تقيم فعالية بعض المستخلصات النباتية ‏المضادة لبكتريا pseudomonas ‎aeruginosa‏ المنتجة للغشاء الحياتي ‏والمعزولة من مرضى الحروق في محافظة ‏كربلاء ‏

رسالة ماجستير

اسم الباحث : وسـن رضا حسـن الشكرچي

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2019

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

أجريـــت هذه الدراســـة للتحــري عــن تــأثير فعــــالية المستخلصــات النباتية للشـــاي الأخضر

Camellia sinensis والقرفة Cinnamomum والحناء Lawsonia inermis على بكتريا Pseudomonas aeruginosa  المنتجة للغشاء الحياتي Biofilm و المعزولة من مرضى الحروق الراقدين في مستشفى مدينة الإمام الحسين (ع) الطبية في محافظة كربلاء المقدسة و في المدة الزمنية من كانون الأول 2017 و لغاية شباط 2018 و تقييم الفعالية المثبطة للمستخلصات النباتية الشاي الأخضر والقرفـــة والحنـــاء  و تحديـــــد قيمــة التركيــز المثبط الأدنى (MIC) و قيمة التركيز القاتل الأدنى ((MBC . حيث تم جمع 118 مسحة  من جلود مرضى الحروق وقد شخصت المستعمرات النامية في مختبر الأحياء المجهرية في نفس المستشفى بالاعتماد على عدد من الاختبارات الكيموحيوية إذ أمكن تشخيص 50 عزلة سريرية لبكتريا  Pseudomonas  aeruginosوأكد التشخيص باستخدام تقنية E API 20   في مختبر الصحة العامة في محافظة كربلاء وللحصول على نتائج أكثر دقة  تم التشخيص واختبار حساسيتها للمضادات الحياتية باستخدام تقنية جهازVITEK – 2 COMPACT SYSTEM المطورة .

قد أظهرت نتائج التشخيص أنها بكتريا Pseudomonas aeruginosa بنسبة 99%. وأظهرت نسبة 78% أي 39 عزلــة من أصــل 50 عزلــة مقاومة عاليــة لمضــادات الحياتيـــة   Trimethopim / Sulfamethoxazole , Minocycline, Pefloxacin , ciprofloxacin ,Tobramycin , Gentamicin , Amikacin ,Meropenem , Imipenem , Cefepime , Ceftazidime , Piperacillin ,Ticarcillin/Clavulanic Acid , Ticarcillin و نسبة 22% اي 11 عزلة من أصل 50 عزلة أظهرت حساسية تجاه المضاد الحياتي Colistin .

كمــا وتــم الكشف عــن قــابليــة البكتريـــا في إنتــاج الغشـــاء الحيــاتي Biofilm بختبـــــــــار

  Congo red agar (CRA)و كانت نسبة العزلات البكتيرية المنتجة للغشاء الحياتي القوي 66% أي 33 عزلة من أصل 50  في حين إن  نسبة العزلات منتجة للغشاء الحياتي المتوسط 12% أي ستة عزلات من أصل 50 و نسبة العزلات المكونة للغشاء الحياتي الضعيف 22% أي 11 عزلة من أصل 50 ، و اظهرت إن 39عزلة المكونة للغشاء الحياتي تمتلك مقاومة عالية ضد المضادات الحياتية.

كمــــا تـــم الكشف عن قابلية البكتريـــا في تكوين الغشـــاء الحياتــي بختبــــــار الصفائـــح المعــــــــــــايرة ((MTP   Microtiter plateوكانت نسبة إنتاج الغشاء الحياتي القوي 80% أي 40 عزلة من أصل 50 عزلة و نسبة إنتاج الغشاء الحياتي المتوسط 6% أي ثلاثة عزلات من أصل 50 عزلة  و نسبة إنتاج الغشاء الحياتي  الضعيف  14% أي سبعة عزلات من أصل 50 عزلة .

ثم تم تقيم الفعالية المثبطة للمستخلص المائي البارد والحار و مستخلص كحول الايثانول لنبات الشاي الأخضر والقرفة والحناء  بالتراكيز (100 ، 75 ، 50 ، 25) ملغم/مل و أوضحت النتائج أن مستخلص الايثانول الكحولي كان الأفضل بشكل ملحوظ من المستخلص المائي حيث أن بكتريـا  P.aeruginosaالمعزولة من جلود مرضى الحروق لم تبدِ أي حساسية تذكر تجاه  المستخلصات المائية بينما أبدت البكتريا حساسية اتجاه مستخلصات كحول الايثانول للشاي الأخضر والقرفة في التراكيز الأربعة .

 أظهــر التركيز 100ملغم/مل أعلى قطــر تثبيط بلغ (16.21,11.85)ملم على التوالي لصالح القرفة بينما أظهرت البكتريــا حساسيتها اتجـاه مستخلص كحولي الايثانـول للحنــاء بتراكيز(100 ، 75) ملغم/مل فقط وقد أظهر التركيز 100 ملغم/مل أعلى قطر تثبيط بلغ (7.98)ملم لصالح القرفة  و الشاي الأخضر.

 كما تم تحديد  قيمة MIC و MBC لمستخلصات كحول الايثانول  للشاي الأخضر و القرفة و الحناء، لكل من العزلات البكتيرية التي تنتج الغشاء الحياتي القوي والغشاء الحياتي المتوسط و  الغشاء الحيـاتي الضعيف و قد بلغت قيمة تراكيـز) MIC 65،65،75) ملغم/مل ، (35،35،40) ملغم/مل ، (25،25،35) ملغم/مل و بلغت قيمة تراكيز MBC (75،75،85) ملغم/مل ، (45،45،50) ملغم/مل ، (35،35،45) ملغم/مل على التوالي.

وفي ضوء ما قدمته الدراسة الحالية نستنتج أن مستخلص كحول الايثانول  لنبات الشاي الأخضر و القرفة و  الحناء أفضل بكثير من المستخلص المائي البارد والحار لنفس النباتات و يمتلك فعالية تثبيط ضد بكتريا p. aeruginosa المكونة للغشاء الحياتي و المعزولة من جلود مرضى الحـــروق و أن مستخلص كحول الايثانول للقرفة  أظهر فعالية أفضل من مستخلص كحول الايثانول للشاي الأخضر و مستخلص كحول الايثانول للشاي الأخضر أظهر فعالية أفضل من مستخلص كحول الايثانول للحناء في تثبيط نمو بكتريا P.aeruginosa كما أن فعالية المستخلصات تزداد بزيادة التركيز.

Evalvating the effectiveness of some plant ‎extracts against Pseudomonas aeruginosa ‎biofilm-producing isolated from burns patients ‎in Kerbala province

This study was conducted to identify the effects of plant extracts Camellia Sinensis, Cinnamon cinnamoum ands Lawsonia inermis on Pseudomonas aeruginosa producing biofilm and isolated from burn patients in the Imam. Al-Hussein in the Burns department in Kerbala For the period of December 2017 to February 2018 a total of 118 sample  and evalvating the minimum inhibitory Concentration(MIC) and minimum Bactericidal Concentration(MBC),province(50)  isolation of the P.aeruginosa bacteria forming the biofilm can be diagnosed and developed by relying on a number of biochemical tests as well as the technique Vitek-2 developed the results show that the diagnosed bacteria are bacteria 99% P.aeruginosa and has high resistance against most commonly used antibiotics 100%,This study was investigated the ability of bacteria to formation of biofilm by method congo red agar (C.R.A.) There was 66% of isolated bacteria formation of biofilm strong while there was 12%  of isolated  biofilm medium and 22% formation weak biofilm Anther method has been detected the ability of bacteria to formation of biofilm was microtiter plate (M.T.P.)in which there were 80%with strong , medium 6% and weak 14%.  and showed that the aqueous extract of the three plants did not show any activity against the bacteria p.aeruginosa producing the biofilm even at high concentration while showing The alcoholic extract of all the plants used in the study is the opposite as it showed an anti-bacterial activity as the extract of ethanol alcohol for the Cinnamon cinnamoum with a concentration of 100% higher inhibition diameter of 16.21 (mm) and record green tea 6.16 (mm) while Lawsonia inermis recorded less diameter inhibition  Reached 7.98 (mm), as well as the results showed that the value of the Minim inhibition concentration and the Minim inhibition killed concentration rate for green tea extract and cinnamon and Lawsonia inermis against the bacteria producing  strong , medium and weak biofilm are the (65,65,75)(mg/ml) , (35,35,40)(mg/ml) , (25,25,35)(mg/ml) for concentration respectively while the  (MBC) (75,75,85)mg/ml,(45,45,50)mg/ml,(35,35,45)mg/ml  concentrations respectively  Conclusion of the study is that the effect plant extract is green tea , cinnamum and henna for ethanol alcohol is better than cold and hot water extractagainst bacteria p.aeruginosa formation biofilm and isolated from burn patients , is the Cinnamon extract is better than green tea extract and henna extract  ,  is the green tea extract is better than henna extract to Inhibition of bacteria P.aeruginosa .