دراسة التأثير الوقائي للمستخلص المائي البارد لبذور نبات الكتان Linum usitatissimum على التغيرات الفسلجيَّة والنسجيَّة في ذكور الجرذان (Rattus norvegicus) المعرضة لمادة غلوتامات الصوديوم الأُحادية

رسالة ماجستير

اسم الباحث : مصطفى كريم مشتت

اسم المشرف : أ.م.د. رشا عبد الامير جواد

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان

سنة نشر البحث : 2020

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة

هدفت الدراسة الحالية إلى استخدام المستخلص المائي لبذور نبات الكتان flaxseeds بجرعتين مختلفتين للحد من التأثيرات السميِّة لمادة غلوتاميت الصوديوم الأحادي Monosodium glutamate (MSG) في ذكور الجرذان البيض Rattus norvegicus وتقييم تأثيرها عن طريق دراسة بعض المعايير الفسلجية والكيموحيوية والنسجية.

أُجريت هذه الدراسة في كل من كلية التربية للعلوم الصرفة / قسم علوم الحياة و البيت الحيواني التابع لكلية الصيدلة – جامعة كربلاء, للمدة من بداية شهر تشرين الاول 2019 ولغاية شهر نيسان 2020، استخدمت فيها (36( من ذكور الجرذ الأبيض البالغة، تراوحت اعمارها بين ( 12 14- ) اسبوعاً ومعدل أوزانها مـا بين (275 – 450) غرام ،. قسمت الجرذان على ست مجاميع وجرِّعت فموياً ويومياً و لمدة شهر واحد, المجموعة الأولى G1 جرعت بـ2 مل من المحلول الملحي normal saline وعدت مجموعة سيطرة سالبة, و المجموعة الثانية G2 التي عــدت مجموعة سيــطرة موجبة جرعت بـتركيز 14 ملغم/كغم من مادة أُحــادي غلوتاميـت الصوديوم (MSG) Monosodium glutamate .(Ahmed et al.,2019) أما المجموعة الثالثة G3 فجرعت بتركيز 300 ملغم/كغم من المستخلص المائي لنبات بذور الكتان, والمجموعة الرابعة G4 جرعت بتركيز 400 ملغم/كغم من المستخلص المائي لنبات بذور الكتان, والمجموعة الخامسة G5 جرعت بتركيز 300 ملغم/كغم من المستخلص المائي لنبات بذور الكتان وبعد اربع ساعات جرعت بمادة أُحادي غلوتاميت الصوديوم (MSG) بـتركيز 14 ملغم/كغم, أما المجموعة السادسة G6 فجرعت بتركيز 400 ملغم/كغم من المستخلص المائي لنبات بذور الكتان وبعد أربع ساعات جرعت بمادة أُحادي غلوتاميت الصوديوم (MSG) بـتركيز 14 ملغم/ كغم.

جُمعت عينات الدم بعد انتهاء مدة التجربة, تم الحصول على مصل الدم لغرض قياس مستوى المعايير الفسلجية الآتية: إنزيمات الكبد (ALT) Alanine transaminase, (AST) Aspartate transaminase و (ALP) Alkaline phosphatase والمعايير الكيموحيوية: الكولسترول الكلي Total cholesterol (TC), الدهون الثلاثية ,Triglyceride (TG) الدهون البروتينية عالية الكثافة ,High density lipoprotein (HDL) الدهون البروتينية واطئة الكثافة Low density lipoprotein (LDL) والدهون البروتينية واطئة الكثافة جدا Very low density lipoprotein (V-LDL), وقياس مستوى البروتين الكلي Total protein (TP), الالبومين Albumin, والجلوبيولين Globulin, الجلوتاثيون بيروكسيديز Glutathione peroxidase (GPx) و المالوندايالديهايد Malondialdehyde (MDA) . فضلاً عن قياس التغيرات النسجيّة وقياس اقطار الخلايا الكبدية Hepatocyte والاوردة المركزية Central veins و الجيبانات الكبدية Sinusoids.

أدى التجريع الفموي للجرذان المعاملة بمادة MSG والمستخلص المائي لبذور نبات الكتان فسلجيا إلى:

1. وجود إرتفاع معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى كل من: AST, ALT, ALP,,V-LDL LDL ,TG ,TC, البروتين الكلي, الالبومين, الكلوبيولين و MDA في مجموعة السيطرة الموجبة لمادة MSG قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

2. وجود إنخفاض معنوي وجود انخفاض معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى كل من GPx و الـ HDL في مجموعة السيطرة الموجبة لمادة MSG. قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

3. وجود انخفاض معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى كل من: AST, ALT, ALP و MDA, في مجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان بتركيز 400 ملغم/كغم قياسا الى مجموعة السيطرة السالبة.

4. وجود إنخفاض معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى كل من: AST, ALT, ALP,,V-LDL LDL ,TG ,TC و MDA, في مجموعة المستخلص المائي بتركيز 400 ملغم/ كغم قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

5. وجود إرتفاع معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى كل من: HDL والـ GPX في مجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان بتركيز 400 ملغم/كغم ومجموعة المستخلص المائي بتركيز 400 ملغم/ كغم المعاملة بمادة MSG قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

6. وجود انخفاض معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى الـ MDA في مجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان بتركيز 400 ملغم/ كغم ومجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان لنفس التركيز والمعاملة بمادة MSG قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

7. وجود ارتفاع معنوي (0.05≥P) في معدل مستوى الـ GPX في مجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان بتركيز 400 ملغم/ كغم قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

8. عدم وجود فــروقات معنــوية (0.05≤P) في معــدل مـستوى كل من: AST, ,ALT ALP, V-LDL, LDL, TG, TC, HDL, البروتين الكلي , الالبومين, الكلوبيولين, GPx و MDA, في مجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان بتركيز 300 ملغم/كغم, ومجموعة المستخلص المائي بتركيز 300 ملغم/ كغم المعاملة MSG قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

9. عدم وجـود فـروقات معنــوية (0.05≤P) في مــعدل مستـوى كل من: AST, ,ALT ALP, V-LDL, LDL, TG, و GPx, في مجموعة المستخلص المائي لبذور الكتان بتركيز 400 ملغم/ كغم المعاملة بمادة MSG قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

10. عدم وجود فروقات معنوية (0.05≤P) في معدل مستوى كل من: البروتين الكلي والكلوبيولين والالبومين و GPx في مجموعة المستخلص المائي لبذور الكتان بتركيز 400 ملغم/ كغم ومجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان لنفس التركيز والمعاملة بمادة MSG قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

أدى التجريع الفموي للجرذان المعاملة بمادة MSG والمستخلص المائي لبذور نبات الكتان نسجياً إلى:

1. وجود زيادة معنوية (0.05≥p) في معدل اقطار الخلايا الكبدية والأوردة المركزية و الجيبانات الكبدية في مجموعة السيطرة الموجبة G2 قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

2. عدم وجود زيادة معنوية (0.05≤P) في معدل أقطار الخلايا الكبدية والأوردة المركزية و الجيبانات الكبدية في مجموعة المستخلص المائي لبذور نبات الكتان بتركيز 300 ملغم/كغم و مجموعة المستخلص بتركيز 400 ملغم /كغم ومجموعة المستخلص المائي بتركيز 300 ملغم/ كغم المعاملة بمادة أُحادي غلوتاميت الصوديوم, ومجموعة المستخلص المائي بتركيز 400 ملغم/ كغم المعاملة بمادة أُحادي غلوتاميت الصوديوم قياساً إلى مجموعة السيطرة السالبة.

3. وجود احتقان في الأوردة المركزية وتمزق في الخلايا والجيبانات الكبدية في مجموعة السيطرة الموجبة مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة التي تميزت مقاطعها بنسيج كبدي طبيعي مع سلامة النسيج الكبدي في كل المجاميع الأخرى الباقية.

نستنتج مما تقدم أن تجريع مادة أُحادي غلوتاميت الصوديوم بهذا التركيز وبصورة مستمرة أدى إلى إرتفاع في بعض المعايير الفسلجية والكيموحيوية للكبد التي تعد مؤشراً على وجود خلل في وظائف الكبد, وان الاستخدام الوقائي للمستخلص المائي لبذور نبات الكتان أدّى إلى تحسن وظائف الكبد واستعادته لبنيته الطبيعية واسترجاع القيم الطبيعية للمعايير الفسلجية و الكيموحيوية نتيجة لوجود المواد المضادة للأكسدة المتوفرة في بذور الكتان واحتواءها على نسبة عالية من الأحماض الدهنية الغير مشبعة.

Study the Protective Effective of Raw Aqueous Extract of Linum usitatissimum on the Functional and Histological Changes in male Rats (Rattus norvegicus) exposed to Monosodium glutamate

Summary
The present study aimed to use the aqueous extract of flaxseed seeds in two different Concentration to reduce the toxic effects of monosodium sodium glutamate in male Rattus norvegicus and to evaluate their effect by studying some physiological, biochemical and histological criteria.
This study was conducted in both the College of Education for pure sciences and the Animal House of the College of Pharmacy – University of Karbala, for the period from the beginning of October 2019 until April 2020, in which (36) males of the white rat adult white rats were used, their ages ranged between (12- 14) weeks and weights between (275 – 450) grams, divided into six groups and administered orally for one month, first group orally administered 2 ml of normal saline solution and a negative control group was promised for one month, The second group, which was considered a positive control group, was administered at a concentration of 14 mg / kg of monosodium glutamate (MSG), the third group was administered at a concentration of 300 mg / kg of aqueous extract of flaxseed plant, the fourth group was administered at a concentration of 400 mg / Kg of aqueous extract of flaxseed plants, the fifth group was administered at a concentration of 300 mg / kg of aqueous extract of flaxseed plants and four hours later administered with a (MSG) concentration of 14 mg / kg, and the sixth group it was administered with a concentration of 400 mg / kg of aqueous extract of flaxseed, and four hours later It was orally administered with (MSG) at a concentration of 14 mg / kg for one month.
To know the effect of MSG and the aqueous extract of flaxseed seeds on some physiological parameters of blood, blood samples were collected 30 days after the start of the experiment and blood serum was obtained to measure the following physiological parameters: Alanine transaminase (AST) Aspartate transaminase (ALP) alkaline phosphatase and criteria Biochemical: cholesterol (TC), triglycerides, triglycerides (TG), high-density lipoproteins (HDL), low-density lipoproteins (LDL) and very-low-density proteins. Low-density lipoprotein (V-LDL), total protein level measurement (TP), albumin, albumin, globulin, glutathione peroxidase GPx, and Malondialdehyde (MDA). In addition to histological study include liver tissue to revealed the difference diameter of liver hepatocyte central veins, and sinuses with control group.
The Oral dosage of MSG-treated rats and the aqueous extract of flaxseed seed led to physiological results:
1. There was a significant increase (P≤0.05) in the level of AST, ALT and ALP enzymes, V-LDL, LDL, TG, TC biochemical parameters, Albumin, Globulin, and Total protein, MDA in the positive control group compared To the negative control group.
2. There was a significant decrease (P≤0.05) in the mean level of both GPx and HDL in the positive control group compared to the negative control group.
3. There was a significant decrease (P≤0.05) in the level of each of the AST, ALT and ALP enzymes, V-LDL, LDL, TG, TC, and MDA enzymes in the aqueous extract group of flaxseed seeds at a concentration of 400 mg/kg.
4. There was a significant decrease (P≤0.05) in the average level of each of the AST, ALT and ALP enzymes, , and MDA in the aqueous extract group at a concentration of 400 mg/kg treated with MSG compared to the negative control group.
5. There was a significant increase (P≤0.05) in the mean level of both HDL and MDA in the aqueous extract group of flaxseed seeds at a concentration of 400 mg/kg and the aqueous extract group at a concentration of 400 mg/kg treated with monosodium glutamate compared to the negative control group.
6. No significant differences (P≥0.05) in the level of AST, ALT and ALP enzymes V-LDL, LDL, TG, TC, HDL, Albumin, Globulin and Total protein, GPx, and MDA, In the aqueous extract group of flaxseed seeds at a concentration of 300 mg/kg and the aqueous extract group at a concentration of 300 mg/kg treated with MSG compared to the negative control group.
7. No significant differences (P≥0.05) in the level of each of the AST, ALT and ALP enzymes, Albumin, Globulin and Total protein, and biochemical parameters TG, TC, LDL, V-LDL, and GPx in the aqueous extract group of flaxseed at a concentration of 400 mg/kg treated with MSG as measured To the negative control group.
The oral dosage of MSG-treated rats and the aqueous extract of flaxseed seed led to histological results:
1. There was a significant increase (P≥0.05) in the average of diameter hepatocytes, central veins, and hepatic sinuses in the positive control group compared to the negative control group.
2. No significant (P≥0.05) in the mean diameter of hepatocytes, central veins, and hepatic sinuses in the groups treated 300 mg/kg and 400 mg/kg aqueous extract of flaxseed (G3,G4). As well as no significant (P≥0.05) in groups (G5,G6), 300 mg/kg, 400 mg/kg aqueous extract of flaxseed and the 14 mg/kg MSG as compared with control group.
3. The presence of congestion in the central veins, rupture of cells and increased hepatic sinuses in the positive control group, compared to the negative control group whose sections were characterized by normal hepatic tissue with the integrity of the hepatic tissue in each of the others groups.
We conclude from the above that the MSG dosage with this concentration and high concentrations continuously leads to a rise in physiological and biochemical parameters that are an indicated of a dysfunction in liver and that treatment with the aqueous extract of flaxseed seeds led to improved liver function and restoration of its natural structure and restoration of natural values Physiological and biochemical parameters due to the antioxidants available in flaxseeds and the high percentage of unsaturated fatty acids in it, which have the advantages of improving and anti-inflammatory.