University of Kerbala
اسم الباحث : نادية نايف حسين محمد المسعـودي
اسم المشرف : أ. د. جواد كاظم الجنابي أ. د. بان طه محمد
الكلمات المفتاحية :
الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة
الاختصاص : علوم الحياة-النبات
سنة نشر البحث : 2021
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
جريت تجارب لدراسة إنتشار األخماج الفطرية وتشخيص مسبباتها بالطرق التقليدية
وبتقنيات تفاعل البلمرة التسلسلي وتأثير المستخلص الكحولي والمائي لنبات oleifera Moringa
وراشح الفطر plamivorus Marasmius على نمو الفطر rubrum Trichophyton فضلا
عن تأثير راشح الفطر البازيدي على التعبير الجيني للفطر rubrum. T.
شملت الدراسة 451عينة توزعت بين عينات جلد بلغت 32.75 %وشعر85.15 %وأظافر
9 % لمرضى مراجعين إلى إستشارية األمراض الجلدية في مستشفى الحسين )ع( التعليمي في
محافظة كربلء للفترة من شباط لغاية تشرين الثاني 8142 إذ أخضعت العينات إلى الفحص المباشر
بإستخدام محلول KOH تركيز 45 ، %وكذلك الزرع في وسط أكار السابرويد دکستروز ، كانت
نتائج الفحص المباشر موجبة في 154 عينة وبنسبة مئوية 100 ،%أما نتائج الزرع فكانت موجبة
في 110 عينة وبنسبة مئوية 42.71 %من المجموع النهائي . كانت نسبتها في األناث 50.43%
و92.27 %في الذكور .بينت نتائج الدراسة الحالية أن داء السعفة تضمن 7 أنماط هي: سعفة الجسم Tinea(
(corporis وسعفة الشعر (capitis Tinea (وسعفة القدم )pedis Tinea )وسعفة اليد Tinea(
(manuum وسعفة األظافر (unguium Tinea (وسعفة الوجه )faciei Tinea )وسعفة المغبن
(cruris Tinea (توزعت على الذكور واإلناث وعلى الفئات العمرية المختلفة إذ إحتلت سعفة
الجسم النسبة األعلى من بين الحاالت السريرية األخرى إذ كانت نسبتها في اإلناث 32.25 % وفي
الذكور 58.15 %أما سعفة الشعر فكانت نسبتها في اإلناث 19.5 % وفي الذكور 38.10 .أما
سعفة القدم وسعفة اليد وسعفة األظافر وسعفة الوجه وسعفة المغبن فكانت نسبتها في اإلناث هي
3.89و 5.19 و 1.29 :الذكور وفي التوالي على% 3.24 و 3.89 و 5.19و 6.49و 7.79
و19.5 و29.1 على التوالي. اي إن اإلصابة كانت األعلى في اإلناث بإستثناء سعفة الشعر وسعفة
الوجه التي كانت أعلى في الذكور من األناث.
بينت الدراسة إن لعامل العمر تأثير في حدوث اإلصابة فقد وجد إن الفئة العمرية 11- 81
سنة هي األكثر عرضة لإلصابة بداء السعفة )11)عينة تلتها الفئة العمرية 84-01 سنة )08 )عينة
وتلتها الفئة)04- 11 )سنة )01 )عينة ثم الفئة 41 سنوات فما دون )89 )عينة وأقلها الفئة أكثر من
.)80( سنة 11
ب
أظهرت نتائج الدراسة أن نسبة العينات التي ظهرفيها الجنس Trichophyton كانت
ا كان جنس
55.51 %وتلها جنس Microsporum بنسبة 00.03 %وأقلها ظهورا
.%2 وبنسبة Epidermophyton
اتضح من النتائج إن أكثر األنواع الفطرية
ترددا خلل هذه الدراسة هو rubrum.T والذي ا
وصل إلى 85 عينة وبنسبة 38.88 % في حين بلغ تردد الفطر canis. M بنسبة 42.42 %ثم
E. والفطر % 3.83 بنسبة M. gypsum والفطر % 41.91 بنسبة T. mentographyte الفطر
. % 0.50 بنسبة T. erinacei والفطر% 5.15 بنسبة floccosum
شخصت الفطريات التي عزلت من اإلصابات الجلدية إ
عتمادا على الخصائص والصفات ا
المظهرية للمستعمرات الفطرية النامية على األوساط الزرعية مثل طبيعة المستعمرات الفطرية
وشكلها ولونها وحجمها وقوامها والصبغات التي تنتجها وشكل الجهة المعاكسة فضلا عن الخصائص
المجهرية خاصة التراكيب الفطرية المنتجة كاألبواغ الكبيرة والصغيرة من حيث الشكل والحجم
والعدد وسماكة الجدران والفواصل وعدد الخليا الموجودة .
بينت نتائج تحليل تفاعل البلمرة المتسلسل )PCR )Reaction Chain Polymerase أن
إحتوت على حزمة مفردة من الحامض النووي المستخلص
ا
جميع العزالت التي شخصت مظهريا
وتم قياس كمية ونقاوة الـ DNA المستخلص بجهازNanodrop ، وكانت نتائج التحلل للجين 18S
RNA ribosomalموجبة لعزالت األجناس الثلثة Trichophyton وMicrosporum و
Epidermophyton وكان الladder Marker 100bp-1500 إيجابي للعزالت حيث كان
الخط T6-T1 يدل على جنس Trichophytonعند ناتج PCR ذي حجم 510bp و الخط -M1
M3 إيجابي للجنس Microsporum عند ناتج PCR ذي حجم 565bp والخط E إيجابي للجنس
Epidermophyton وناتج PCR ذي حجم 666bp.
لقد بينت الشجرة الوراثية لألجناس الثلثة وبعد فحص ال PCR
أرسلت نواتج الفحص إلى
موقع بنك الجينات للتأكد من نوع الفطر وذلك بمقارنته مع الفطريات المسجلة في هذا الموقع
لألجناس) MEGA 6.0, multiple alignment analysis tool) برنامج وبإستعمال
حيث) Trichophyton sp. , Microsporum sp., and Epidermophyton sp.) الفطرية
أظهرت نتائج التحليل وجود تقارب واضح بين عزالت الفطر المحلية بالمقارنة مع بقية العزالت
ج
األخرى الظاهرة في الشجرة الوراثية ، حيث تستخدم الشجرة الوراثية لمعرفة إرتباط كل األنواع
الخاصة بجنس معين مع النوع المراد تحديده باإلضافة إلى الخصائص والصفات المظهرية كطريقة
للحصول على التشخيص الدقيق باإلضافة الى التشخيص الروتيني .
أظهرت النتائج أن للمستخلص الكحولي لنبات المورنجا تأ
ا
ثيرا
معنويا في نمو الفطر الجلدي ا
% 100 و 72.15 و 59.49 و 46.41 و 27.84 التثبيط نسب بلغت فقد T. rubrum
عند التراكيز 1 و5 و10 و15 و20 % على التوالي. أما في المستخلص المائي فقد كانت النسب
15و 10و 5و1( التراكيز عند % 77.63و 71.30و 56.11 و 40.92و 27.84 للتثبيط المئوية
و20 % )على التوالي.
كذلك فإن التأثير التثبيطي للمستخلص الكحولي والمائي لنبات المورنجا كان معنويا في نمو
الفطر الجلدي canis. M إذ بلغت النسبة المئوية للتثبيط للمستخلص الكحولي هي: 54.03
و53.50 و80.59 و94.28 و411 % عند التراكيز 4و5 و41 و45 و81 %على التوالي. في
حين بلغ التأثير التثبيطي للمستخلص المائي : 15.05 و 24.58 و21.55 و18.31 و51.39%
على التوالي عند نفس التراكيز.
أظهر راشح الفطر palmivorus. M تأثير معنوي
ا في نمو الفطر rubrum. T ، إذ تسبب ا
نعكس سلبا على المسافات بين الحواجز الفطرية Septa ا الراشح في إنتاج غزل فطري مشوه إ
ا على الجدار الخلوي وتشويها للكونيديا الكبيرة وإنخفاض في أعدادها وحصول تحلل
وأحدث ضررا
ا معنويا على تراكيب الفطر .M ا للغزل الفطري ، وكذلك كان لراشح الفطر البا
زيدي تأثيرا تثبيطيا
canis تكوين على الغزل الفطري إذ يظهر تشوها في الخيوط الفطرية مع وجود إنتفاخات غير
طبيعية فيه مع إختزال كبير ألعداد الــ Macroconidia.
أظهرت النتائج بإستخدام تقنية (PCR- qRT(PCR time Real مع تطبيق برايمر خاص
بوجود فروقات واضحة في مستويات التعبير الجيني للجينات Synthase Citrate و Serine
The specific primer of السيطرة ومجموعة T.rubrum للفطر الخاصة MEP4 و Protase
gene TUBULIN-β ، حيث حصل إنخفاض واضح regulation down في التعبير الجيني
لكل من Synthase Citrate وProtase Serine ( في كل من المعاملة 4 و المعاملة 2 ،
ا
والمعاملة 3 ، والمعاملة 4 ، مقارنة مع نتيجة التعيير الجيني لمجموعة السيطرة التي تعادل تعبيرا
د
جينيا بمقدار ) 4 change fold ) حسب طريقة . Livak وتم ملحظة دقة التضخيم لمنتج ا
الجينات بقيمة عتبة الدورة (Ct (للجينات الثلثة المستهدفة .وتبين عن طريق النتائج وجود علقة
عكسية بين قيم Ct والتعبير الجيني فكلما زادت قيمتها انخفض التعبير الجيني .) ترتبط عكسيا بكمية
قالب البداية التي تعني ارتفاع قيمة Ct يشير إلى انخفاض مستويات التعبير الجيني أو جين
التضخيم(.
أن التشخيص الجزيئي في هذه الدراسة
كان مهما جدا في التحقق من نتائج التشخيص ا
المظهري لعزالت الممرض. هذه الدراسة هي األولى في العراق التي أظهرت دور الفطر .T
erinacei كممرض لإلنسان ، والذي نقل على األرجح من القنافذ. مما يؤشر بضرورة زيادة
الوعي الصحي بمصادر العدوى لغرض للتقليل من إنتشار هذا الفطر الجلدي وضرره على
المجتمع.
إن راشح الفطر palmivorus. M له تأثير في النمو والتعبير الجيني لـ rubrum. T ،
باإلضافة إلى التأثير الحيوي ضد العوامل المرتبطة بضراوة هذا الممرض ، إذ أظهرت جميع
ظا في التعبير الجيني ا تراكيز راشح الفطر البازيدي والمستخدمة في هذه الدراسة قد تسببت إنخفا
للفطر rubrum. T مقارنة بالمجموعة الضابطة. وتعد هذه النتائج هي األولى في إختبار تأثير
Metalloprotease4 MEP4 و serine protease و citrate synthase على الراشح
كأهداف لضراوة الفطر rubrum. T.
Morphological and Molecular characteristics of some dermatophyte fungi in Karbala Province and evaluation of the Marasmius palmivorus filtrate and leaf extract of Moringa oleifera on the growth and on gene expression of Trichophyton rubrum
Experiments were carried out in order to study the spread of fungal
infections, the diagnosis of their etiology by traditional methods and
techniques of chain reaction polymerization, the effect of the alcoholic
and aqueous extract of Moringa oleifera and filtrate Marasmius
plamivorus on the growth of fungi.
The study included 154 samples distributed between skin samples
amounting to 75.32%, hair 15.85% and nails 9% of patients referred to
the Consultant Dermatology at Al-Hussein (Peace be upon him) Teaching
Hospital in Karbala for the period from February to November 2018,
when the samples were subjected to direct examination using KOH
solution. The results of the direct examination were positive in 154
samples with a percentage of 100%, and the results of the culture were
positive in 110 samples with a percentage of 71.42% of the final total. Its
percentage in females was 43.50% and 27.92% in males.
The study showed that the age factor has an effect on the incidence of
infection. It was found that the age group 11-20 years is the most
vulnerable to infection with ringworm (40) sample, followed by the age
group 21-30 years (32) sample, followed by the group (31-40) years (30)
sample, then the category 10 years or less (29) samples, and the lowest
category is more than 40 years (23 ).
The results of the study showed that the percentage of samples in
which the genus Trichophyton was present was 54.66%, followed by the
genus Microsporum by 37.33%, and the lowest appearance was the genus
Epidermophyton at 8%.
The results revealed that the most frequent fungal species during this
study was T. rubrum, which reached 25 samples with a rate of 22.72%,
while M. canis was recorded at 18.18%, followed by T. mentographyte by
10.90%, M. gypsum by 7.27% , E. floccosum (5.45%) and T. erinacei
3.63%.
The fungi isolated from skin infections were identified depending on
the characteristics and phenotypic characteristics of the fungal colonies
growing on the agricultural media, such as the nature of the fungal
colonies, their shape, color, size, texture, pigments produced by them, the
