Al-LEV-LDH as compared to the spectrum of the Mg/Al-LDH, which indicate that the prepared compound under study is a nano hybrid compound . Results of the Atomic Force Microscope (AFM), has shown that the diameter of the particles of hybrid nano antibiotic was 94.83 nm.

The inhibitory activity of the hybrid nano antibiotic Mg/Al-LEV-LDH and the free antibiotic (Free LEV) has been studied and the results revealed followings:

The hybrid nano antibiotic has the highest inhibitory activity against the bacterial isolate P. mirabilis 13b with an inhibition diameter of  34.75 mm , while the inhibition diameter for the free antibiotic was 47 mm against the isolate  17a .

The hybrid nano antibiotic showed the highest inhibitory activity against the isolate E. coli 14b with an inhibition diameter of 13.75 mm , while the highest inhibition activity for the free antibiotic was against the same isolate with an inhibition diameter of 26.5 mm .

The hybrid nano antibiotic showed the highest inhibitory  activity against the isolate P. aeruginosa 73 with an inhibition diameter of  41.5 mm , while the highest inhibition activity for the free antibiotic was against the same isolate with an inhibition diameter of 47.5 mm .

The highest inhibition activity for the hybrid nano levofloxacin was against the two isolates  S. aureus 2 and 3 with an inhibition diameter of 36 mm, for each, while the highest inhibition activity for the free levofloxacin was against the isolate S. aureus 3 with an inhibition diameter of 43 mm .

The combination  between the hybrid nano antibiotic LEV-LDH prepared in this study and free antibiotic Cefixime exhibited synergistic effect  against some P. mirabilis isolates while antagonistic effect has shown against the other isolates .

The combination  between the hybrid nano antibiotic LEV-LDH prepared in this study and free antibiotic Teicoplanin exhibited synergistic effect against some S. aureus isolates while antagonistic effect has shown against the other isolates .