التحري عن تلوث عينات حليب الابقار الخام ببكتريا الاشريشيا القولونية في ارياف محافظة كربلاء المقدسة

رسالة ماجستير

اسم الباحث : ندى جاسم محمد الكروي

اسم المشرف : أ.م.د هيام عبد الرضا كريم العواد

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علوم الحياة

سنة نشر البحث : 2019

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

الخلاصة:

جاءت هذه الدراسة لغرض الكشف عن وجود بكتيريا الاشريشيا القولونية في عينات حليب الابقار الخام ودراسة مدى استجابة ومقاومة العزلات المدروسة للمضادات الحياتية والتحري عن تواجد جينات السموم المعوية ST و LT في العينات المعزولة باستعمال تقنية انزيم البلمرة المتسلسل .
جُمعت 125 عينة من حليب الابقار الخام من اربع مناطق ريفية مختلفة في محافظة كربلاء المقدسة ، والتي شملت منطقة الزبيلية , و الحسينية , والهندية , وناحية الحر ، امتدت الدراسة من 15كانون الاول 2018 ولغاية 30اذار 2019 ، وقد تم الحصول على 51 عزلة من بكتريا الاشريشيا القولونية 40.8 % , وسجل أكبر عدد من العينات الملوثة بالإشريشيا القولونية في منطقة الزبيلية بنسبة 16.8% , تليها منطقة الحسينية بنسبة 12.8% , اما منطقة الهندية فكانت نسبة التلوث بالاشريشيا القولونية 6.4 % , وقد سجل اقل عدد من العينات الملوثة تم الكشف عنها في منطقة الحر بنسبة 4.8 % .
اظهرت الدراسة ان اعلى نسبة تلوث تم عزلها من حليب الابقار الخام كانت في شهر كانون الثاني بنسبة 35.29% , يليها شهر كانون الاول وبنسبة 25.49 % , اما شهر شباط فكانت نسبة التلوث ببكتريا الاشريشيا القولونية المعزولة من الحليب 21.56% , وسجلت اقل نسبة تلوث للحليب الخام ببكتريا الاشريشيا القولونية في شهر اذار 17.64 % , اذ لاحظنا عدم وجود فروق معنوية عند مستوى احتمالية P≥0.05 .
اختبرت حساسية جميع عزلات الاشريشيا القولونية تجاه 16 نوعاً من المضادات الحياتية وباستخدام جهاز Vitek-2 Compact System , اظهرت العزلات البكتيرية حساسيتها للمضادات Imepenem و Meropenem و Colistin بنسبة 100% كما اظهرت العزلات البكتيرية حساسيتها للمضاد الحياتي (94.1%)Ciprofloxacin و Piperacillin/Tazobactam (%88.2) و (82.3%)Piperacillin و Trimethoprim/Sulfamethoxazol (%80.3) و Pefloxacin (%78.4) و Gentamicin (% 76.4) و (Cefepime (% 76.4 و Minocycline(74.5%) و Amikacin (%72.5) كما اظهرت البكتريا مقاومتها لبعض المضادات الحياتية اذ كانت اعلى نسبة مقاومة هي للمضاد الحياتي Ticarcillin وبنسبة 92.1 % , يليه المضاد الحياتي Ticarcillin Clavulanic acid وبنسبة 90.1% , كما اظهرت العزلات مقاومتها للمضادين الحياتيين Aztreonam و Topramycin وبنسبة 25.4% لكل منهما .
واخيرا تم التحري عن ظهور جينات السموم المعوية LT,ST باستخدام تقنية تفاعل انزيم البلمرة المتسلسل والكشف عن حجم الجين بواسطة الترحيل الكهربائي و باستعمال مصدر الاشعة فوق البنفسجية للعزلات البكتيرية البالغ عددها 51 , اذ كان عدد العزلات الحاملة للجين ST بحجم bp 121 هي 7 عزلات وبنسبة 13.7% وعدد العزلات الحاملة للجين LT بحجم bp 360 هي 2 عزلات وبنسبة 3.9 % .
من ذلك نستنتج وجود سلالات ضارية لل E.coli ETEC) ) في الحليب الخام للأبقار في ارياف محافظة كربلاء المقدسة والتي تشكل خطرا كبيرا على الصحة العامة.

Rp_ Detection of contaminated raw cow’s milk with Escherichia coli in Holy Kerbala Province pdf


Abstract: This study was designed to detect the presence of bacteria Escherichia coli in samples of raw cow’s milk and examine the response and resistance to antibiotics , and investigation of the presence of intestinal genes ST and LT in isolated samples using polymerase chain reaction. 125 samples of raw cow’s milk where collected from four different rural areas in the holy Kerbala governorate, which included Al- Hussainiya , Al- Zebeliya , Al- Hindiya and Al – Hurr during the period from 15 December 2018 to 30 March 2019 . E.coli was detected in 51(% 40.8) of samples . the highest number of samples contaminated with E.coli in Al- Zebeliya %16.8 , followed by Al- Hussainiya %12.8 , Al- Hindiya region were contaminated with E.coli % 6.8 , the lowest number of samples contaminated disclosed in Al – Hurr % 4.8.
The study revealed that the highest pollution isolates of raw cow’s milk were in the month of January by %35.29 , followed by the month of December % 25.49 , In February, the proportion of pollution due to E.coli isolated from milk% 21.56 , the smallest proportion of contamination raw cow’s milk in March %17.64.
Study showed that E.coli isolated from raw cow’s milk were resistant to Ticarcillin (%92.1) followed by Ticarcillin Clavulanicacid (%90.1) ,Topramycin (%25.4 ) , Aztreonam (%25.4 ) and sensitive to Meropenem (%100 ) , Imepenem (%100 ) and Colistin (%100), It also sensitive to Ciprofloxacin (%94.1 ) followed by Pipracillin / Tazobactam ( %88.2 ) Pipracillin (%82.3) , Trimethoprim / Sulfamethoxazole (%80.3) , Pefloxacin (%78.4) , Cefepime (%76.4) , Gentamicin (76.4%) , Minocycline (%74.5 ) and Amicacin (%72.5).
Finally, it was investigating the emergence of genes ST and LT by Using a Polymerase chain reaction (PCR) and disclose the size of the gene by Polymerase chain reaction (PCR) and using a source of ultraviolet light for bacterial isolate, The virulence profile of genes revealed that 2/51 (%3.9) isolates of E. coli harbored LT genes and 7/51 (%13.7) isolates of E. coli harbored ST genes .