اسم الباحث : رشا مهدي خليفة سليمان
اسم المشرف : . د عبير ظاهر ناجي الحسناوي, ا.د علي جليل علي الياسري
الكلمات المفتاحية :
الكلية : كلية الطب
الاختصاص : الاحياء المجهرية الطبية
سنة نشر البحث : 2025
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
الخلاصة
تعدّ أمراض الشرايين التاجية (CAD) السبب الأكثر شيوعًا للوفاة في عموم السكان، وتتميز بنقص التروية الدموية والأوكسجين إلى عضلة القلب . يُعدّ الإنترلوكين-32 (IL-32) سايتوكينًا التهابيًا معززًا، يعمل على تقوية الاستجابة الالتهابية من خلال تحفيز إفراز مجموعة من السايتوكينات الالتهابية الأخرى. وقد تبين أن هناك تعدد شكلٍ نكليوتيديًا منفردًا (SNP) في منطقة المحفز لجين IL32 يؤثر في التعبير الجيني لأنواعه في الخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي، مما يشير إلى أن الطفرات في هذا الجين قد تسهم في تطور أمراض التهابية متعددة مثل مرض الشريان التاجي.
شملت الدراسة جمع 100 عينة دم ومصل من الذكور والإناث (48 ذكرًا و52 أنثى) ممن تراوحت أعمارهم بين 40 إلى 70 عامًا، من مراجعي مركز الشهيد المحراب لقسطرة القلب وجراحة القلب ومستشفى الإمام الصادق في محافظة بابل، العراق، وذلك خلال الفترة الممتدة من أكتوبر 2024 إلى يناير 2025. تم جمع عينات الدم في أنابيب تحتوي على مادة EDTA وأنابيب جل، حيث خُصصت 50 عينة لمرضى الشريان التاجي و50 عينة لأشخاص أصحاء كمجموعة ضابطة. وتم الحصول على عينات الدم والمصل من جميع المشاركين لغرض قياس مستويات IL-32 في المصل باستخدام تقنية المقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA)، في حين تم تحديد تعدد الأشكال الجينية لجين IL32 باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بطريقة الأليل المحدد.
أظهرت نتائج الدراسة الحالية عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية (p>0.05) فيما يخص العمر، الفئات العمرية، والجنس بين المجموعتين. في المقابل، أظهرت التحليلات الإحصائية للوضع الاقتصادي وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين المرضى والأصحاء على التوالي (p=0.0001) و(p=0.0015). كما بيّنت النتائج وجود فروق معنوية (p=0.0455) فيما يتعلق بتاريخ العائلة، حيث تبين أن المرضى الذين لا يملكون تاريخًا عائليًا للإصابة بأمراض القلب أظهروا فروقًا ذات دلالة.
وفيما يتعلق بمؤشر كتلة الجسم (BMI)، فقد كان 74% من المرضى و86% من الأصحاء ضمن الفئة الطبيعية، في حين كانت النسب 18% و14% على التوالي في الفئة الزائدة الوزن، بينما
بلغت نسبة السمنة 8% لدى مجموعة المرضى فقط. كما أظهرت الدراسة أن أعلى نسبة للإصابة بارتفاع ضغط الدم كانت ضمن الفئة العمرية من 61 إلى 71 عامًا، حيث بلغت 50%.
من جهة أخرى، أظهرت الدراسة وجود فرق معنوي (p=0.004) في مستوى IL-32 في مصل الدم بين مجموعة المرضى والمجموعة الضابطة. كما سُجل ارتفاع في مستويات بروتين سي التفاعلي (CRP) بمعدل (7.202) ومعدل ترسيب كريات الدم الحمراء (ESR) بمعدل (17.06) في مجموعة المرضى.
علاوة على ذلك، أظهرت نتائج تعدد الأشكال الجيني (rs4786370) لجين IL32 وجود فروق معنوية (p=0.0455)، بنسبة أرجحية (OR) بلغت 2.2788، وبفاصل ثقة (CI) يتراوح بين (1.0165 – 5.1085). وقد ارتفعت نسبة النمط الوراثي CC في مجموعة المرضى (54.0%) مقارنةً بالمجموعة الضابطة (34.0%)، بينما زادت نسبة النمط TT في المجموعة الضابطة (38.0%) مقارنة بالمرضى (16.0%).
وفيما يخص تحليل تردد الأليلات، كانت النتائج معنوية أيضًا (p=0.0028)، بنسبة أرجحية بلغت 2.4113 وبفاصل ثقة (1.3535 – 4.2959). إذ لوحظ ارتفاع في تردد الأليل C في مجموعة المرضى (69%) مقارنةً بالأصحاء (48%)، بينما ارتفع تردد الأليل T في مجموعة الأصحاء (52%) مقارنةً بالمرضى (31%).
كما أظهرت الدراسة نتائج ذات دلالة معنوية عند إجراء تحليل منحنى العامل التشغيلي للمستقبل (ROC) لمستويات IL-32، حيث بلغت مساحة تحت المنحنى (AUC) 0.786، مع حساسية 0.60 ونوعية 0.88، وبقيمة إحصائية (p=0.000).
أظهرت نتائج هذه الدراسة ارتفاعًا في مستوى IL-32 في مصل دم مرضى الشريان التاجي مقارنةً بالأفراد الأصحاء، ما يشير إلى إمكانية استخدام هذا السايتوكين كمؤشر تنبؤي لتشخيص المرض. كما أظهرت الدراسة أن النمط الوراثي CC كان أكثر شيوعًا بين المرضى، في حين كان النمط TT أكثر انتشارًا بين الأصحاء، مما قد يدل على أن النمط CC يرتبط بزيادة خطر الإصابة بأمراض الشريان التاجي، بينما قد يكون للنمط TT دور وقائي ضد هذا المرض.
Association of Interleukin 32 Gene Polymorphism (rs 4786370) and Serum Level with Coronary Artery Disease
Abstract
Coronary artery disease (CAD) is the most common cause of death in the general population. Marked by an inadequate supply of blood and oxygen to the myocardium. IL-32 is a proinflammatory cytokine, which enhances inflammation through inducing the secretion of different inflammatory cytokines. The single nucleotide polymorphism (SNP) in the promoter region of IL32 that seems to affect the expression of the isoforms in peripheral blood mononuclear cells, a mutation in the IL32 gene could contribute in different inflammatory diseases like CAD .
A total of 100 blood and serum samples were collected from both sex (48 males and 52 females), whose ages ranged from (40-70) years, attending to, Shaheed Al-Muhrab center for cardiac catheterization and surgery & Imam Al-Sadiq Hospital in Babylon city ,Iraq. during a period extended from October (2024) to January (2025). 100 blood samples were collected in an EDTA tube and gel tube, they divided into 50 samples from CAD patients and 50 samples from healthy individuals as control group. Blood and serum samples obtained from all participants to measure IL32 serum levels were confirmed by using Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) system, and IL32 gene polymorphism was measured using specific allele method by polymerase chain reaction technique.
The results of the current study showed a non-significant (p>0.05) differences concerning age, age groups, and sex. The statistical analysis of economic status found a significant differences within patients and control groups respectively (p=0.0001) and (p=0.0015). About the family history of patients, there was a significant (p=0.0455) result regarding the patients without family history of cardiac disease. In addition, according to body mass index (BMI) categories the percentage of patients and controls were 74% and 86% respectively within the normal group, while 18% and 14% within overweight group and 8% of cases group were obese. Present study revealed that the highest percentage (50%) was found in age group of (61-71) years old concerning the patients with hypertension according to age group. On the other hand, this study found a significant result (p=0.004) in IL-32 serum level in cases group compared with control. Also, there were increased in the C-reactive protein (CRP) (7.202) and erythrocyte sedimentation rate (ESR) (17.06) levels in patients group.
Moreover, regarding the IL32 gene polymorphism ( rs4786370), the genotypes frequency of this study with significant result (p= 0.0455) between patients and control, the odds ratio of 2.2788, and a confidence interval (CI) (1.0165-5.1085). The CC genotypes were elevated in patients (54.0%) group compared with the control (34.0%). Whereas, TT genotypes were increased in control group (38.0%) compared with cases (16.0%). About the analysis of allele frequency there were a significant result (p= 0.0028), with an odds ratio of 2.4113 and a confidence interval (1.3535 to 4.2959). The C allele was higher in patients (69%) compared with the control (48%), while, the T allele increased in the control (52%) compared with the patients group (31%). Current study also showed a significant outcomes concerning the Receiver Operative Characteristic Curve (ROC) analysis of IL-32, the area under curve (AUC) is 0.786, sensitivity is 0.60 and specificity is 0.88, with ( p= 0.000).
The results of this study show an elevation occurred in IL-32 serum level in patients with CAD compared with the healthy individuals. Therefore, this interleukin may be used as a predictive marker for diagnosing of the CAD.As well as, the study has shown that the CC genotype was higher in patients compared to the control, while, TT genotype was higher in the healthy control compared to the patients. Therefore, the CC genotype may be related to the increase of the risk of coronary artery diseases, while, TT genotype may have a protective role in this disease.
