دراسة أمكانية استخدام مستخلص نبــات الشاي الأخضر للوقاية من التأثيرات المرضية لعديد السكريد الشحمي من الزوائف الزنجارية المعزولة محلياً

رسالة ماجستير

اسم الباحث : منار سعد حسين الخفاجي

الكلية : كلية العلوم

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2011

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

 تم في هذه الدراسة استخلاص عديد السكريد الشحمي (Lipopolysaccharide) الخام بطريقة الهضـــــم الأنزيمـــي والفينــــــول الســـاخن من عـــــــزلة محـــــلية من بكتــــــريا Pseudomonas aeruginosa تـــــم الحصـــــول عـــــليها مــــن مريض يعاني من خـــــمج السبيل البـــــولـــي (Urinary tract infection).

        تم تحديد الجرعة المهلكة الكلية LD100 و النصفية LD50 للفئران من المستخلص الخام لعديد السكريد الشحمي وكانتا 175 مايكروغرام⁄0.5  مليلتر و137.5 مايكروغرام⁄0.5  مليلتر لكل فأرة على التوالي ، كما تم فحص المقاطع النسيجية لعضوي الكبد و الطحال للفئران المصابة بالجرعة الممرضة او التحت مميتة و هي  125مايكروغرام⁄0.5  مليلتر ، لوحظت التأثيرات المرضية المتمثلة بالاحتقان ، النزف الدموي و هجرة وارتشاح الخلايا الالتهابية في نسيج الكبد ، أما في الطحال فكان هنالك فرط التنسج في اللب الأبيض و هو ناتج عن الفعل التقسيمي لعديد السكريد الشحمي على خلايا B اللمفاوية . كما أتضح أن هنالك نقصان في العدد الكلي لخلايا الدم البيض WBC للفئران المريضة حيث بلغ العدد X 5.1  103خلية ⁄  ملم3 بعد مرور ثلاثة أيام من الحقن بالجرعة الممرضة من عديد السكريد الشحمي مقارنة بالسيطرة التي بلغت X 6.55   103خلية ⁄  ملم3.

     ولدراسة أمكانية التقليل من هذه التأثيرات المرضية بــــاستخدام الشـــــاي الأخضر Camellia sinensis تم تحضير مستخلص مائي حار ومستخلص كحولي باستخدام الكحول الأثيلي و تجفيفهما وتم تحديد الجرعة الوقائية المثلى للمستخلص المائي الحار لنبات الشاي الأخضر و بتجريع الفئران بتراكيز 5،10 ،15 ،20  ملغم محضرة في  0.5مليلتر⁄ فأرة و بعدها حقنت الفئران بالجرع المهلكة الكلية LD100 ، أما بالنسبة للمستخلص الكحولي فقد تم تحديد الجرعة الوقائية المثلى بعملية الحقن لنفس التراكيز أعلاه و بعدها الحقن بعديد السكريد الشحمي الجرعة المهلكة الكلية LD100 ، من خلال ما تقدم وجد أن الجرع الوقائية المثلى من المستخلص المائي الحار كانت 15 ملغم ⁄  0.5مليلتر/ فأرة و المستخلص الكحولي كانت 10 ملغم ⁄ مليلتر∕ 0.5  فأرة و بنسبة نجاة 100%.

       تم أيضاً اختبار تأثير الجرع الوقائية المثلى من مستخلصات الشاي الأخضر في التقليل من التأثيرات المرضية لعديد السكريد الشحمي في الفئران و وجد أن المستخلص الكحولي و بتركيز10 ملغم ⁄ 0.5 مليلتر⁄  فأرة كان الأفضل  و الأكثر كفاءة من المستخلص المائي الحار و بتركيز 15ملغم ⁄0.5  مليلتر⁄  فأرة ، أتضح ذلك من خلال فحص المقاطع النسيجية لأعضاء الفئران و كذلك أعداد خلايا الدم البيض حيث كانت مشابهة للسيطرة تقريباً .

The study of green tea extract usage possibility for protecting from pathological influences of locally isolated Lipopolysaccharide of Pseudomonas aeruginosa

The extraction of crude lipopolysaccharide was conducted using enzymatic digestion and hot phenol from local isolate of Pseudomonas aeruginosa which was isolated from a patient suffering from Urinary tract infection.

Total leathal dose LD100 and half leathal dose LD50 for mice were determinated  from the crude extracr of lipopolysaccharide which were 175 and 137.5 g ⁄ 0.5ml respectively .Histological test of liver and spleen were examined for mice infected by 125 g/0.5ml.

Pathogenicity influences represented congestion, bleeding, immegration and infilteration of inflammatary cells in liver. While in spleen ,hyperplasia in white pulp were noticed due to mitogenetic effect of lipopolysaccharide on lymphotic B cells. There was a reduction in the total number of  WBC in infected mice was decreased reaching 5.1X103 cell/cm3after 3days from injection with the treatment dose of lipopolysaccharide as compared with the control treatment which gave 6.55X103 cell/cm.

In order to study the possibility and reducing the pathogenicity influences  using  green  tea Camellia sinensis, the extraction of hot water and ethyl alcohol were prepared and the optimum dose 5,10,15and 20mg/0.5ml from hot water extraction were given to the mice already treated with LD100 . The optimum doses were 15 and 10 mg/0.5 ml/mouse for hot water and alcoholic extraction respectively.

 

 

The optimum doses of green tea extraction reduced the pathogenic influences of lipopolysaccharide on the mice. The alcoholic extraction at 10 mg/0.5ml/mouse was better than hot water extraction treatment with 15mg/ml/mouse . This result was obvious from histological test as well as from the number of  WBC which was more or less the same with the control treatment .