University of Kerbala
اسم الباحث : ياسمين خضير خلف الغانمي
الكلية : كلية التربية للعلوم الصرفة
الاختصاص : علوم الحياة
سنة نشر البحث : 2011
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
هدفت الدراسة الحالية إلى دراسة بعض الجوانب الوراثية الخلوية والبيولوجية الجزيئية والفســيولوجية لـــــدى مرضــى ابيضاض الــــــدم النــــيقياني الحاد فـي محافظة كربلاء (AML )Acute myeloid leukemia قبل وبعد العلاج الكيميائي وتضمنت الدراسة ثلاث محاور رئيسة وهي:
1-الــــدراسة الــــــوراثية الخلوية تضمـــــنت إجراء الاختبارات الـــوراثية الخلوية ومنها CA) ) Chromosomal Abberation و(Mitotic Index (MIو(BI Blast Index( إذ أظهرت الدراسة حدوث تغيرات كروموسومية عددية في حالة من الحالات المدروسة قبل العـــلاج الكيميـــائي (1 )del,(-1 ) 45,XY والحالة الأخرى بعد العلاج الكيميائي وهي (9;22 )t XY , 45 بالإضافة إلى ارتفاع معدلات معامل الانقسام الخلوي MI ومعدلات معامل الأرومة الليفية BI لدى المرضى قبل العلاج الكيميائي مقارنة بالعينة القياسية في حين انخفضت معدلات الـMI وارتفعت معدلات BI معنويا بعد العلاج الكيميائي عند مقارنتها مع معدلاتها قبل العلاج . في حين بقيت معدلات BI ,MI مرتفعة مقارنة بالعينة القياسية بعد العلاج الكيميائي كما بينت الدراسة أيضا ظهور تشوهات كروموسومية مختلفة لدى المرضى بعد العلاج الكيميائي ودراسة تحليل سجلات النسب للمرضى التي بينت انه من الممكن ان يكون المرض متوارث ضمن عوائل معينة .
2 –الدراسة البيولوجية الجزيئية استخدم في هذه الدراسة تفاعل البلمرة المتسلســل PCR لتشــــخيــــــص الجـــــــــيــــــنات الطـــــافــــــرة فـــــــي الــــــــمـــرض وهـــــــي جــين Fms Like Tyrosine kinase( FLT3) وجين( MLL) Mixed linage leukemiaلعدد من المرضى قبل وبعد العلاج الكيميائي حيث بينت الدراسة حدوث طفرات لثلاث من المرضى الأول ,حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية غير طبيعية بعد العلاج الكيميائي ,الثاني حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية طبيعية قبل العلاج الكيميائي والثالث حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية غير طبيعية قبل العلاج الكيميائي. في حين حدثت طفرة لجين MLL لنسبة من المرضى, الأول حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية طبيعية بعد العلاج الكيميائي؛الثاني والثالث حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية طبيعية قبل العلاج الكيميائي؛الرابع حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية غير طبيعية قبل العلاج الكيميائي والخامس والسادس حدوث طفرة مع هيأة كروموسومية طبيعية قبل العلاج الكيميائي وبينت الدراسة إن اثنين من المرضى حدثت لديهم طفرات في كلا الجينين FLT3 , MLL .
3 –الدراسة الفسيولوجية تم قياس مستويات هرمون الاريثروبايوتين Erythropoitin والـAtrial Natriuritic Peptide(ANP) والبروتين البولي المجهــــري Microalbuminuria ,حيث بينت الدراسة حدوث ارتفاع معنوي( p<0.01) في مستويات المعايير الثلاثة قبل العلاج الكيميائي في الذكور. إما الإناث فكان الارتفاع معنويا (p<0.05) قبل العلاج الكيميائي مقارنة بالعينة القياسية, وكان الارتفاع معنوي في مستويات هرمون الاريثروبايوتين والـANP والبروتين البولي ألمجهري Microalbuminuria أكثر بعد العلاج الكيميائي . كما بينت الدراسة ؛انخفاضا معنويا في مستويات الحديد وسعة ارتباط الحديد الكلية حيث ارتفعت مستويات الفيرتين لــدى المرضى قبل العلاج الكيميائي بينما انخفضت معنويا p<0.01) )مستويات الحديد وقابلية ارتباط الحديد الكلية ومستويات الفيرتين بعد العلاج الكيميائي .وبينت الدراسة الحالية ارتفاع معنوي( p<0.01) في معدل العدد الكلي لكريات الدم البيض والعدد التفريقي لخلايا الدم البيض, بينما انخفضت معنويا( p<0.01) معدلات الصفيحات الدموية قبل العلاج الكيميائي . كما انخفضت معنويا p<0.01) ) معدلات العدد الكلي والتفريقي لخلايا الدم البيض وشمل معدلات الصفيحات الدموية بشكل اكبر بعد العلاج الكيميائي مقارنة بمعدلاتها قبل العلاج الكيميائي .
بينت الدراسة وجود ارتباط بين بعض المعايير الوراثية والفسيولوجية ومنها العلاقة المعنوية الموجبة (p<0.05 ) بين معامل الانقسام الخلوي ومعامل التحسس الخلوي لدى الاناث بعد العلاج الكيميائي. وكما ظهرت علاقة معنوية موجبة (p<0.05) بين مستويات هرمون الـANP ومستويات البروتين البولي المجهري Microalbuminuria لدى الإناث قبل العلاج. فضلا عن العلاقة المعنوية (p<0.01 ) الموجبة بين عدد الصفيحات الدموية ومستويات هرمون الاريثروبايوتين لدى الإناث بعد العلاج الكيميائي . والعلاقة المعنوية(p<0.05 ) السالبة بين المتغيريين أعلاه لدى الذكور قبل العلاج الكيميائي .والعلاقة المعنوية (p<0.05 ) السالبة بين مستويات الفيرتين وسعة ارتباط الحديد الكلية لدى الذكور قبل العلاج الكيميائي .وبينت الدراسة وجود علاقة ارتباط معنوية بين المعايير الوراثية – الفسيولوجية حيث اظهرت الدراسة علاقة ارتباط معنوية (p<0.05 ) موجبة بين معامل الانقسام الخلوي MI ومستويات الفيرتين لدى الإناث قبل العلاج الكيميائي . والعلاقة المعنوية (p<0.05 ) السالبة بين معامل التحسس BI ومستويات الحديد لدى الإناث قبل العلاج الكيميائي . والعلاقة المعنوية (p<0.05 ) الموجبة بين BI وعدد الخلايا اللمفاوية لدى الإناث قبل العلاج الكيميائي. والعلاقة المعنوية (p<0.01 ) السالبة بين BIعدد الخلايا العدلة لدى الإناث قبـــل العلاج الكيميائي والعلاقة المعنوية (p<0.05 ) الموجبة بين BIوعدد الخلايا الحمضة لدى الإناث قبل العلاج الكيميائي والعلاقة المعنوية (p<0.05 ) الموجبة بين BIوعدد الخلايا القعدة لدى الإناث قبل العلاج الكيميائي بالإضافة إلى وجود علاقة ارتباط معنوية (p<0.05 ) موجبة بين معامل الانقسام الخلوي ومستويات الحديد لدى الذكور قبل العلاج الكيميائي. كما كانت العلاقة معنوية (p<0.01 ) موجبة بين MIوعدد الخلايا الحمضة لدى الذكور بعد العلاج الكيميائي. والعلاقة المعنوية (p<0.05 ) الموجبة بين MI ومستويات الحديد لدى الإناث بعد العلاج الكيميائي .
Genetic and phyisyological study for sample of Acute myeloid leukemia patient in Karbala city
The present study amied to study some cytogenetic ,molecular biology and physiological sides in acute myeloid leukemia (AML) patients before and after chemotherapy in kerbala proviens .The study consist from three axis :
1-Cytogenetic Study consist of cytogenetic testes its :CA,MI,BI the present Study show numerical chromosomal changes in one case from the cases study before chemotherapy its :45,XY,(-1),del(1) ,another case after chemotherapy its 45,XY,t(9;22),In addition high level of MI mean and BI in patient before chemotherapy compared with control decreased level of MI and high level of BI significantly after chemotherapy compared with their mean before therapy while means of BI,MI stay high compared with control after therapy . The present study showed also Occur different chromosomal abnormalities in patient after chemotherapy also studied pedigree analysis.
2- Molecular biological study in this study used Polymerase Chain Reaction (PCR) to identification mutants genes in disease its : FLT3 (Fms like tyrosin kinase), MLL(Mixed linage leukemia) for numbers of patient before and after chemotherapy, The study showed that occur mutation for three patient first mutation occur with abnormal karyotype after therapy second mutation occur with normal karyotype ,Third mutation occur with abnormal karyotype before therapy for FLT3 gene compared to MLL gene occur mutations for six patients first mutation with normal karyotype after chemotherapy second and Third mutation with normal karyotype before chemotherapy , fourth mutation with abnormal karyotype befor chemotherapy and Fifth ,sixth mutation occure with normal karyotype before chemotherapy ,The study showed that tow of patient had mutation in both genes FLT3 and MLL.
3-physiological study Measurement of erythropoietin ,ANP ,Microalbuminurea level, The study showed significant height(p<0.01) in three parameters levels before chemotherapy in male while female had significant height (p<0.05) before chemotherapy compared with control ,and significant hight in erythropoietin ,ANP,Microalbuminurea more after chemotherapy. The study showed high level of Ferritin for patient before chemotherapy while significant decrease(p<0.01) in Iron ,Total iron Binding capacity and Ferritin levels after chemotherapy ,The present study showed that significant height(p<0.01) in Total W.B.C and differential count mean while significant decrease(p<0.01) in platelets count before chemotherapy,signifcant decrease in Total and differential count,platletes count after chemotherapy compared with their means before chemotherapy.
In addition correlation relationship occur between some genetic and physiological parameters, it: significant positive(p<0.05) relationship between MI and BI in Female after chemotherapy and significant (p<0.05) positive relationship ANP ,Microalbuminuria level in Female before therapy , significant (p<0.01) positive relationship between number of platelets and erythropoietin level in female after chemotherapy and significant (p<0.05) negative relationship between these parameters in male before chemotherapy , significant (p<0.05) negative relationship between ferritin levels and TIBC in male before chemotherapy. The present study showed significant correlation relationship between genetic-physiological parameters ,study showed significant(p<0.05) positive correlation between MI and ferritin levels in female before chemotherapy and significant(p<0.05) negative relationship between BI and Iron levels in female before chemotherapy and significant(p<0.05) positive correlation between BI and lymphocyte in female before chemotherapy , significant(p<0.01) negative relationship between BI and Nutrophile in female before chemotherapy , significant(p<0.05) positive correlation between BI and Esinophile in female before chemotherapy and significant(p<0.05) positive correlation between BI and Basophile in female before chemotherapy ,In addition significant (p<0.05) positive relationship between MI and Iron level in male before chemotherapy and significant (p<0.01) positive relationship between MI and Esinophile in male after chemotherapy, significant (p<0.05) positive relationship between and MI and Iron levels in female after chemotherapy.
