University of Kerbala
اسم الباحث : هبة علوان عبد السلام السلامي
الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة
الاختصاص : علوم الحياة/علم الحيوان
سنة نشر البحث : 2011
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
الخلاصة
تهدف هذه الدراسة معرفة الدور الوقائي لزيت بذور العنب الاسود Vitis vinifera ضد التلف الحاصل في الكبد ، الخصى والغدة الدرقية والمستحث بفرط الحديد في ذكور الارانب .
هـدفت التجربة الاولى الى إستخلاص الزيت من بذور العنب كيميائيا اذ تم استخدام الهكسان كمذيب عضوي وجرت عملية الاستخلاص باستخدام جهاز السكسليت Sexhlet apparatus ، تضمنت التجربة الثانية تحديد الجرعة المؤثرة (ED50) لزيت بذور العنب من خلال دراسة منحني الجرعة المؤثرة فقد تم استخدام (25) من ذكور الأرانب البالغة والتي قسمت عشوائيا الى خمس مجاميع متساوية ( خمسة حيوانات/ مجموعة) وجرعت فمويا اربع جرع متزايدة من زيت بذور العنب يوميا (0.25 ،0.50 ، 0.75 ، 1 مل/كغم / و.ج) ولمدة اربعة اسابيع ، جمعت عينات الدم في فترة ماقبل المعاملة وبعد نهاية التجربة لدراسة المعايير التالية : تركيز المالونالديهايد MDA ، تركيز الكلوتاثيون المختزل GSH ، تركيز الكوليسترول الكلي TC ، وتركيز الشحوم البروتينية عالية الكثافة HDL وكانت الجرعة المؤثرة لزيت بذور العنب تساوي ( 0.5 مل /كغم / و.ج) .
هـدفت التجربة الثالثة دراسة الدور الوقائي لزيت بذور العنب على التاثير الضار في وظائف الكبد ،الخصى والغدة الدرقية والمستحث من فرط الحديد ، فقد تم استخدام (25) من ذكور الأرانب البالغة والتي قسمت عشوائيا الى خمسة مجاميع متساوية (خمسة حيوانات / مجموعة) ، حقنت المجموعة الاولى G1)) 20 مل/ كغم من المحلول الفسيولوجي وعدت كمجموعة سيطرة ،وحقنت المجموعة الثانية (G2) 20 ملغم /كغم من مادة دكستران الحديد بواقع جرعة واحدة في الاسبوع الاول ، جرعتان في الاسبوع الثاني ، ثلاث جرع في الاسبوع الثالث واربعة جرع في الاسبوع الرابع ، اما المجموعة الثالثة (G3) فقد حقنت ب 20 ملغم /كغم من دكستران الحديد و جرعت فمويا ويوميا بالجرعة المؤثرة ED50 لزيت بذور العنب والبالغة 0.5 مل/كغم ، في حين حقنت حيوانات المجموعة الرابعة (G4) 20 ملغم / كغم من دكستران الحديد مع حقن تحت الجلد( SC) 10 ملغم / كغم من مادة الديسفروكسامين بواقع جرعة واحدة في الاسبوع الاول ، جرعتان في الاسبوع الثاني ، ثلاث جرع في الاسبوع الثالث واربعة جرع في الاسبوع الرابع لكل مادة . اما المجموعة الخامسة (G5) فقد حقنت 20 ملغم / كغم من دكستران الحديد مع حقن تحت الجلد ( SC) 10 ملغم / كغم من مادة الديسفروكسامين وجرعت يوميا بالجرعة المؤثرة لزيت بذور العنب (0.5 مل / كغم) .
جمعت عينات الدم بعد تجويع الحيوانات Fasting blood sample في فترة ماقبل المعاملة وبعد نهاية كل اسبوعين حتى نهاية التجربة لدراسة المعاييرالتالي : ، حجم مكداس الدم PCV ، تركيز الهيموكلوبين Hb ،اعداد كريات الدم الحمرRBC ، معدل حجم كرية الدم الحمراءMCV ،معدل محتوى هيموكلوبين كرية الدم الحمراءMCH ومعدل تركيز هيموكلوبين كرية الدم الحمراء MCHC ،اعداد كريات الدم البيض WBC ، وقياس تركيز الكوليسترول الكلي TC وتركيز الدهون الثلاثية TAG، تركيز الشحوم البروتينية عالية الكثافة HDL والشحوم البروتينية واطئة الكثافة LDL والشحوم البروتينية واطئة الكثافة جداVLDL وقياس تركيز الحديد Iron ونواقله (Ferritin و Transferrin) والسعة الكلية لارتباط الحديد TIBC اضافة الى قياس بعض الهرمونات المغذية للقند (الهرمون المحفز للجريبات FSH و الهرمون اللوتيني LH) اضافة الى قياس تركيز هرمون الشحمون الخصوي Testosterone وقياس تركيز الهرمون المحفز للدرقية TSH اضافة الى قياس تركيز هرمونات الغدة الدرقية (هرمون الثايرونين ثلاثي اليود T3 وهرمون الثيروكسين T4) .
اظهرت نتائج هذه التجربة ان الحقن العضلي لدكستران الحديد أدى الى حدوث انخفاض معنوي (P<0.05) في تركيز PCV ،Hb ،RBC ، MCV ، MCH ،MCHC ، HDLوتركيز الهرمونات FSH ،LH ، Testosteron T3 و T4 وفي السعة الكلية لارتباط الحديدTIBC ، وحدوث ارتفاع معنوي (P<0.05) في مستوى WBC ، TC ،LDL وتركيز هرمون TSH وتركيز الحديد Iron ونواقلة ( Ferritin و Transferrin ) ، في حين لم يلاحظ وجود فروق معنوية في تركيز VLDL و TAG مقارنة مع مجموعة السيطرة .
فيما اظهرت المجموعة المعاملة بالجرعة المؤثرة لزيت بذور العنب والمعرضة لفرط الحديد باستخدام مادة دكستران الحديد ان التجريع الفموي لزيت بذور العنب ادى الى حدوث ارتفاع معنوي (P<0.05) في تركيز الحديد Iron ونواقلة (Ferritin , Transferrin ) وانخفاض معنوي (P<0.05) في السعة الكلية لارتباط الحديد TIBC وهرمون Testosteron ولم يلاحظ وجود فروق معنوية في مستويات Hb ، PCV ،RBC ، MCV ، MCH ،MCHC ،TC ، HDL، LDL ، VLDL ، FSH ، TSH ، LH،T3 و T4.
اما المجموعة التي تعرضت للحقن بمادة الديسفروكسامين فقد سجلت ارتفاعاً معنوياً ( P<0.05) في اعداد كريات الدم البيضاء WBC ،LDL ، تركيز الحديد Iron وناقلة Ferritin و TSH وانخفاض معنوي في مستوى PCV، Hb ، HDL، السعة الكلية لارتباط الحديد TIBC وتركيز الهرمونات FSH ،LH ، Testosteron ، T3 و T4 ، وفي السعة الكلية لارتباط الحديد في حين لم تسجل فروق معنوية في اعداد كريات الدم الحمراء RBC ومستويات MCV ،MCH ، MCHC ، TC ،TAG وVLDL . كما تبين التجربة ان التجريع الفموي لزيت بذور العنب مع الحقن بمادة الديسفيروكسامين تسبب في عودة المعايير السابقة الى تراكيزها الطبيعية والمتمثلة بارتفاع معنوي (P<0.05) في مستوى PCV، Hb، RBC ، FSH ، LH ، Testosteron و T3 وانخفاض معنوي ( P<0.05) في تركيز LDL وFerritin وعدم وجود فروق معنوية في مستوى ، MCV ، MCH ، MCHC ، WBC ، TC، TAG HDL ،VLDL ، Iron ، TIBC ،Transferrin ، TSH و T4 .
اظهرت نتائج الفحص النسيجي ترسب الحديد بشكل هيموسدرين Hemosiderin في الكبد وحدوث تلف في النبيبات المنوية للخصى ونقصان ملحوظ في مستوى الغروان للغدة الدرقية بعد الحقن العضلي لدكستران الحديد Iron dextran ، اما بالنسبة للمجموعة التي حقنت بدكستران الحديد وجرعت فمويا بالجرعة المؤثرة ED50 لزيت بذور العنب فقد لوحظ انعدام ترسب الهيموسدرين في الكبد ، والمظهر الطبيعي للنبيبات المنوية في الخصى ولم يلاحظ وجود تغيرات في نسيج الغدة الدرقية مقارنة مع مجموعة السيطرة
يستنتج من الدراسة الحالية الدور الوقائي لزيت بذور العنب الاسود Vitis vinifera ضد التاثير الضار لفرط الحديد في الكبد والخصى والغدة الدرقية وتؤكد افضليته على مادة الديسفروكسامين .
PROTECTIVE ROLE OF GRAPE SEEDS OIL (Vitis vinifera) ON SOME PHYSIOLOGICAL AND HORMONAL CHANGES INDUCED BY IRON OVERLOAD IN MALE RABBITS
This study was carried out to investigate the protective role of black grape seeds oil Vitis vinifera on hepatic , testes and thyroid damage induced by iron overload in male rabbits .
The Experiment 1 was aimed to chemicaly extracting of the oil from black grape seeds by using hexan as an organic solvent employing sexhlet apparatus .The effective dose (ED50) of black grape seeds oil was determined in second experiment by studying the dose response curve. Twenty five adult male rabbits were divided randomly into five equal groups (5/ group ) and were intubated orally for four weeks with four successive increasing daily doses of black grape seeds oil (0.25, 0.50, 0.75 and 1 ml/ kg /B.W) . Fasting blood samples were collected at pretreated period and after the end of experiment to study the following parameters : a serum Malondialdehyde (MDA), reduced glutathione (GSH), total cholesterol (TC), and High density lipoprotein (HDL) . The ED50 of black grape seeds oil was found to be equal to 0.5 ml/kg /B.W .
The third experiment was aimed to study the protective role of black grape seeds oil aganist the deleterious effect of iron overload on Liver , testes and thyroid functions . Twenty five adult male rabbits were divided into five groups (5/group) , the first group was injected with 20 ml/kg normal saline and served as control group (G1) . Rabbits in the second group were injected with 20 ml/kg iron dextran with one dose in the first week , two in the second week , three in the third week and four doses in the fourth week (G2). Rabbits in the third group (G3) were inject with 20 mg/kg iron dextran and intubated orally and daily with ED50 of black grape seeds oil which equal to 0.5 l/kg , while the rabbits in the fourth group (G4) were injected 20 mg/kg iron dextran coupled with SC injection 10 mg/kg desferrioxamine at one dose in the first week , two in the second week , three in the third week and four dose in the fourth week for each one . Rabbits of the last group(G5) were injected 20 mg/kg iron dextran, 10 mg/kg desferrioxamine and 0.5 ml/kg black seeds oil.
Fasting blood samples were collected from fasted rabbits at pretreated period , after two weeks and at the end of experiment to study the following parameters : PCV, Hb, RBC, MCV, MCH, MCHC, WBC; the concentration of lipid profile(TC, TAG, HDL, LDL and VLDL) ;the concentration of Free iron, TIBC, Ferritin, Transferrin; ; the concentration of some of gonadal hormones (FSH, LH and Testosterone) and the concentration of thyroid hormones (TSH ,T3 and T4).
The results revealed intramuscular injection of iron dextran caused significant decrease (p<0.05) in concentration of : PCV, Hb, RBC , MCV, MCH , MCHC , TIBC, FSH , LH ,testosterone T3 and T4 ; and significant increase (p<0.05) in concentration of : WBC, TC, LDL, Free iron , Ferritin, Transferrin and TSH, However no significant difference was observed in TAG and VLDL comparative with control group.
The group that treated with ED50 of black grape seeds oil and exposed to iron overload by iron dextran revealed significant increase (p<0.05) in iron and its transporter (ferritin and transferrin) and significant decrease (p<0.05) in TIBC and Testosterone , while no significant difference was observed in PCV, Hb, RBC, MCV, MCH, MCHC, TC, TAG, HDL, LDL, VLDL, FSH ,LH ,TSH ,T3 and T4 .
The group that was exposed to injection with desferrioxamine revealed significant increase (p<0.05) in concentrations of WBC , LDL, free iron, ferritin, transferrin and TSH ; and significant decrease (p<0.05) in PCV, Hb, RBC, HDL, TIBC, FSH, LH, Testosterone T3 and T4 , while no significant difference was observed in MCV, MCH, MCHC, TC, TAG and VLDL. The results also have showed that oral gavages of grape seeds oil with injection of desferrioxamine caused significant correction of the previous parameters manifested by significant elevation (p<0.05) in concentrations of : PCV, Hb, RBC, , FSH, LH, testosterone and T3 ; and significant decrease (p<0.05) in serum LDL and ferritin while no significant difference was observed in concentrations of : MCV, MCH, MCHC, WBC, TC, TAG, HDL, VLDL, free iron, TIBC, transferrin, TSH and T4.
Histological results from rabbits treated with iron overload have showed deposits of iron as hemosiderin in liver , damage of seminiferous tubules of testes and significant decrease of colloid in thyroid follicles, while the results showed absent deposits of Hemosiderin in the liver as well as normal feature of seminiferous tubules of testes and no significant difference was observed in thyroid tissue after oral gavages of ED50 grape seeds oil comparative with control group.
In conclusion , results of this study confirm the protective role of black grape seeds oil against deleterious effect of iron overload in liver , testes and thyroid gland , and documented the prevalence of black grape seeds oil up on desferrioxamine
