اسم الباحث : " الخلاصة الزائفة الزنجارية (Pseudomonas) هي بكتيريا ممرضة سلبية الغرام، وانتهازية، تنتشر على نطاق واسع في البيئة، بما في ذلك الماء والتربة والمنتجات الغذائية. يُشكل وجودها في الحليب واللحوم مخاطر صحية عامة كبيرة نظرًا لقدرتها على التسبب في عدوى شديدة، و
اسم المشرف : ا.د. ياسر جمال جميل; ا.م.د محمد اسعد صالح
الكلمات المفتاحية : "Symbol Abbreviation 16SrRNA 16 Ribosomal RNA Ail Attachment Invasion locus BPW Buffer peptone water CDC Central of Disease Control CFU Colony forming unit CIN Cefsulodin Irgasan Novobiocin CLSI Clinical and laboratory standard institutes DNA Deoxyriobose
الكلية : كلية الطب البيطري
الاختصاص : الصحة العامة علوم الطب البيطري
سنة نشر البحث : 2025
تحميل الملف : اضغط هنا لتحميل البحث
الخلاصة
أُجريت دراسة حديثة للكشف عن انتشار بكتيريا Yersinia enterocolitica في الحليب الخام، ولحوم العجول، ولحوم الدجاج، والبيض في أسواق محافظة كربلاء. جُمعت 200 عينة، 50 عينة من كل عينة، بطريقة معقمة، وأُرسلت إلى المختبر لعزلها وتحديد نوعها. أظهرت نتائج زراعة العينات على وسط CIN وجود مستعمرة مميزة لبكتيريا يرسينيا إنتيروكوليتيكا، وتبين من خلال صبغة غرام أن البكتيريا سلبية الغرام، مرتبة في أزواج أو سلاسل بأطوال مختلفة. أما نتائج الاختبارات البيوكيميائية لبكتيريا يرسينيا إنتيروكوليتيكا، فكانت إيجابية لإنزيمات الكاتالاز وهيدروكسيد البوتاسيوم، بينما سلبية لأوكسيديز تخمير اللاكتوز. تم توحيد مزرعة بكتيريا Yersinia enterocolitica لمدة ٢٤ ساعة عند درجة عكارة ٠.٥ ماكفارلاند. قطّعت عينات لحم البقر والدجاج بطريقة معقمة وغُمرت في المعلق البكتيري، بينما تم تلقيح قشور البيض الكاملة سطحيًا بالغمس لضمان التلوث. ثم قُسّمت العينات الملقحة إلى مجموعات تجريبية للتدخل المضاد للميكروبات. عولجت حراريًا باستخدام حمام مائي، مع تعريض العينات لدرجة حرارة ٦٠ درجة مئوية لمدة ٣٠ دقيقة و٧٠ درجة مئوية لمدة ١٥ دقيقة. تعرّضت مجموعات منفصلة لأشعة فوق البنفسجية-ج بطول موجي ٢٥٤ نانومتر لفترات تعريض ١٠ و١٥ و٢٠ دقيقة. بعد كل معالجة، جُنّست جميع العينات في محلول مُعادل، وخُفّفت بشكل متسلسل، ثم وُضعت على أجار سيفسولودين-إرجاسان-نوفوبيوسين (CIN). حُضّنت الأطباق عند درجة حرارة ٣٤ درجة مئوية لمدة ٤٨ ساعة. تم تقييم قابلية البكتيريا للحياة من خلال تعداد مستعمرات عين الثور المميزة، مع تسجيل النتائج كوجود أو غياب للنمو.
أظهرت النتائج أن أعلى معدلات مقاومة لوحظت ضد الأموكسيسيلين والبنسلين ج. كما لوحظت مقاومة كبيرة ضد سبيراميسين، ولينكومايسين، ونيتروفورانتوين. ولوحظ مستوى مقاومة متوسط لسيبروفلوكساسين، وسيفاليكسين، وجنتاميسين، وستربتوميسين، وتوبراميسين، وإريثروميسين. أظهرت النتائج أن 34 عينة تم تأكيدها إيجابية من خلال تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، مما يمثل معدل كشف بنسبة 17%. استند هذا التحديد إلى تضخيم جين 16S rRNA، والذي استُخدم لتحديد البكتيريا على نطاق واسع. من ناحية أخرى، أظهرت النتائج أن قابلية البكتيريا للحياة لوحظت في جميع مصفوفات الأغذية بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية-C لمدة 10 دقائق، مع تكوين مستعمرات كبيرة مما يشير إلى انخفاض طفيف في الحمل البكتيري. تم تحقيق انخفاض جزئي في عدد الميكروبات بعد التعرض المطول لمدة 15 دقيقة، كما يتضح من الانخفاض الملحوظ في عدد المستعمرات؛ ومع ذلك، لم يتم تحقيق القضاء التام. لم يتم إثبات التعطيل التام بشكل قاطع إلا بعد معالجة بالأشعة فوق البنفسجية-C لمدة 20 دقيقة، مع غياب تكوين المستعمرات المميزة على جميع الوسائط المزروعة. فيما يتعلق بالتدخلات الحرارية، تم تأكيد بقاء يرسينيا إنتيروكوليتيكا بعد المعالجة عند 60 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، مع استعادة المستعمرات القابلة للحياة بنجاح من جميع العينات الملقحة. على العكس من ذلك، لوحظ التعطيل الميكروبي الكامل بعد التعرض لدرجة حرارة 70 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة، كما يتضح من الغياب التام للنمو على جميع وسائط الطلاء.
Detection of Yersinia enterocolitica in Selected Food Product in Karbala Province and Assessment of Thermal and U.V Light Methods on its Viability
Summary
The recently study have been conducted to detection the prevalence of Yersinia enterocolitica in raw milk, calve meat, chicken meat and egg in markets of Kerbala province. 200 samples 50 from each one have been collected aseptically and send to laboratory for isolation and identification of Yersinia enterocolitica , the study beginning from November 2024 to April 2025, the results of prevalence of Yersinia enterocolitica have been showed 34% in raw milk ,2% egg,14%calf meat and 20%chicken meat respectively. The results of culturing of samples on CIN medium were revealed the presence of characteristic colony of Yersinia enterocolitica, the staining of Yersinia enterocolitica by gram stain have been appeared gram negative coccoid arranged in pairs or chains with varying length. the results of biochemical test for Yersinia enterocolitica were showed catalase, hydroxide potassium positive while oxidase, lactose fermentation negative.
A 24-hour culture of Yersinia enterocolitica was standardized to a 0.5 McFarland turbidity. Calf and chicken meat samples were aseptically diced and immersed in the bacterial suspension, while whole eggshells were surface-inoculated via dipping to achieve contamination. The inoculated samples were subsequently divided into experimental groups for antimicrobial intervention. Thermal treatment was applied using a thermal temperature, with samples exposed to 60°C for 30 minutes and 70°C for 15 minutes. Separate groups were subjected to UV-C irradiation at a wavelength of 254 nm for exposure times of 10, 15, and 20 minutes. Following their respective treatments, all samples were homogenized in a neutralizing buffer, serially diluted, and plated onto Cefsulodin-Irgasan-Novobiocin (CIN) agar. Plates were incubated at 34°C for 48 hours. Bacterial viability was assessed through the enumeration of characteristic bull’s-eye colonies, with results recorded as the presence or absence of growth
The results of Ab resistant showed that the highest resistance rates were observed against Amoxicillin and Penicillin G. Considerable resistance was demonstrated against Spiramycin, Lincomycin, and Nitrofurantoin. A moderate level of resistance was noted for Ciprofloxacin, Cephalexin, Gentamicin, Streptomycin, Tobramycin, and Erythromycin. The results showed that 34 samples were confirmed as positive by PCR analysis, representing a 17% detection rate. This identification was based on the amplification of 16S rRNA gene, which was utilized for broad bacterial identification. On the other hand, the results showed that bacterial viability was observed across all food matrices subsequent to a 10-minute UV-C exposure, with substantial colony formation indicating a negligible reduction in bacterial load.
A partial reduction in microbial population was achieved following an extended exposure of 15 minutes, as evidenced by a marked decrease in colony counts; however, complete eradication was not obtained. Total inactivation was conclusively demonstrated only after a 20-minute UV-C treatment, with an absence of characteristic colony formation on all cultured media. Regarding thermal interventions, survival of Yersinia enterocolitica was confirmed following treatment at 60°C for 30 minutes, with viable colonies successfully recovered from all inoculated samples. Conversely, total microbial inactivation was observed after exposure to a temperature of 70°C for a duration of 15 minutes, as indicated by a complete absence of growth on all plating media.


