الدور الوقائي لمادة الكركمين Curcumin على التلف الوظيفي والنسجي للنسيج العصبي الناتج من مادة غلوتامات الصوديوم الاحادية في ذكور الارانب

اطروحة دكتوراه

اسم الباحث : هبة علوان عبد السلام السلامي

اسم المشرف : الأستاذ الدكتورة وفاق جبوري محمد البازي : الأستاذ الدكتورة مي فاضل ماجد الحبيب

الكلمات المفتاحية :

الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة

الاختصاص : علم الحيوان / فسلجه حيوان

سنة نشر البحث : 2016

تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث

تهدف هذه الدراسة معرفة الدور الوقائي لمادة الكركمين Curcumine ضد التلف الحاصل في الجهاز العصبي والمستحث بمادة غلوتامات الصوديوم الاحادية (MSG) في ذكور الارانب .
هـدفت التجربة الاولى الى استخلاص وتنقية مادة الكركمين من رايزومات نبات الكركم وجرت عملية الاستخلاص باستخدام جهاز السكسليت Sexhlet apparatus وتم التحليل الكمي للكركمين باستخدام جهاز HPLC ، تضمنت التجربة الثانية تحديد الجرعة المؤثرة النصفية (ED50) لمادة الكركمين من خلال دراسة منحني الجرعة المؤثرة فقد تم استخدام 90 من ذكور الأرانب البالغة تراوحت اعمارها بين 8-9 أشهر واوزانها مابين 1500- 2000 غرام والتي قسمت عشوائيا الى ستة مجاميع متساوية ( 15 حيوان / مجموعة) وجرعت فمويا خمس جرع متزايدة من مادة الكركمين يوميا (0،20 ،40 ، 60، 80 و 100 ملغم/كغم) ولمدة اربعة اسابيع ، جمعت عينات الدم بعد نهاية كل اسبوع لدراسة المعايير التالية : تركيز المالونالديهايد ((MDA، الكلوتاثيون المختزل ((GSH ، الكولسترول الكلي ((TC وتركيزالشحوم البروتينية عالية الكثافة (HDL) وكانت الجرعة المؤثرة النصفية للكركمين تساوي ( 60 ملغم /كغم / و.ج) .
هـدفت التجربة الثالثة دراسة الدور الوقائي لمادة الكركمين على التأثير الضار في النسيج العصبي والمستحث باستخدام غلوتامات الصوديوم الاحادية ، فقد تم استخدام 60 من ذكور الأرانب البالغة والتي قسمت عشوائيا الى اربعة مجاميع متساوية (15 حيوان / مجموعة) ، جرعت المجموعة الاولى(G1) 1مل/ كغم من زيت الذرة وعدت كمجموعة سيطرة ،وجرعت المجموعة الثانية 3 (G2) ملغم /كغم من MSG لمدة ثلاثة اشهر يوميا ، جرعت المجموعة الثالثة (G3) ب 60 ملغم /كغم ، في حين جرعت حيوانات المجموعة الرابعة G4)) 3 ملغم /كغم من MSG و 60 ملغم /كغم من الكركمين ولمدة ثلاثة اشهر يوميا .
جمعت عينات الدم بعد تجويع الحيوانات Fasting blood sample في فترة ماقبل المعاملة ، بعد منتصف التجربة و حتى نهاية التجربة لدراسة المعايير التالية : تركيز انزيم الاستيل كولين استريزالذائب(G1) AChE ، الاستيل كولين استريز المرتبط بالغشاء AChE(G4) ، تركيز انزيم (Nmit ATPase) Neuronal Mitochondrial ATPase ، المالونالديهايد (MDA) ، الكلوتاثيون المختزل ((GSH ،البيروكسي نايتريت( (ONOO_ ، تركيز البروتين الكلي Total protein (TP) في المصل السائل المخي الشوكي ، تركيز الكلوكوز Glucose (GLU) في المصل والسائل المخي الشوكي ، تركيز ايون الكالسيوم Ca+ و ايون الحديد Fe+ اضافة الى قياس تركيز نسبة هرموني الكرلين والاوبستاتين ghrelin/obestatin ratio و هرمون الكورتكوستيرون .
اظهرت نتائج هذه التجربة ان التجريع الفموي ب MSG أدى الى حدوث انخفاض معنوي (P<0.01) في معدل تركيزانزيم AchE(G4) ، Nmit ATPase ، GSH ، TP في المصل والسائل المخي الشوكي، ghrelin/obestatin ratio ، وارتفاع معنوي (P<0.01) في معدل تركيزانزيم AchE (G1) ، MDA ، ــONOO ، GLU في المصل والسائل المخي الشوكي ، Ca+ و Fe+ و تركيز هرمون الكورتيكوستيرون مقارنة مع مجموعة السيطرة .
فيما اظهرت المجموعة المعاملة ب ED50 للكركمين حدوث ارتفاع معنوي (P<0.01) في تركيز انزيم Nmit ATPase ، GSH ، TP في المصل والسائل المخي الشوكي ،GLU في المصل والسائل المخي الشوكي وانخفاض معنوي(P<0.01) في تركيز انزيم (G4) AchE ، انزيم(G1) AchE ، MDA ، ــONOO ، Ca+ و Fe+ ، تركيز هرمون الكورتكوستيرون وعدم وجود فروق معنوية في معدل تركيزGLU في المصل والسائل المخي الشوكي ، ghrelin/obestatin ratio مقارنة مع مجموعة السيطرة .
كما تبين التجربة ان التجريع الفموي ب MSG مع التجريع الفموي بال ED50 من الكركمين ادى الى ارتفاع معنوي (P<0.01) في معدل تركيزانزيم AchE (G4) ، وانخفاض معنوي (P<0.01) في معدل في معدل تركيزانزيم AchE(G1) ، TP في المصل والسائل المخي الشوكي، Ca+ ، ghrelin/obestatin ratio وعدم وجود فروق معنوية في تركيز انزيم Nmit ATPase ، GSH ، MDA ، ــONOO ، Fe+ وتركيز هرمون الكورتكوستيرون .
اظهرت نتائج الفحص النسجي ان التجريع الفموي ب MSG ولمدة ثلاثة اشهر ادى الى حدوث تغيرات تنكسيه واضحة في النسيج العصبي بعد المعاملة بصبغة H&E ، في حين يظهر من معاملة النسيج العصبي بصبغة السلفر Silver stain ظهور واضح للويحات البيتا املويد Aβ منتشرة في نسيج المخ و المخيخ والحبل الشوكي ، كما يلاحظ التركيب الطبيعي للنسيج العصبي بصبغتي H&E بالنسبة للمجموعة التي جرعت فمويا ب MSG مع التجريع الفموي بالكركمين وانعدام ترسب البيتا املويد Aβ في النسيج العصبي بعد التصبيغ بصبغة السلفر مقارنة مع مجموعة السيطرة.
يستنتج من الدراسة الحالية ان مادة غلوتامات الصوديوم الاحادية ( MSG)تسبب تغيرات مرضية واضحة للنسيج العصبي وتؤكد ان المعاملة بالجرعة المؤثرة النصفية لمادة الكركمين Curcumin (60 ملغم /كغم) لها دور الوقائي ضد التلف الحاصل في النسيج العصبي المستحث بمادة MSG لذكور الارانب المحلية .

Rp. Protective Role Of Curcumin On Physiological And Histological Damage Of Nervous Tissue Resulting From Monosodium Glutamate In Male Rabbits pdf.

Summary
This study aims to know the protective role of Curcumin against damage happening in the nervous system and induced by monounsaturated sodium glutamate (MSG) in male rabbits.
The Experiment 1 was aimed to extract and purify the curcumin from Raizumat plant turmeric employing Alsxlat Sexhlet apparatus ,the quantitative analysis of curcumin done by using the HPLC, The effective dose (ED50) of curcumin was determined in the second experiment by studying the dose response curve . ninety of the adult male rabbits, which were randomly divided into six equal groups (15 / group) and were intubated orally for four weeks with four successive increasing daily doses of curcumin (0,20,40, 60, 80 and 100 mg/kg/BW) . Fasting blood samples were collected in the end of each weak to study the following parameters : a serum Manoldehyde (MDA), Reduced glutathione(GSH) ,Total cholestrol (TC) and High density lipoprotein ( HDL )concentration . The ED50 of curcumin was found to be equal to to 60 mg / kg / bw .
The third experiment was aimed to study the protective role of curcumin aganist the deleterious effect of monosodium glutamate, sixty of adult male rabbits were randomly divided into four equal groups (15 animals / group), the first group (G1) intubated with 1 ml / kg of corn oil and served as a control group (G1) . Rabbits in the second group were intubated orally and daily with 3mg /kg of MSG for three months , while the third group (G3) has intubated orally and daily with ED50 of curcumin (60 mg / kg) , the fourth group intubated orally and daily with 3mg /kg of MSG and 60 mg / kg of curcumin for three months .
Fasting blood samples were collected from fasted rabbits at pretreated period , Mid-experiment and at the end of experiment to study the following parameters : concentration of soluble-AchE enzyme (G1) , membrane-associated AchE (G4), Neuronal Mitochondrial ATPase enzyme (Nmit ATPase) , MDA, GSH, ONOO_ , total protein concentration (TP) in serum and CSF , glucose concentration (GLU) in serum and CSF , measurement of Ca + and Fe + ions . in addition to measurement the ghrelin/obestatin ratio and corticosterone hormone .
The results revealed that oral dosing with MSG caused a significant decrease (P <0.01) in membrane-associated AchE (G4) , the concentration of Nmit ATPase , GSH, TP in serum and CSF, ghrelin/obestatin ratio and significant increase (P < 0.01) AchE(G1) , MDA , ONOO_ , GLU in the serum and CSF , Ca + , Fe+ and corticosterone hormone compared with the control group.
The group that treated with ED50 of curcumin revealed a significant increase (P <0.01) in Nmit ATPase, GSH, TP in serum and CSF , GLU in the serum and CSF and a significant decrease (P <0.01) in the concentration of AchE (G4) , AchE (G1) , MDA , ONOO, Ca + , Fe + and corticosterone hormone , while no significant difference was observed in the concentration of GLU in serum and CSF , ghrelin/obestatin ratio compared with the control group.
Experience also shows that oral dosing with MSG and curcumin caused significant increase (P <0.01) in AchE (G4) , and a significant decrease (P <0.01) in AchE (G1), the TP in serum and CSF , Ca + and ghrelin/obestatin ratio ,while no significant difference was observed in the concentration Nmit ATPase , GSH, MDA, ONOO , Fe + and corticosterone hormone.
Histological results from rabbits treated with MSG have showed degenerative changes in nervous tissue by H&E , the treatment of nervous tissue with Silver stain showed deposit of beta Amleod plaques in cerebrum , cerebellum and spinal cord, compared with the control group , while the results showed the natural structure of the nervous tissue by H & E in group that treated with MSG and curcumin with lack of deposition of Aβ in the nervous tissue by Silver stain compared with the control group.

In conclusion , results of this study that monosodium glutamate (MSG) causes clearly pathological changes in nervous tissue and confirm that treated animals for three months with ED50 of curcumin(60 mg/kg/BW) have protective role against the damage of the nervous tissue and some of physiological parameters in male rabbits .