دراسة خلويه وراثية لتأثير عقار الازثرومايسين على المعايير الفسلجية والنسجية والدور الوقائي لفيتامين C في ذكور الجرذان (Rattus Norvegicus)

رسالة ماجستير

اسم الباحث : حاتم كريم جساب

اسم المشرف : ياسمين خضير خلف

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان

سنة نشر البحث : 2021

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

المستخلص

اجريت هذه الدراسة في مختبر الدراسات العليا – قسم علوم الحياة – كلية التربية للعلوم الصرفة – جامعة كربلاء من 13 تشرين الاول 2020 ولغاية 15 أيار 2021, هدفت الدراسة الحالية إلى معرفة الفعالية التطفيرية لعقار Azithromycin والدور الوقائي لفيتامين C في ذكور الجرذ الابيض عن طريق دراسة بعض المتغيرات في المعاير الوراثية والكيموحيوية والنسجية ,استخدمت 25 من ذكور الجرذان البيض وقسمت عشوائياً إلى خمس مجاميع ,عُدت المجموعة الأولى مجموعة السيطرة حيث اعطيت الملح الفسيولوجي (Normal Saline), وجرعت فموياً ، أمَّا المجموعة الثانية والثالثة فجرُعت بجرعة (15-30mg/kg) علي التوالي من عقار Azithromycin في اليوم الأول من التجربة ولمدة 14 يوماً حيث عدت من المجاميع العلاجية – أمَّا المجموعة الرابعة , جرعت فموياً بفيتامين C بتركيز (100mg/kg) وعقار Azithromycin بجرعة (15mg/kg) , والمجموعة الخامسة جرعت فموياً بفيتامين C بتركيز (100mg/kg) وعقار Azithromycin بجرعة (30mg/kg)من وزن الجسم على التوالي لمدة 14 يوماً وعدت كمجاميع وقاية. جُمعت عينات الدم من المجاميع الخمس بعد 14 يوماً من التجربة لقياس المعايير الآتية: تحطم DNA و التشوهات الكروموسومية و مستوى الكاتاليز Catalase و الكلوتاثيون Glutathione وايونات الصوديوم (Na+) والبوتاسيوم(K+) وقياس مستوى انزيمات الكبد ((ALT -AST -ALP ومستوى اليوريا Urea و مستوى الكرياتينين Creatinine وكذلك تقييم التغيرات النسجية للكبد والكلية وقد حصلنا على النتائج التالية :

سبَّب عقار Azithromycin ارتفاعاً معنوياً (P ˂0.05) في نسبة تحطم DNA في المجموعة الثالثة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة, أمَّا المجاميع الثانية G2 والرابعة G4 والخامسة G5 فتبين عدم وجود فروق معـنوية (P<.0.05) في نسبة تحطم عالي في DNA مقارنة مع مجموعة السيطرة . كما سبب عقار Azithromycin ارتفاعاً معنويا (P˂0.05) في نسبة التشوهات الكروموسومات الكلية Total في مجاميع العلاجية الثانية G2 والثالثة G3مقارنة مع مجموعة السيطرة .أمَّا مجاميع الوقاية الرابعة G4 والخامسة G5 فلم تظهر اي فروق معـنوية (P> 0.05) في نسبة التشوهات الكروموسومات الكلية مقارنة مع مجموعة السيطرة . سَّبب عقار Azithromycin انخفاضاً معنوياً ( 0.05 P˂) في مستوى الكاتاليز CAT و الكلوتاثيون GSH في المجاميع العلاجية الثانيةG2 والثالثة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة , أمَّا المجاميع الوقائية اظهرت نتائج الدراسة لمستوى GSH و CAT عدم وجود فروقات معنوية (P>0.05) في المجاميع الرابعة والخامسة مقارنة مع مجموعة السيطرة .

كما سبب عقار  Azithromycinانخفاضاًمعنوياً  ( 0.05 >P) في معدل مستوى الصوديوم في المجاميع العلاجية الثانية والثالثة مقارنة مع مجموعة السيطرة. أمّا المجاميع الوقاية الرابعة والخامسة فتبين عدم وجود فروقات معنوية (P>0.05) في معدل الصوديوم مقارنة مع مجموعة السيطرة. في حين اظهرت النتائج ارتفاعاً معنوياً  ( 0.05 >P) في معدل البوتاسيوم للمجاميع العلاجية والوقائية مقارنة مع مجموعة السيطرة.

كما ادى إلى ارتفاع معنوي ( 0.05 >P) في مستوى ATS في المجاميع العلاجية الثانية والثالثة التي اعطيت العقار مقارنة مع مجموعة السيطرة. أمّا مجاميع الوقاية الرابعة والخامسة فأظهرت عدم وجود فروقات معنوية (P>0.05) في معدل مستوى (ATS) Aspartate transaminase التي اعطيت مقارنة مع مجموعة السيطرة. في حين اظهرت النتائج عدم وجود فروقات معنوية (P>0.05) في مستوى(ALT ) transaminase Alanine  و(  Alkaline phosphatase(ALPفي المجموعة العلاجية الثانية مقارنة مع مجموعة السيطرة » بينما سبب ارتفاعاً معنوياً ( 0.05 >P) في المجموعة العلاجية الثالثة مقارنة مع مجموعة السيطرة. أمّا مجاميع الوقاية الرابعة والخامسة أيضا بينت عدم وجود فروقات معنوية (P>0.05) في مستوى  ALT و ALP مقارنة مع مجموعة السيطرة .وسبب ايضاً ارتفاعاً معنويا(0.05.>P) في مستوى اليوريا Urea والكرياتينين Creatinine في المجاميع العلاجية الثانية والثالثة مقارنة مع مجموعة السيطرة أمّا المجاميع الوقاية اشارت النتائج إلى عدم وجود فروقات معنوية (P>0.05) في مستوى اليوريا والكرياتينين للمجموعة الرابعة مقارنة مع مجموعة السيطرة . بينما سبب ارتفاعاً معنوياً (0.05>P) في مستوى اليوريا والكرياتينين في المجموعة الخامسة مقارنة مع مجموعة السيطرة . سبب عقار  Azithromycinانخفاضاً تغيرات نسجية للكبد في المجموعة الثانية والثالثشة مقارنة مع مجموعة السيطرة كاحتقان الوريد المركزي وتنخر الخلايا الكبدية وتغلظ الانوية وتوسع الجيبانيات وجود خلايا التهابية »بينما اظهرت المجاميع الوقائية الرابعة والخامسة احتقان الوريد المركزي مع انتظام جزء من الحبال الكبدية ووجود الجيبانيات مع وجود خلايا التهابية مزمنة مقارنة مع مجموعة السيطرة. كما سبب عقار  Azithromycinانخفاضاً, تغيرات في نسيج الكلى في المجاميع العلاجية الثانية والثالثة من ضمور في حجم الكبيبة ومحفظة بومان وتحطم جدران النبيب البولي الداني والنبيب البولي القاصي وزيادة كبيرة في حجم فسحة بومان واحتقان الاوعية الدموية مقارنة مع مجموعة السيطرة .أمّا مجاميع الوقائية الثالثشة والرابعة يلاحظ فيها ضمور في حجم بعض الكبيبات ومحفظة بومان وتحطم جدران النبيب البولي الداني والنبيب البولي القاصي وزيادة في حجم فسحة بومان وحصول ضرر في نسيج الكلية مقارنة مع مجموعة السيطرة .

مما تقدم نستنتج ان عقار  Azithromycinانخفاضاً تسبب في حدوت تحطم للDNA وتشوهات للكروموسوم وكذلك تغيرات في المعاير الكيموحيوية والنسجية للكبد والكلى .وان اعطاء فيتامين C عمل على عكس الآثار الجانبية للعقار .ثبتت الدراسة هذه النتيجة لأول مرة في العراق كونها درست التغيرات الحاصلة  للDNA والتشوهات الكروموسومية وكذلك المعاير الكيموحيوية نتيجة لإعطاء العقار.

cytogenetic study of azithromycin effect on physiological and histological parameters and the protective role of vitamin C in male Rats (Rattus Norvegicus)

Abstract

This study was conducted in the Graduate Studies Laboratory – Department of Life Sciences – College of Education for Pure Sciences – University of Karbala from October 13, 2020 to May 15, 2021, the current study aimed to know the mutagenic activity of Azithromycin and the protective role of vitamin C in male albino rats by studying some Variables in genetic, biochemical and histological parameters, 25 white male rats were used and divided randomly into five groups. The first group was considered the control group, where it was given physiological salt (Normal Saline), and it was administered orally, while the second and third groups were given a dose (15-30mg/kg) on the Azithromycin was taken orally on the first day of the experiment and for a period of 14 days, as they were returned from the treatment groups – the fourth group was orally dosed with vitamin C at a concentration of (100 mg/kg) and Azithromycin at a dose of (15 mg/kg), and the fifth group was dosed orally with vitamin C at a concentration of (100 mg) /kg) and Azithromycin at a dose of (30mg/kg) of body weight, respectively, for 14 days, which were considered as protection groups. Blood samples were collected from the five groups after 14 days of the experiment to measure the following parameters: DNA breakage, chromosomal abnormalities, level of catalase, glutathione, sodium ions (Na+), potassium (K+), liver enzymes (ALT-AST-ALP) and urea levels. And the level of creatinine, as well as the evaluation of histological changes in the liver and kidneys, and we obtained the following results:
Azithromycin caused a significant increase (P ˂ 0.05) in the percentage of DNA breakage in the third group G3 compared with the control group, while the second groups G2, the fourth G4 and the fifth G5 showed no significant differences (P<0.05) in the percentage of high DNA breakage compared with the control group. control group. Azithromycin also caused a significant (P ˂ 0.05) increase in the percentage of total chromosomal abnormalities in the second treatment groups G2 and third G3 compared with the control group. As for the
II
fourth and fifth prevention groups G4 and G5, there were no significant differences (P<0.05) in the percentage of chromosomal abnormalities. college compared with the control group.
Azithromycin caused a significant decrease (P˂ 0.05) in the level of CAT catalase and GSH glutathione in the second treatment groups G2 and the third G3 compared with the control group. As for the protective groups, the results of the study for the level of GSH and CAT showed no significant differences (P<0.05) in the groups. fourth and fifth compared with the control group. Azithromycin also caused a significant (P<0.05) decrease in the mean sodium level in the second and third treatment groups compared with the control group. As for the fourth and fifth prevention groups, it was found that there were no significant differences (P<0.05) in the sodium rate compared with the control group. While the results showed a significant (P<0.05) increase in the potassium rate of the therapeutic and preventive groups compared with the control group, and it also led to a significant (P<0.05) increase in the AST level in the second and third treatment groups that were given the drug compared to the control group. As for the fourth and fifth prevention groups, there were no significant differences (P 0.05) in the mean AST level that were given compared with the control group. While the results showed that there were no significant differences (P 0.05) in the level of ALT and ALP in the second treatment group compared with the control group, while they increased significantly (P<0.05) in the third treatment group compared with the control group. The fourth and fifth prevention groups also showed no significant differences (P 0.05) in the level of ALT and ALP compared with the control group. It was also caused by a significant increase (P<0.05) in the level of urea and creatinine in the second and third treatment groups compared with The control group As for the prevention groups, the results indicated that there were no significant differences (P 0.05) in the level of urea and creatinine for the fourth group compared with the control
III
group, while the cause of a significant increase (P<.0.05) in the level of urea and creatinine in the fifth group compared with the control group. .
Azithromycin caused histological changes to the liver in the second and third groups compared to the control group, such as central vein congestion, hepatocyte necrosis, nuclei constriction, sinusoidal dilatation, and the presence of inflammatory cells, while the fourth and fifth protective groups showed central vein congestion with regularity of part of the hepatic cords and the presence of sinusoids with the presence of cells Chronic inflammatory compared with the control group. Azithromycin also caused changes in the kidney tissue in the second and third treatment groups from atrophy in the volume of the glomerulus and Bowman’s capsule and the destruction of the walls of the proximal urinary tubule and the distal urinary tubule and a significant increase in the size of Bowman’s space and vascular congestion compared with the control group. As for the third and fourth protective groups, atrophy in the size of some glomeruli and Bowman’s capsule, destruction of the walls of the proximal urinary tubule and the distal urinary tubule, an increase in the size of Bowman’s space, and damage to the kidney tissue compared with the control group.
From the foregoing, we conclude that Azithromycin caused DNA damage and chromosome abnormalities, as well as changes in the biochemical and histological parameters of the liver and kidneys. The administration of vitamin C reversed the side effects of the drug. The study proved this result for the first time in Iraq, as it studied the changes in DNA and chromosomal abnormalities as well as the parameters. Biochemistry as a result of drug administration.