اسم الباحث : أزهار موسى جعفر الموسوي
الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة
الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان
سنة نشر البحث : 2006
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
يعد هذا البحث دراسة استكشافية لفعالية مركبات الأيض الثانوي في مستخلصات نبات الصفصاف Salix acmophylla بشكلها الخام في التأثير في نمو الخلايا السرطانية خارج الجسم الحي , إضافة إلى دراسة تأثيرها في الخلايا اللمفاوية البشرية .
وتضمنت الدراسة تحضير مستخلصات جزئين رئيسين من النبات هما القلف والأوراق (Bark and Leaves ) باستعمال نوعين من المذيبات (الماء المقطر والايثانول) , وقد تباينت نسب المذيبات وكانت نسبة المستخلص المائي للاوراق L1 (20%) والمستخلص الايثانولي L2 (16%) , أما المستخلص المائي للقلف B1 فكانت نسبته (6%) في حين كانت نسبة المستخلص الايثانوليB2 (4%) .
تم الكشف عن المركبات الفعالة للمستخلصات عن طريق استعمال الكواشف التمهيدية وكانت النتيجة احتواء النبات على الكلايكوسيدات , التانينات , السابونينات و الفلايفونويدات ولم تظهر مؤشرات لوجود القلويدات والتربين والستيرويد في النبات .
أختبرت فعالية المستخلصات الخام لنبات الصفصاف في الخطوط الخلوية السرطانيـة ( HEP-2 & AMN-3 ) والخلايا الطبيعية (REF) بسبعة تراكيز مختلفة ( 1000, 500,250,125 ,62.5,31.25,15.6 مايكروغرام / مليلتر ) . وضمن ثلاث مدد من التعريض ( 24 ,48 , 72 ) ساعة , و72 ساعة فقط عند الخط الخلوي الطبيعي لجنين الجرذ (REF) .
أظهرت النتائج وجود تأثير تثبيطي معنوي واضح للمستخلصات الخام في نمو الخلايا السرطانية لثلاث مدد من التعريض , ووجد أنَ التأثير التثبيطي للمستخلصات يعتمد على التركيز ومدة التعريض , في حين لم يكن هناك تأثير واضح وذو معنوية لنفس المستخلصات الخام في نمو الخلايا الطبيعية (REF) .
وكان المستخلص المائي أكفأ المستخلصات الخام تأثيراً في الخط الخلوي السرطاني (HEP-2) أما في الخط الخلوي السرطاني (AMN-3) فقد كان مستخلص الايثانول هو الأكفأ ولم تكن هناك فروق معنوية واضحة عند المقارنة بين مستخلصات القلف ومستخلصات الأوراق .
من ناحية أخرى جرى أختبار الفعالية المثبطة للنمو لكل من مستخلصات قلف وأوراق نبات الصفصاف على الخلايا اللمفاوية الطبيعية للتراكيز السبعة نفسها من خلال حساب نسب معامل الانقسام الخيطي ( Mitotic Index ) ومعامل التحـول الارومي Blastotic Index) ) حيث أظهرت المستخلصات B2 , B1 , L2 , L1 تأثيراً لم يصل لدرجة المعنوية في معامل الانقسام الخيطي (MI) ومعامل التحول الارومي (BI) عند التراكيز الواطئة وأظهرت التراكيز العالية فرقاً معنوياً عند المقارنة مع السيطرة .
وأستخدمت التراكيز نفسها لمعرفة إمكانية عمل هذه المستخلصات بوصفها مواد مشطرة أو مواد موقفة للانقسام الخيطي ولم تظهر التجربة أية فروق معنوية في كلتا الحالتين .
Study of the effect of crude extracts from Salix acmophylla on cancer cell lines and Human Normal Lymphocyte in vitro
This project was explorer to study the activity of secondary metabolites in Salix acmophylla crude extracts on the malignant cells growth (in vitro) and study its effect on human lymphocytes .
This study included the preparation of fresh extracts for two main parts of this plant ( Bark and Leaves ) by using two types of solvents , distilled water and absolute ethanol . The results from leaves was 20% for L1 and 16% for L2 and from bark is 6% for B1 and 4% for B2 . The active compounds of the extracts was assessed by using the chemical tests and the result showed that acompound contains Glycosides , Tannins , Saponines and Flavonoides , but there is no Alkaloids , Terpenes and Steroids.
The action of these crude extracts of S. acmophylla was assessed on cancer cell lines ( HEP-2 AND AMN-3 ) and on normal cells of (REF) using seven concentrations ( 1000 , 500 , 250 , 125 , 62.5 , 31.25 , 15.6 µg / ml ) through three examination period ( 24 , 48 , and 72 hrs ) for cancer cell lines and 72 hrs only for normal cell line of rat embryo (REF) with three exposure time.
The result is aclear cytotoxic activity of these crude extracts with high significances in a tow cancer cell lines during the three exposure time , suggesting that the cytotoxic effect of those crude extracts is a dose and time dependent , but in (REF) cell lines , there is no significant effect of those crude extracts reported.
The water extract was found to be the most effective especially on the cell lines ( HEP-2 ) while on (AMN-3) cell lines the ethanol extract was more effective. It was non- significant differences were defected when comparing the action of the leaves and the bark on these cell lines .
On the other hand the inhibition action of these Salix extracts were examined on normal lymphocyte using the same seven concentration by counting the percentage of mitotic index and blastotic index in which L1,L2,B1,B2 show non significant effect on MI and BI in low concentration ,but show significant effect on high concentration comparing with the control group.
Two experiments were conducted also to know if these extract have a mitogine , or have anti-mitogenic effects , thes extracts have no significant effect in both cases .