دراسة طبية حيوية لمتلازمة التناظر الكلوي مع تحسين المضاد الحيوي النانوي الهجين ضد المقاومة البكتيرية

2022-11-23

رسالة ماجستير

اسم الباحث : فاطمة عبد الحسن علي

اسم المشرف : أ.م.د. علاء عبد الحسين كريم

الكلمات المفتاحية : Pediatric Nephrotic Syndrome, Nano hybrid Antibiotic, Bacterial Resistance, Ceftriaxone resistance genes

الكلية : كلية العلوم الطبية التطبيقية

الاختصاص : التحليلات المرضية

سنة نشر البحث : 2022

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

المشاهدات: 82

الخلاصة

هدفت هذه الدراسة إلى استخدام طريقة النانو لتحسين استخدام المضادات الحيوية في معالجة ضمج الدم (التهاب الدم ) لدى الأطفال المصابين بالمتلازمة الكلوية (التناذر الكلوي)، وتحديد تجرثم الدم في هذه المجموعة من الأطفال ، ودراسة البكتيريا المعزولة لنمط الحساسية بالطريقة المظهرية وكذلك الكشف عن الجينات المقاومة للمضادات الحيوية وكذلك الكشف عن العلاقة بين بعض العوامل البيولوجية والمناعية لدى مرضى التناذر الكلوي من الأطفال مع اختلاف الأعمار.

اجرى البحث في الفترة ما بين تشرين الاول 2021 ومايو 2022 في مستشفى الاطفال التعليمي بمركز امراض الكلى / مديرية صحة كربلاء. تم جمع عينات من الدم الوريدي بحجم خمسة مليلتر من 116 طفل مصاب بالمتلازمة الكلوية و 42 طفل أصحاء. اجريت العديد من الاختبارات المهمة مثل زراعة عينات الدم ، اختبارات العوامل البيوكيميائية ؛ فيتامين د 3 ، تحليل الدهون الكامل (TC ، LDL ، HDL و TG) ، اختبارات وظائف الكبد (الألبومين ، T. bilirubin ، D. البيليروبين ، TP ، ALT ، AST ، ALP ، GGT ، LDH) ، العوامل المناعية (WBC ، CRP ، IgG ) ، العوامل الدموية CBC ، العوامل الفسيولوجية (الجلوكوز ، ABO) ، المعلومات العامة (العمر ، الوزن ، الجنس) ، والفحص الميكروبي (تحديد البكتيريا واختبار الحساسية للمضادات الحيوية).

تم تحضير Zno- ceftriaxone النانوي هجين (المضاد المقترن مع Zno بطريقة هلام السليكا) ، nanohybrid LDH-ceftriaxone (المضاد المقترن مع طبقات Mg-AL-No3) ، تم اختباره بعد ذلك بواسطة تحليل FTIR ، SEM ، XRD ، AFM. كما تم فحص تأثير هذه الأدوية النانوية على البكتيريا المعزولة ، كما تم تحديد الجينات المقاومة للسيفترياكسون.

كانت النتائج للمعايير المقاسة في الأطفال المصابين بالتناذر الكلوي مقارنة بالأطفال الاصحاء كالتالي: وجد زيادة في مستوى الفيتامين د ،و زيادة في مستويات ال (الكوليسترول الكلي ، البروتينات الدهنية منخفضة الكثافة ، البروتينات الدهنية عالية الكثافة ،والدهون الثلاثية ).بينما وجد هناك نقصان كان في مستويات الألبومين ، والبروتين الكلي في مصل الدم، أيضا زيادة في مستويات البيليروبين الكلي و المباشر.

كان هناك نقصان في مستويات انزيمات الكبد :ِALT ،AST ،وALP )، ايضا وجد زيادة في مستويات الGGT و LDH ، بالإضافة الى زيادة مستويات كريات الدم البيض وال CRP ،بينما وجد هناك نقصان في مستوى الاجسام المضادة G.

وجد هناك ارتباط معنوي بين بعض العوامل لدى الأطفال الذين يعانون من التناذر الكلوي مثل بين ال CRP وكريات الدم البيض WBC (0.509) ، وكذلك بين CRP و الالبومين Albumin (0.515) ، وكذلك WBC مع كل من Gran و Mid (0.856،0.727) على التوالي ، وكلها كانت ارتباط موجب كما وجدت علاقة ايجابية بين كل من: البيليروبين المباشر وال ALP بمقدار (0.566)، GGT وال LDH (0.640) ،الكوليسترول الكلي والبروتينات الدهنية منخفضة الكثافة بمقدار (0.808) وارتباط بين الدهون الثلاثية مع كلا من الكوليسترول والبروتينات الدهنية منخفضة الكثافة بمقدار (0.526,0.539) على التوالي.

في الأطفال المصابين بالمتلازمة الكلوية كانت فصيلة الدم B أكثر من الأصحاء. و كانت البكتيريا المعزولة عبارة عن Acinetobacter bumanii و Staphylococcus warnerii و Bacillus cerus كما وجد لكل منهم لديه جينات المقاومة لانزيم ال β-lactamase. لم يكن سيفترياكسون النانوي المحضر مع Zno فعالاً ، بينما كان سيفترياكسون النانوي الهجين مع طبقات Mg-Al-No3 فعالاً ضد البكتريا المعزولة ونجح اقترانه.

استنتجت الدراسة أن اكثر عدوى الدم في الاطفال المصابين بالتناذر الكلوي تأتي من بكتيريا ضمج المستشفيات. ان تقنية النانو بطريقة Zno soll gell لسيفترياكسون لم تنجح ولم تكن فعالة على البكتيريا. بينما كان ترسيب سيفترياكسون مع Mg-Al-No3 فعالًا وناجحًا حيث احتوت هذه الانواع البكتيرية المعزولة على جينات بيتا لاكتاماز.

Biomedical Study of Idiopathic Nephrotic Syndrome with Improvement of Nano hybrid Antibiotic against Bacterial Resistance

Summary
This study aims to training and utilization of nano method by two ways to improve the antibiotic use in treatment of blood infections in children who have nephrotic syndrome, determine bacteremia in this group of children and study bacterial isolate to susceptibility pattern by phenotypic method as well as detect isolated bacteria resistance genes to antibiotics .Also detect relationship between some biological and immunological parameters in pediatric nephrotic syndrome with different ages .
The study was done between October 2021 to May 2022 , At the Pediatric teaching hospital Center for Nephrology /Karbala Health Directorate. A five -milliliter sample of venous blood was collected from 116 Nephrotic syndrome children patient and 42 healthy children. There are significant blood culturing procedures , and several analyses have been performed as a result including biochemical parameters ; Vitamin D3, Lipid profiles (TC, LDL, HDL and TG),Liver function tests (Albumin, T. bilirubin , D. bilirubin ,TP, ALT, AST, ALP, GGT, LDH),Immunological parameters (WBC, CRP, IgG),Hematological parameters CBC ,Physiological parameters (Glucose, ABO),General Parameters (Age, Weight ,Gender) , and Microbial examination (Bacterial Identification and Antibiotic Susceptibility Test ).
Preparation of nanohybrid Zno- ceftriaxone ( drug conjugate with Zno by soll gel method ) ,nanohybrid LDH-ceftriaxone (drug conjugate with layers of Mg-AL-No3 ) , were tested then by FTIR ,SEM,XRD,AFM analysis . The effect of these nano drugs was examined in isolated bacteria .The resistant genes for ceftriaxone were also identified.
The results of parameters examined for nephrotic children patients compared with healthy children showed : decreased Vit D3 levels , increased (S. Cholesterol , LDL, HDL, and TG )levels , decreased Albumin and Total serum protein levels, also increased T. bilirubin and D. bilirubin levels ,increased (ALT, AST, ALP) levels ,increased GGT and LDH levels , increased WBC and CRP levels and decreased IgG levels . In children with Nephrotic syndrome there were some correlation between some parameters such as CRP and WBC (0.509) , also CRP and Albumin(0.515) ,as well as WBC with both Gran and Mid (0.856,0.727) respectively ,which all of them was positive correlation. In addition there were positive correlation between ; ALP and D. bilirubin (0.566) ,GGT and LDH (0.640), T.C and LDL (0.808) ,and TG with both LDL and T.C (0.526,0.539) respectively.
In children with nephrotic syndrome , B blood group was more than in healthy. Bacteria isolated was Acinetobacter bumanii complex , Staphylococcus warnerii , and Bacillus cerus . All of them had resistance genes for β-lactamase drug.
The nanohybrid ceftriaxone prepared with Zno was not effective .while nano hybrid ceftriaxone with layers of Mg-Al-No3 was effective and its conjugation was successful .
The study concluded that more blood infection in pediatric Nephrotic syndrome came from bacteria of nosocomial infections. The nano method of Zno soll gell method for ceftriaxone was not successful and not effective on bacteria. Precipitation ceftriaxone with Mg-Al-No3 was effective and successful. These isolated Bacteria had β-lactamase genes.