دراسة نسيجية وكيميوحيوية للدور الوقائي لهرمون Dehydroepiendesteron في كبح تصلب الشرايين Atherosclerosis المستحث من إعطاء الكولسترول في إناث لأرانب البالغة

رسالة ماجستير

اسم الباحث : غفران عدنان عبد الامير حلبوص

اسم المشرف : أ.م.د بتول عباس حسين

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2024

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصــــــــة
هدفت الدراسة الحالية لتقيم التغيرات النسجية والمرضية النسجية المناعية الناتجة من تغذية حيوانات التجربة على غذاء عالي الكوليسترول ومن ثم معالجتها بهرمون (Dehydroepiendesteron) (DHEA) على تصلب الشرايين المستحدث ومعرفة تأثيره على القلب والأوعية الدموية والكبد , وكانت مدة المعاملة ست اسابيع , واستخدم (20) حيوانا من الأناث المحلية البالغة وتبلغ من العمر بين (9-8) أشهر في شهر كانون الأول وبوزن (2000-1500) غرام وتم تقسيمها الى أربع مجاميع وبواقع (5/مجموعة) ولمدة ست اسابيع , المجموعة الأولى (G1 ) مجموعة السيطرة التي اعطيت الماء مع الغذاء الاعتيادي , المجموعة الثانية ((G2 اعطيت الكوليسترول 1.5) غم/ لكل100غم من الغذاء) والمجموعة الثالثة (G3) اعطيت الكوليسترول (1.5غم /لكل 100غم من الغذاء) مع الهرمون ( 2 غم / كغم) والمجموعة الرابعة جرعت الهرمون فقط (2 غم / كغم ) , وتم اخذ عينات الدم في نهاية التجربة لدراسة المعايير الكيموحيوية والتي شملت على دراسة تركيز الكوليسترول الكلي (TC) Total Cholesterol , الكليسيريدات الثلاثية (TG )Triglyceride, والبروتينات الدهنية عالية الكثافة (HDL) High density Lipoprotein , والبروتينات الدهنية واطئة الكثافة Low density Lipoprotein (LDL ) , والبروتينات الدهنية واطئة الكثافة جدا (VLDL) Very low density Lipoprotein , ومستوى تركيز المالونديهايد (MDA ) , ومستوى تركيز الكلوتاثيون (GSH ) , وقياس تركيز انزيم النتريك اوكسايد (NO ) , وقياس تركيز هرمون Dehydroepiendesteron (DHEA) , وقياس تركيز الهرمونات الاستروجين (Estrogen), والبروجسترون Progesterone) ), واجراء تقنية IHC)) لمستقبل الاستروجين ER)) على خلايا العضلة القلبية .
جاءت نتائج الدراسة الحالية كما يلي :-
وجود ارتفاع معنوي (p<0.05 ) في تركيز TC, TG, وLDL,و VLDL, وانخفاض معنوي في تركيز HDL وارتفاع معنوي (p<0.05 ) في تركيز (MDA) وانخفاض معنوي في تركيز GSH في المجموعة المعاملة بالكوليسترول G2 مقارنة مع مجموعة السيطرة ,

كما أظهرت الدراسة أن استخدام الكوليسترول مع الهرمون G3 أدى إلى انخفاض معنوي (p<0.05 ) في تركيز , TG, وLDL,و VLDL, وارتفاع في تركيز HDL, بالمقارنة مع المجموعة G2 , وزيادة معنوية (p<0.05 ) في تركيز GSH , وانخفاض معنوي في تركيز MDA بالمقارنة مع المجموعة G2 , وارتفاع تركيز هرمون الاستروجين, والبروجسترون, وارتفاع معنويا (p<0.05 ) في تركيز معدل انزيم النتريك اوكسايد في المجوعة المعاملة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة ومن ناحية أخرى كان هناك انخفاض معنويا (p<0.05 ) في مجموعة المعاملة G2 بالنسبة لمجموعة السيطرة .

في حين اظهرت مجموعة G4 التي جرعت بالهرمون فقط ارتفاع معنويا (p<0.05 ) في تركيز هرمون Dehydroepiendesteron DHEA)) في مجموعة المعاملة G3 و المجموعة المعاملة بالهرمون G4 بالمقارنة مع مجموعة السيطرة .

اظهرت نتائج الدراسة الحالية في المقاطع النسجية المأخوذة من الشريان الأبهر والكبد والقلب لمجموعة أناث الأرانب المعاملة بالكوليسترول G2 اظهرت نتائج الشريان ,عدم انتظام البطانة الداخلية , وارتشاح الخلايا الالتهابية , واحتقان النسيج , وتراكم الدهون , وظهور الخيوط الدهنية , أما G3لوحظ تراكم قليل للخلايا الدهنية , ووضوح الغشاء المطاطي الداخلي للشريان, ولم يلاحظ وجود التهاب او احتقان للنسيج, وسمك جدار الشريان, وعدم انتظام البطانة الداخلية , والمجموعة G4 لوحظ فيها وضوح طبقات الشريان وعدم ملاحظة تغيرات نسجيه واضحة أقرب الى الطبيعي وفي الكبد لوحظ توسع في الجيبانيات الدموية , واحتقان حول الوريد المركزي , وتنكس دهني , وظهور قطيرات دهنية ,مقارنه بمجموعة السيطرة , أما المجموعة G3 لوحظ احتقان خفيف حول الوريد المركزي , تنكس دهني قليل داخل النسيج , وتوسع الجيبانيات الدموية , وظهور خلايا kuffer cell , وأما بالنسبة المجموعة G4 لوحظ احتقان خفيف حول الوريد المركزي ,بالمقارنة مع مجموعة السيطرة .

ولوحظ في القلب للG2 احتقان الأوعية الدموية , وظهور الخلايا الرغوية , وترسب لمادة الكوليسترول . والمجموعة G3لوحظ ارتشاح خفيف للخلايا الالتهابية وتجمعات دهنية خفيفة مع تليف , أما G4 لوحظ فيها ارتشاح الخلايا الإلتهابية قليل, وتليف ,بالمقارنة مع المجموعة السيطرة .

أما نتائج التعبير الكيمائي المناعي النسجي لم تظهر تعبيرا عاليا لمستقبل الاستروجين في مجاميع المعرضة للكوليسترول G2 بالمقارنة مع المجاميع السيطرة وظهور ارتفاع معنوي في المجاميع المعاملة بهرمون الباراستيرون ( DHEA ) G3 وG4 مقارنة مع المجاميع الأخرى.

تم الاستنتاج من الدراسة الحالية إلى أن التجريع ب 2 غم /كغم بهرمون Dehydroepiendesteron ( DHEA) لم يكن هناك اي تأثير سلبي على المعايير والتراكيب النسجية وان استخدام هرمون Dehydroepiendesteron ولمدة ست اسابيع للحيوانات المصابة بفرط الكوليسترول له تأثير في تحسين الدهون lipid profile في الدم وانسجة الاوعية الدموية والكبد والقلب وتقليل الاجهاد التأكسدي الناتج من اعطاء الكوليسترول .

Histological and biochemical study of the protective role of Dehydroepiendesteron in suppressing cholesterol-induced atherosclerosis in adult female rabbits

Abstract The present study aimed to evaluate the histological and immunopathological changes resulting from feeding experimental animals on a high-cholesterol diet and then treating them with the hormone (Dehydroepiendesteron) (DHEA) on induced atherosclerosis and to know its effect on the heart, blood vessels and liver. The treatment period was six weeks, and (20) local adult female animals were used, aged between (8-9) months in December and weighing (1500-2000) grams. They were divided into four groups, (5/group) for a period of six weeks. The first group (G1) was the control group that was given water with the regular food, the second group ((G2 was given cholesterol 1.5) g/per 100 g of food) and the third group (G3) was given cholesterol (1.5 g/per 100 g of food) with the hormone (2 g/kg) and the fourth group was given the hormone only (2 g/kg). ), and blood samples were taken at the end of the experiment to study the biochemical parameters, which included studying the concentration of total cholesterol (TC), triglycerides (TG), high density lipoprotein (HDL), low density lipoprotein (LDL), very low density lipoprotein (VLDL), Malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), nitric oxide (NO) enzyme concentration, Dehydroepiendesteron (DHEA), estrogen (Estrogen) and progesterone (Progesterone) hormones, and performing the IHC technique for the estrogen receptor (ER) on cardiac muscle cells. The results of the current study were as follows: –

There was a significant increase (p<0.05) in the concentration of TC, TG, LDL, and VLDL, and a significant decrease in the concentration of HDL and a significant increase (p<0.05) in the concentration of (MDA) and a significant decrease in the concentration of GSH in the cholesterol-treated group G2 compared to the control group.

The study also showed that the use of cholesterol with the hormone G3 led to a significant decrease (p<0.05) in the concentration of TG, LDL, and VLDL, and an increase in the concentration of HDL, compared to the G2 group, and a significant increase (p<0.05) in the concentration of GSH, and a significant decrease in the concentration of MDA compared to the G2 group, and an increase in the concentration of estrogen, progesterone, and a significant increase (p<0.05) in the concentration of the nitric oxide enzyme rate in the G3 treatment group compared to the control group. On the other hand, there was a significant decrease (p<0.05) in the G2 treatment group for For the control group.

While the G4 group that was dosed with the hormone only showed a significant increase (p<0.05) in the concentration of the hormone Dehydroepiendesteron (DHEA) in the G3 treatment group and the G4 hormone treatment group compared to the control group.

The results of the current study in the tissue sections taken from the aorta, liver and heart of the group of female rabbits treated with cholesterol G2 showed the results of the artery, irregularity of the inner lining, infiltration of inflammatory cells, tissue congestion, accumulation of fat, and the appearance of fatty threads. As for G3, a small accumulation of fat cells was observed, and the inner elastic membrane of the artery was clear, and no inflammation or congestion of the tissue was observed, and the artery wall was thicker, and the inner lining was irregular. In the group G4, the artery layers were clear and no clear tissue changes were observed closer to normal. In the liver, expansion of the blood sinusoids, congestion around the central vein, fatty degeneration, and the appearance of fat droplets were observed, compared to the control group. As for the group G3, slight congestion was observed around the central vein, slight fatty degeneration within the tissue, expansion of the blood sinusoids, and the appearance of Kuffer cells. As for the group G4, slight congestion was observed around the central vein. , compared to the control group.

In the heart of G2, blood vessel congestion, foam cells, and cholesterol deposition were observed.
In the G3 group, slight infiltration of inflammatory cells and slight fatty deposits with fibrosis were observed. As for G4, slight infiltration of inflammatory cells and fibrosis were observed, compared to the control group.

As for the results of immunohistochemical expression, they did not show high expression of estrogen receptor in the cholesterol-exposed groups G2 compared to the control groups, and a significant increase appeared in the groups treated with parasteron hormone (DHEA) G3 and G4 compared to the other group